解淀粉芽孢杆菌菌株P-r21抑菌广谱性及对番茄灰霉病的防治     

李永丽  源春彦  周洲  王春生  雷振山 《中国农学通报》2023,39(6):105-110

为明确内生解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)菌株P-r21的抑菌广谱性及对番茄灰霉病的防治效果,本研究优化了菌株P-r21发酵条件,利用平板对峙法测定了该菌株对6种病原菌的抑菌活性及对番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)孢子萌发的抑制作用,并通过离体接种试验研究了对番茄灰霉病的防效。结果表明：菌株P-r21最佳发酵条件为在PYJ中培养初始pH 6.0,培养时间为12 h。菌株P-r21对供试的6种植物病原菌(Botrytis cinerea、Fusarium proliferatum、Rhizoctonia cerealis、Gaeumannomyces graminis、Fusarium graminearum、Colletotrichum karstii)的生长均表现出抑制作用;对C. karstii和B.cinerea抑制作用最强,抑菌率达到88.0%和84.5%。发酵滤液对B. cinerea孢子萌发抑制率达80.6%,对叶片和果实灰霉病的防效达到100%和80.0%;发酵液10倍稀释后防效也可达到67.1%和60.7%。本研究明...  相似文献   

青海高寒草地牧草拮抗内生细菌的筛选、鉴定及促生功能测定     

尧贺敏  汤梅  巩雪花  金梦军  杨成德 《中国农学通报》2023,39(6):124-128

以尖镰孢菌黄瓜专化型(Fusarium oxysporum f.sp.cucumerium)为指示菌从青海高寒草地牧草内生细菌中筛选拮抗菌株,结合形态学特征和16Sr DNA基因序列同源性分析鉴定,并进行促生功能测定。结果表明,供试的81株内生细菌中36株有拮抗作用,占供试菌株的44.0%,其中从根部分离的13株的抑菌率均在50.0%以上,菌株2018GH11对6属8种病原真菌的抑菌率均在50.0%以上,特别对孜然根腐病菌的抑菌率达67.6%,抑菌谱宽;根据形态学特征和16Sr DNA基因序列分析将其鉴定为暹罗芽孢杆菌Bacillus siamese;2018GH11具有固氮能力,无溶磷和产IAA能力;发酵菌剂2018GH11用量为0.50%时,黄瓜株高、茎粗、叶片数、鲜重及干重分别比对照增加了15.33%、39.40%、22.22%、215.99%和126.70%。该结果表明高寒草地牧草内生细菌2018GH11具有良好的防病促生作用,开发潜力巨大。  相似文献   

橡胶树棒孢霉落叶病病原菌的生物学特性   总被引：2，自引：0，他引：2  

张春霞  何明霞  李加智  王进强  蒋桂芝  侯建勇 《植物保护》2010,36(2)

通过对橡胶多主棒孢进行生物学特性研究,结果表明:菌丝生长的适宜温度范围为25～30℃,最适温度为30℃;最适pH范围为4～8;菌丝在以麦芽糖为碳源和以KNO3为氮源的培养基上生长最好。分生孢子萌发的适宜温度范围为20～35℃,最适温度为25℃;水滴是孢子萌发的必要条件;在不同的pH条件下分生孢子萌发无明显差异;分生孢子在果糖中萌发率最低。  相似文献   

拟南芥转录因子IDD4不同突变体对灰葡萄孢菌的抗性分析          下载免费PDF全文

李林倩  张豪  徐晓东  于德嘉  张国斌  鲁旭蓉  陈健鑫  王云月  杨红玉 《植物保护学报》2024,51(1):261-268

为明确IDD家族IDD4基因在拟南芥Arabidopsis thaliana抵抗灰葡萄孢菌Botrytis cinerea侵染过程中的作用,通过统计病情指数检测拟南芥野生型（wild type,WT）植株、过表达植株IDD4-OE和缺失突变体idd4植株感染灰葡萄孢菌情况,利用组织染色检测叶片细胞死亡和H₂O₂的积累情况,采用实时荧光定量PCR（real-time quantitative-PT-PCR,qRT-PCR）技术分析灰葡萄孢菌肌动蛋白基因Bc. ACTIN在3种植株叶片中的表达情况,并施加0.1 mmol/L外源水杨酸（salicylic acid,SA）后测定IDD4-OE植株的病情指数。结果显示,不同株系对灰葡萄孢菌的抗性由高到低依次为idd4＞WT＞IDD4-OE,IDD4-OE植株中病原菌感染部位的寄主细胞死亡程度比idd4植株严重。染色结果表明,病原菌侵染拟南芥后4 h,接种部位已有H₂O₂积累。qRT-PCR反应结果显示,Bc. ACTIN在IDD4-OE中比在idd4植株中的表达水平更高,表明灰葡萄孢菌在IDD4-OE植株中的繁殖速率更快。对IDD4-OE植株外源施加SA后,其病情指数、Bc. ACTIN表达量与WT植株间均无显著差异,说明SA能将感病植株的抗性提高至WT植株的水平,表明IDD4作为负调控因子参与了拟南芥对灰葡萄孢菌的抗性调控,SA在其中发挥着重要作用。  相似文献   

