伪狂犬病病毒Ea株糖蛋白gK基因的克隆、序列分析以及在大肠杆菌中的表达     

徐引弟  陈焕春  肖少波  何启盖  钱平 《中国兽医学报》2003,23(2):138-141

  相似文献   

基因工程在动物医药学中的应用与研究进展   总被引：1，自引：0，他引：1  

朱善元 《四川畜牧兽医》2003,30(6):33-35

本文阐述了基因工程在动物医药学中的最新应用研究，重点介绍了基因工程药物、基因工程抗体、基因治疗技术、基因诊断技术等几大生物医药技术的研究和应用，在预防和临床医学上以及对传统医药学都产生了深刻的变革，具有广阔的应用前景。  相似文献   

5—氮胞苷介导的转基因cry1Ab的阶段复活及其对水稻的生物学效应     

吴刚  Illimar  ALT 《中国水稻科学》2001,15(1):63-66

用不同浓度的和5－氮胞苷溶液配合不同时间处理了发生的在转录水平的转基因cry1Ab沉默水稻。结果表明，5－氮胞苷处理能使8％－30％转基因水稻植株的转基因cry1Ab恢复表达活性，复活性基因表达的Cry1Ab蛋白含量可达0.147％，45mg/L5-氮胞苷处理1d可使转基因cry1Ab的复活率及Cry1Ab蛋白含量达最高。同时，5－氮胞苷处理使转基因水稻植株出现矮化，分蘖数、单株粒重下降，穗长减小及开花期延迟等发育异常现象。5－氮胞苷作为一种弱诱变剂在克服转基因沉默及创造具优良农艺性状的转基因植物中具有一定的应用价值。  相似文献   

红巴梨果实花青素生成相关基因f3h全长片段的克隆   总被引：2，自引：1，他引：1  

吴少华  张大生 《福建农林大学学报(自然科学版)》2002,31(3):361-365

利用 RT-PCR方法从红巴梨成熟果皮中克隆出花青素生成相关基因 f3 h的全长片段 (1 0 95 bp) .核苷酸序列测定表明 ,该基因与苹果的 f 3 h基因同源性高达 97% .  相似文献   

犬冠状病毒的分离鉴定及其纤突蛋白基因的克隆与序列比较   总被引：10，自引：0，他引：10  

胡桂学  夏咸柱 《中国兽医学报》1997,17(6):563-569

以犬胎原代细胞，采用同步接种、带毒传代和添加新细胞的方法，从１例腹泻犬脾脏和１例临床健康犬肠内容物中分离出２株犬冠状病毒（ＣＣＶＹＳ１，ＣＣＶ ＣＩ１）。该２株病毒可使ＣＲＦＫ细胞出现典型的细胞融合病变，与从美国引进的ＣＣＶＮＬ－１８参考株形成的细胞病变相似；电镜负染和超薄切片观察，分离毒株细胞培养物中均含有典型的冠状病毒粒子，并形成胞浆内包涵体；经理化学、生物学鉴定，濉有ＣＣＶ的特性；间接免疫荧  相似文献   

芝麻人工构建雄性不育基因的转化研究初报   总被引：9，自引：0，他引：9  

陈占宽  傅荣昭等 《华北农学报》1996,11(4):33-38

用基因枪将人工构建的植物雄性不育基因ＴＡ２９－Ｂａｒｎａｓｅ及其标记基因ｂａｒ导入芝麻豫芝４号的离体子叶，在ＭＳ＋５ｍｇ·Ｌ－１６－ＢＡ＋１ｍｇ·Ｌ－１ＩＡＡ＋１ｍｇ·Ｌ－１ＡＢＡ＋５ｍｇ·Ｌ－１ＡｇＮＯ３的培养基上交培养１２天，转入光、暗光替培养，诱导出不定芽。经添加２ｍｇ·Ｌ－１除草剂（ＢＡＳＴＡ）的上述培养基筛选，获得了１１个ＢＡＳＴＡ抗性株系，对其中３个株系进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交鉴定分析，证实其中２个为转基因株系，转化率为１．４６％  相似文献   

利用BrdU在CEF(TK~ )细胞中筛选TK~-重组鸡痘病毒   总被引：1，自引：0，他引：1  

郭志儒  金宁一  方厚华  罗坤  夏志平  殷震 《中国兽医学报》2001,(6)

