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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒双重液相基因芯片检测方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
为了实现快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)并同步鉴别高致病性PRRSV毒株(HPPRRSV),根据PRRSV囊膜蛋白GP2基因保守序列和HP-PRRSV特有的Nsp2基因区保守序列设计特异扩增引物和杂交探针,通过双重一步法RT-PCR不对称扩增和双重微球杂交反应,建立了双重液相基因芯片方法。对12株PRRSV以及其他12种猪病原体的检测显示,该法能特异性检测12株PRRSV毒株并准确鉴别其中7株HP-PRRSV,与其他病原体无交叉反应;对PRRSV、HP-PRRSV病毒液的检测低限均小于每个反应0.5TCID_(50);其组内、组间检测变异系数均10%;检测55份疑似临床样品并与商品化荧光RTPCR试剂盒比较检测结果,符合率达98.2%(54/55)。研究结果为适应临床快速检测PRRSV提供了一种新的分子生物学检测方法。 相似文献
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苏云金杆菌以色列变种(Bacillus thu-ringiensis Var.isralensis H_(14))对蚊幼虫有高毒性。为实现毒力测定的标准化,国内外都进行了许多研究。在生物测定中,大致可分为两类:一是L.J.Goldberg等以半致死剂量(LD_(50))求出的每只幼虫所需活细胞数(细胞/幼虫)为依据的生物测定程序;另一类是我们和H.de Barjac采用过的以标准品为依据,求出半致死浓度折算效价的生物测定程序。然而,活细胞数与毒力 相似文献
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苏云金芽胞杆菌 (Bt)是一种革兰氏阳性菌 ,可产生具有杀虫活性的伴胞晶体蛋白 ,作为一种全球性生物农药广泛应用于农林害虫的防治。电脉冲法是细菌质粒转化中比较常用的一种方法 ,特别是在革兰氏阳性菌以及很多用常规方法不能转化的细胞 ,用电脉冲法可以成功转化[1] 。所以 ,电脉冲法目前已作为一种高效、简便和省时的方法 ,被用于Bt的遗传改良中。笔者所在实验室在构建Bt工程菌的过程中 ,发现按照常规的电转化方法 (用对数生长中期细胞制备感受态 ,OD660约为 2 0 0~ 2 2 0 ,电压为 6.2 5~9kV cm ,电阻为 2 0 0Ω ,电容为 2 5… 相似文献
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<正>1.明确责任,创建高产示范片我县按照上级农业主管部门工作的部署,成立了由分管副县长任组长的粮食高产创建活动领导小组,明确各相关部门工作职责,推动全县高产创建工作开展。县政府印发了《关于认真开展粮食高产创建活动的通知》和《湘阴县667公顷高档优质稻和667公顷双季稻高产示范片实施方案》。县农业局在白泥湖垸区创建了2000公顷双季杂交稻高产示范区和西部垸区2万公顷优质稻高产示范区,成立了专家技术组和 相似文献
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