对鳞翅目害虫有活性的cry1C基因的克隆和表达   总被引：2，自引：0，他引：2       下载免费PDF全文

宋福平  张杰  韩岚岚  高继国  黄大昉 《植物保护学报》2003,30(2):161-165

在鉴定苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis，简称Bt)Btc001菌株cry基因型的基础上，构建了Btc001菌株质粒DNA HindⅢ片段的文库，并利用聚合酶链式反应-限制性酶切片段多态性(PCIR-RFIP)方法筛选出含有crylC6全长基因的13．5kb大片段，酶切分析得到该片段的物理图谱，BamHI和EcoRI切完成了6．5kb含全长基因的亚克隆，并对这条6．5kb片段亚克隆、测序，序列在国际核酸序列数据库(GenBank)登记(AY007686)，并由Bt杀虫晶体蛋白基因国际命名委员会命名为cry1Cb2基因。根据序列设计了一对用于扩增全长基因的引物S581CB和S381CB，扩增产物插入表达载体pET-21b中，诱导后在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达。表达产物对小菜蛾(Plutella xylostella)表现出较高活性，LC50达到7．9μg/ml。  相似文献   

拮抗细菌菌株Bacillus spp.间的相互作用及其对水稻纹枯病的抑制   总被引：5，自引：0，他引：5       下载免费PDF全文

李湘民  胡白石  许志刚  Mew T. W. 《植物保护学报》2003,30(3):273-278

测定了6个Bacillus spp.和1个Pseudomonas sp.P-13(G-对照菌株)在PPM培养基上的相互作用。在总共42个组合中，有27个组合是可亲和性的。在以B5423为单剂之一的5个组合中，亲和性的组合有4个。在温室条件下通过分批播种，在水稻分蘖盛期喷以B5423-R(B5423的标记菌株，是利福平抗性的突变体)为单剂之一的4个亲和性组合的菌悬浮液，以检测该组合中B5423-R在水稻茎基部的种群数量。结果发现，与单剂B5423-R相比，在应用1～7天内，组合B5423-R B45中，B5423-R的群体数量显著性降低；组合B5423-R B95、B5423-R B77中，B5423-R的群体数量与单剂无显著差异；组合B5423-R B4313中，B5423-R的群体数量在应用1～4天内与单剂无显著性差异，但在应用第7天显著地高于单剂。离体叶片纹枯病痛斑面积的抑制试验表明，与各自的单剂相比，组合B95 B5423及B95 Er77显著地抑制了纹枯病病斑面积；而组合B45 B80、B45 B5423和B45 B95纹枯病病斑面积显著地高于各自的单剂；其余10个组合与各自的单剂无显著差异。  相似文献   

苏云金杆菌高效生产菌株的筛选   总被引：2，自引：0，他引：2  

马冬梅  钟启超 《昆虫天敌》1997,19(2):62-65

从灯蛾罹病死亡幼虫中分筛筛选出苏云金杆菌ＢａｃｉｌｌｕｓｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓＳＢ－１菌株，从引进的Ｂ．ｔ．菌种中筛选出ＳＢ－８菌株。该两株菌经发酵试验，生产性能良好，对抗药性强的台湾、泰国和深圳品系的小菜蛾毒力较高。田间试验表明杀虫效果好。  相似文献   

芽孢杆菌BC98-Ⅰ抗真菌物质的初步分离及特性   总被引：1，自引：0，他引：1  

高芬  马利平  乔雄梧  郝变青 《植物保护学报》2004,31(4):365-370

BC98-Ⅰ是一株分离自沤肥浸渍液的蜡状芽孢杆菌，对蔬菜、瓜类、花卉枯萎病具良好的防治效果。它分泌产生的抗真菌物质的粗提物对黄瓜、西瓜、青椒枯萎菌有很强的拮抗作用，当浓度为10mg／mL时，抑菌圈直径分别达到20．33、20．22和22．77mm。该粗提物对高温高压、紫外光和蛋白酶均不敏感。同时，它在中性偏碱(pH8～9)的条件下活性最高；在极性溶剂如水、甲醇、乙醇中溶解度大，抑菌活性高。粗提液经Sephadex G100层析后，得到了两个洗脱峰，活性物质存在于第一峰中。抑菌机制试验表明：它可造成孢子萌发率降低、菌丝生长形态异常、分支加剧并产生大量泡囊。  相似文献   

苏云金芽胞杆菌防治植物寄生线虫的研究进展   总被引：2，自引：0，他引：2  

余子全  周燚  孙明  喻子牛 《植物保护学报》2004,31(4):418-424

植物寄生线虫是一类重要的植物病原生物,给农业生产造成巨大的损失.传统方法防治植物寄生线虫都存在一定的局限性.研究发现苏云金芽胞杆菌对线虫有毒杀活性,为防治植物寄生线虫寻找到了一条新途径.文章介绍了苏云金芽胞杆菌防治植物寄生线虫的研究现状,着重阐述了苏云金芽胞杆菌的杀线虫晶体蛋白及其基因、杀线虫机制等方面的研究进展,并探讨了其中存在的问题及其对策.  相似文献   