连作草莓低发病土壤与高发病土壤理化性质及生物学特征差异比较     

李梦雅  陈莎莎  王世梅 《江苏农业学报》2021,37(4):910-918

为探索连作草莓低发病土壤形成的机制,本研究通过对尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)孢子萌发率以及连作土壤理化性质的测定,结合Real-time PCR及高通量测序对南京郊区多年连作草莓大棚低发病土壤和高发病土壤的理化性质及生物学特征进行比较,分析其微生物群落特征.结果表明,低发病土壤中尖孢镰刀菌孢子萌发率明显低于高发病土壤.二者理化性质亦呈现出不同的变化规律,低发病土壤pH、EC、总碳含量、总氮含量和总磷含量均高于高发病土壤,低发病土壤的大团聚体(>0.250 mm)比例及土壤过氧化氢酶活性显著高于高发病土壤.Real-time PCR及高通量测序结果显示,低发病土壤中尖孢镰刀菌数量显著低于高发病土壤,且低发病土壤中鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas)、黄杆菌属(Flavobacterium)、类芽孢杆菌属(Paenibacillus)、游动放线菌属(Actinoplanes)等类群的丰度显著高于高发病土壤.因此,低发病土壤的形成与土壤理化性质、土壤中病原菌的数量及潜在有益微生物的种类和丰度密切相关.  相似文献   

人参尖镰孢菌原生质体制备条件优化及绿色荧光蛋白转化     

吴照群  卢宝慧  王莹  王苏宁  岳琪  杨翠  高洁 《吉林农业大学学报》2021,43(4):414-419

为人参根腐病菌的侵染及防治提供可视化的检测和分析手段,通过摸索分生孢子最适萌发时间、酶解液组成、酶解温度、摇床转数及渗透压稳定剂种类,研究人参根腐病菌-尖镰孢菌(Fusarium oxysporum)原生质体制备技术.结果 表明:将人参尖镰孢菌野生型菌株0083分生孢子在YEPD培养基中培养11h,酶解温度37℃、摇床转数180 r/min,渗透压稳定剂为0.7 mol/L NaC1的条件下,酶解液(崩溃酶、溶菌酶、纤维素酶和蜗牛酶质量浓度分别为0.01,0.03,0.02,0.005 g/mL)酶解0.25 g菌丝时,收获的菌丝体最有利于原生质体的形成和释放,共获得2.8× 107/mL原生质体.用聚乙二醇PEG介导外源DNA随机插入的方法,成功获得具有绿色荧光信号和潮霉素B筛选标记的转化子,转化效率(以单位质量的DNA的转化子数计)为1400/mg.选取转化子FOG1菌株经过6代继代培养后,菌落形态、产孢量和绿色荧光蛋白的表达与菌株0083无明显差异.因此,利用聚乙二醇(PEG)为媒介的遗传转化体系是稳定高效的遗传转化体系.  相似文献   

12种杀菌剂对花生褐斑病菌的室内毒力测定     

《辽宁农业科学》2021,(4)

采用单胞分离法对采自辽宁省的花生褐斑病菌进行分离,通过观察菌落、孢子形态结合ITS序列比对,确定得到的菌株为落花生尾孢(Cercospora arachidicola Hori)。为筛选出防治花生褐斑病菌的高效杀菌剂,采用纸碟法对12种杀菌剂原药进行室内毒力测定。结果表明:试验选取的12种杀菌剂均对花生褐斑病菌具有一定的毒力,其中95%咯菌腈原药的抑菌能力最强,EC_(50)为0.211μg/ml; 95%己唑醇、95%丙环唑、97%戊唑醇的抑菌能力较强,EC_(50)分别为0.264、0.369、0.428μg/ml。  相似文献   