将新城疫病毒 (NDV)四平株 HN基因 ,插入不含报告基因、以 TK为侧翼的鸡痘病毒表达载体 p UTA- 2中的复合启动子下游 ,获得重组表达质粒 p UTA- 2 HN。将重组表达质粒转染鸡痘病毒 (FPV)感染的鸡胚成纤维细胞 (CEF) ,培养、收获病毒后 ,用含 40 m g/ L 5 -溴 - 2 -脱氧尿嘧啶 (Brd U )的培养液 ,在 CEF(TK )细胞中筛选培养 2代 ,然后用不含 Brd U的培养液进行病毒蚀斑纯化 ,成功筛选出表达 NDV HN蛋白的 TK-重组鸡痘病毒  相似文献   

IBDV野毒株主要结构蛋白基因RT─PCR方法的建立     

姜平  陈溥言  蔡宝祥 《中国兽医学报》1997,(1)

借助计算机软件，在分析比较了９个传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）Ａ片段结构蛋白基因的基础上，设计并合成了２对ＶＰ２和ＶＰ３基因ＰＣＲ引物，经ＲＴ－ＰＣＲ反应条件优化选择，成功地建立了ＲＴ－ＰＣＲ方法，用于扩增ＩＢＤＶＶＰ２和ＶＰ３基因，经琼脂糖凝胶电泳和分子杂交鉴定，获得４个ＩＢＤＶ野毒株ＶＰ２和ＶＰ３基因，为ＩＢＤＶ分子生物学研究奠定了基础  相似文献   

Gene dropping analysis of founder contributions in a closed Japanese black cattle population   总被引：1，自引：0，他引：1  

Takeshi HONDA  Tetsuro NOMURA  Moriyuki FUKUSHIMA  Fumio MUKAI 《Animal Science Journal》2002,73(2):105-111

Gene dropping simulation was applied to Japanese Black cattle population in Hyogo prefecture, to examine the survivals of alleles originated from founder animals. In the analysis, unique alleles were assigned to founders, and the genotypes of all descendants along the actual pedigree were generated through Monte Carlo simulation following Mendelian segregation rules. By replicating this process 10 000 times, the distribution of frequencies of alleles from each founder was estimated. From the distribution, several quantities useful for the management of genetic diversity, such as the probability of allele extinction and the probability of alleles surviving at a critically low frequency were derived. The materials used were 68 781 animals born in 1955–1998 and their pedigree records traced back to the population in 1937 or before. The expected number of alleles retained in the population drastically decreased during the analyzed period, and reached to 57.9 in the population of 1998, which was only 3.3% of the total number of alleles assigned to founders. Detailed analysis of major founders with relatively high genetic contributions to the current population revealed that alleles from most of the major founders are now at high risk of future extinction. These results strongly suggest that for the management of genetic diversity, the genetic contributions of founders are not fully informative, and emphasize the importance of the detection of live animals having founder alleles with high extinction possibilities.  相似文献   

新城疫病毒融合蛋白裂解位点基因的分离克隆及在原核细胞中的表达   总被引：5，自引：1，他引：4  

宋长绪  刘福安  杜伟贤 《中国兽医学报》1996,(6)

用ＳＰＦ鸡胚繁殖新城疫病毒（ＮＤＶ）Ｆ４６Ｅ９株（强毒）、ＬａＳｏｔａＥ４株（弱毒），对病毒进行纯化，抽提ＲＮＡ。用１对均为２７个碱基的引物进行ＲＴ－ＰＣＲ，扩增出了２个毒株的融合蛋白裂解位点（Ｆｃ）基因。将Ｆｃ基因定向克隆入ｐＵＣ１８的ＥｃｏＲＩ和ＳａｌⅠ位点之间，获得２个毒株Ｆｃ基因克隆ｐＵＣＦ４６Ｆｃ和ｐＵＣＬａＦｃ，用ＥｃｏＲＩ／ＳａｌⅠ双酶切法、ＰｓｔⅠ单酶切法、ＰＣＲ法和核酸探针法对其进行了鉴定。将鉴定好的ＬａＳｏｔａＥ４Ｆｃ基因定向导入表达载体质粒ｐＢＶ２２１，获得重组子ｐＢＶＬａＦｃ。ＰＣＲ和内切酶酶切法鉴定表明，Ｆｃ插入的位置和方向都正确无误。用Ｅ．ｃｏｌｉＤＨ５α通过热诱导法进行了表达。用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ法检测了表达产物。结果表明，有１条能够与ＮＤＶ多抗反应的特异条带，分子量约１５７００，与预期大小一致，说明是Ｆｃ基因的表达产物  相似文献