枯草芽孢杆菌G3菌株的抗菌物质及其特性   总被引：29，自引：3，他引：29  

顾真荣  吴畏  高新华  马承铸 《植物病理学报》2004,34(2):166-172

 产几丁质酶枯草芽孢杆菌G3菌株的固体培养物在黄瓜灰霉病菌和番茄叶霉病菌抑菌试验中证实,抑菌活性物质存在于过滤上清液中,它们是从酸沉淀物中提取出的伊枯草菌素、生物表面活性素和存在于盐析粗蛋白中的几丁质酶。在叶霉孢子萌发试验中,伊枯草菌素微弱地抑制孢子萌发但强烈破坏芽管和新生菌丝;生物表面活性素和几丁质酶则强烈抑制孢子萌发并长久性地抑制芽管伸长。在PDA平板上的灰霉菌丝抑菌试验中,伊枯草菌素抑制菌丝生长,引发菌丝顶端膨大,形成泡囊,泡囊破裂后原生质外泄;几丁质酶抑制菌丝生长,引发产生不规则的菌丝团;生物表面活性素在平皿上对菌丝则不显示出抑菌活性。  相似文献   

芽孢杆菌绿色荧光蛋白标记及其在小麦体表定殖的初探   总被引：17，自引：0，他引：17  

田涛  亓雪晨  王琦  梅汝鸿 《植物病理学报》2004,34(4):346-351

 将来自质粒pAD4412的启动子和绿色荧光蛋白基因gfpmut3a插入大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭载体pBE2,构建成芽孢杆菌表达载体pGF P4412,用其转化野生型生防芽孢杆菌83-6和A-47等8个菌株,均得到良好的发光表型。质粒稳定性实验表明重组质粒pG FP4412稳定性为92%。借助荧光显微镜对gfp标记的菌株A-47-gfp在小麦体表的定殖进行初步的研究。结果表明:A-47-gfp能够在小麦根际及小麦体表定殖(包括根表和茎叶表面);相对于在茎叶表面定殖的A-47-gf p在根表定殖的菌体与根的结合更为牢固;从根基到根尖A-47-gfp的定殖量有明显的减少趋势。  相似文献   

内生拮抗枯草芽孢杆菌BS-2菌株的发酵条件   总被引：26，自引：1，他引：26  

何红  沈兆昌  邱思鑫  蔡学清  关雄  胡方平 《中国生物防治》2004,20(1):38-41

内生拮抗细菌BS 2菌株在以黄豆粉为原料的 3号培养基中生长速度快 ,发酵滤液对辣椒炭疽病菌的抑制作用强 ,菌液对辣椒果炭疽病的防效最好。培养基初始 pH值、培养时间、温度、通气量等对菌株生长及其抗菌物质的分泌有明显影响。结果表明 ,以黄豆粉培养基、初始 pH值 6 .7(灭菌后 )、2 8℃、培养 4 8h、并尽量增大培养通气量 ,为菌株的最佳发酵条件。  相似文献   

枯草杆菌的淀粉酶基因在大肠杆菌中的表达   总被引：2，自引：1，他引：2  

尹清强  韩彪  郑秋红  康相涛 《畜牧与兽医》2005,37(6):7-9

根据枯草杆菌(Bacillus subtilis)基因文库中的淀粉酶基因的碱基序列,设计引物。以枯草杆菌菌体DNA为模板,利用PCR扩增出分子量大约为2.3 kb的淀粉酶基因片段。借助于核酸内切酶和连接酶把该基因植入到pHMSXD1质粒中,构建pHMSXD2质粒载体。通过高压电击处理把载体植入到大肠杆菌(JM10)中并成功表达。该株大肠杆菌在酶基因表达后,其淀粉酶活力达到1.037 6 U/mL(LB培养液)和1.361 0 U/mL(矿物元素培养液),分别比原始的枯草杆菌的淀粉酶活力提高了46倍和286倍。  相似文献   

Modulation of broilers’ caecal microflora and metabolites in response to a potential probiotic Bacillus amyloliquefaciens          下载免费PDF全文

G. T. Cao  X. A. Zhan  L. L. Zhang  X. F. Zeng  A. G. Chen  C. M. Yang 《Journal of animal physiology and animal nutrition》2018,102(2):e909-e917

Studies have found that a dietary supplement of Bacillus amyloliquefaciens improved the growth performance, increased the nutrient digestibility of hosts and modulated the intestinal microflora. A total of 360 1‐day‐old Ross broilers were randomly divided into three treatments: a control group with a basal diet, an antibiotic group with a basal diet and added colistin sulphate, and a probiotics group with a basal diet and added Bacillus amyloliquefaciens. The HiSeq high‐throughput sequencing analysis of 16S rRNA was used to investigate the differences in birds’ caecal microflora, and metabolomics was used to analyse changes in caecal metabolites. Results showed that the supplementation of Bacillus amyloliquefaciens significantly improved the BW and ADG compared with the control birds. Results of sequencing indicated that (i) 645, 670, 596 unique operational taxonomic units (OTUs) were found in birds supplemented with Bacillus amyloliquefaciens on day 7, 21 and 42, separately, (ii) due to the diversity and relative abundance of the birds’ caecal microflora, the OTUs of the caecal microflora clustered according to age and treatment, except on day 42, (iii) among the six predominate families (Ruminococcaceae, Lachnospiraceae, Enterobacteriaceae, Erysipelotrichaceae, Lactobacillaceae and Rikenellaceae), the supplementation of Bacillus amyloliquefaciens significantly increased Enterobacteriaceae on day 42, (iv) Bacillus amyloliquefaciens increased the relative abundance of Faecalibacterium and Ruminococcus on day 21, increased the Faecalibacterium and Blautia and decreased the Ruminococcus on day 42. The metabolomics of caecal metabolites showed that the dietary Bacillus amyloliquefaciens changed the caecal metabolites involved of amino acid metabolism and glyceride metabolism, and the antibiotics changed the caecal metabolites that were related to carbohydrates and amino acid metabolism on day 21.  相似文献