双孢蘑菇工厂化生产关键配套装置设计与试验     

戴飞  杨杰  赵武云  李志刚  辛尚龙  张锋伟 《农业工程学报》2018,34(6):43-51

针对双孢蘑菇工厂化生产过程中有关二次发酵培养料装盘-码盘,托盘在育菇床架收布及双孢蘑菇采摘3个关键作业环节,分别设计了与各环节相配套的培养料连续装盘-码盘装置、培养料托盘机械化收布装置及与机械式育菇床架配合使用的移动式采菇滑车等作业装置,结合双孢蘑菇栽培技术要求确定了该配套装置各关键部件设计参数,并进行了作业性能测试。装置性能试验结果表明:设计的相关作业环节配套装置运行可靠、稳定,培养料压实厚度保持在269.8~281.5 mm,紧实度均值达到491.4 kg/m3,压实均匀性保持在97.38%~99.62%之间,压实效果满足双孢蘑菇后续工厂化生产需求;涉及3个工段的装置基本运行生产时间不超过5 min,提高了双孢蘑菇工厂化生产效率;设计装置产量效应显著,配套装置栽培双孢蘑菇的小区产量均值可达17.61 kg/m2,较传统人工栽培提高了5.79 kg/m2。研究结果将为双孢蘑菇工厂化生产配套装置的设计研发提供参考。  相似文献   

少孢节丛孢菌胞外几丁质酶AO-379基因克隆及其表达分析          下载免费PDF全文

钟文强  孟庆玲  乔军  陈英  贡莎莎  王熙凤  黄运福  才学鹏 《南方农业学报》2018,49(1):148-154

[目的]深入了解捕食线虫性真菌几丁质酶的生物学功能,为今后以少孢节丛孢菌重组几丁质酶AO-379研发线虫病生物防控制剂打下基础.[方法]克隆少孢节丛孢菌XJ-A1几丁质酶AO-379基因的全长序列,利用Signal P4.1 Server、InterPro、ExPASy等在线分析软件对其进行生物信息学分析;构建重组表达载体pET32a-AO-379,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞后用IPTG进行诱导表达,并以SDS-PAGE和Western blotting检测分析表达获得的融合蛋白.[结果]少孢节丛孢菌几丁质酶AO-379基因全长1475bp,含有1个1203bp的开放阅读框(ORF),编码400个氨基酸.几丁质酶AO-379基因序列与少孢节丛孢菌标准株(ATCC 24927)几丁质酶基因序列的同源性为97.08%,其推导氨基酸的同源性为98.75%.几丁质酶A0-379属于糖苷水解酶18家族,具有SXGG和VDGFDLDFE两个催化区保守序列.其中,SLGGS位于第127~131位,为底物结合位点;VDGFDLDFE位于第173~181位,为水解酶催化活性位点.经大肠杆菌诱导表达获得的融合蛋白AO-379相对分子质量为60.0kD,且能与抗少孢节丛孢菌多克隆抗体发生反应.[结论]少孢节丛孢菌几丁质酶AO-379可在大肠杆菌中成功诱导表达,且获得的融合蛋白AO-379能与抗少孢节丛孢菌多克隆抗体发生反应,可用于研发线虫病生物防控制剂.  相似文献   

南方淮山炭疽病菌的致病力分化          下载免费PDF全文

丛子文  钟步飞  黄东益  谢俊  吴文嫱  许云  夏薇  张荣萍  黄小龙 《南方农业学报》2018,49(3):501-507

[目的]明确我国南方淮山炭疽病病原菌种类及其致病力分化状况,为淮山炭疽病的综合防治和抗病育种提供理论依据.[方法]采用形态学观察,结合rDNA-ITS序列比对和系统发育进化分析,对从我国南方6省(区)四川、贵州、云南、广西、福建和海南淮山种植区典型炭疽病病叶分离获得的45株炭疽病病原菌进行鉴定,并通过接种在4种不同淮山种质(Do6-3、Do6、Do108和Do21)叶片上进行致病力检测,分析不同来源菌株的致病力差异.[结果]45株炭疽菌均鉴定为胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides).45株炭疽菌对4种淮山种质材料均能致病,根据综合致病力可将45株炭疽菌分为强、中、弱3种致病类型.其中,6株强致病性菌株均来自广西,7株弱致病性菌株主要来自云南,32株中等致病力菌株主要来自贵州、福建和海南.[结论]来源于我国南方6省(区)的45株淮山炭疽病病原菌均为胶孢炭疽菌(C.gloeosporioides),其致病力分化明显,且与地理来源具有相关性.  相似文献