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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒双重液相基因芯片检测方法的建立 总被引：1，自引：0，他引：1
为了实现快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)并同步鉴别高致病性PRRSV毒株(HPPRRSV),根据PRRSV囊膜蛋白GP2基因保守序列和HP-PRRSV特有的Nsp2基因区保守序列设计特异扩增引物和杂交探针,通过双重一步法RT-PCR不对称扩增和双重微球杂交反应,建立了双重液相基因芯片方法。对12株PRRSV以及其他12种猪病原体的检测显示,该法能特异性检测12株PRRSV毒株并准确鉴别其中7株HP-PRRSV,与其他病原体无交叉反应;对PRRSV、HP-PRRSV病毒液的检测低限均小于每个反应0.5TCID_(50);其组内、组间检测变异系数均10%;检测55份疑似临床样品并与商品化荧光RTPCR试剂盒比较检测结果,符合率达98.2%(54/55)。研究结果为适应临床快速检测PRRSV提供了一种新的分子生物学检测方法。 相似文献
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在设施条件下,通过在含有不同浓度(43.62、1638.78和10936.38μg/kg)土霉素的土壤中添加不同比例(5%、10%)有机肥,研究有机肥对土霉素消减的影响及其影响因素,并运用准一级动力学模型对土霉素消减动态的拟合。结果表明,在低污染处理组和高污染处理组28 d后土霉素消减进入平稳期,低污染处理组添加5%和10%有机肥后,消减率提高了17.71%和16.03%,半衰期缩短了9.02和9.50 d;高污染处理组添加5%和10%有机肥后,消减率提高了19.83%和17.93%,半衰期缩短了12.28和13.38 d。主成分分析对土壤理化性质与土霉素消减动态的分析结果表明土壤有机质、总氮及p H值与添加有机肥的比例呈较高的正相关性,土霉素的消减率与有机肥添加比例成一定的正相关性。与对照土壤比较,添加有机肥可促进土壤中土霉素的消减,并随土霉素初始浓度的增大作用更为明显,但有机肥添加比例对土霉素消减的促进作用没有显著差异。 相似文献
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Pseudorabies virus (PRV) and porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) were used as representatives of DNA and RNA viruses, respectively. Healthy semen was spiked with viruses, and then nucleic acids were extracted using following methods, semen pretreatment combined with silicon colunm kit extraction (referred to column kit method),optimized TRIzol reagent procedure and a published method. The efficiency of each method was evaluated by Real-time fluorescent RT-PCR or PCR. The results indicated that the column kit method was more sensitive and useful in viral nucleic acids extraction procedure. The limit in natural semen and commercialized semen were 1.26 and 0.13 TCID50/mL by Real-time fluorescent RT-PCR or PCR detection, respectively. The column kit method including sample pretreatment took less than 1 h, which was 0.5 h shorter than TRIzol procedure. This research established and optimized the method of extracting viral nucleic acid from boar semen. 相似文献
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猪呼吸道疾病是一种由病毒、细菌、环境应激等多因素相互作用,造成猪群免疫力下降、呼吸困难、肺脏等多器官病变的传染性疾病,秋冬季节多发,引起该疾病的主-病原有猪蓝耳病病毒(PRRSV)、圆环病毒(PCV-2)、猪伪狂犬病病毒(PRV),支原体(MHP)、副猪嗜血杆菌(MHP)等。2014年9月至2016年8月,对我国猪场主-呼吸道病原进行流行性病学调查,结果显示,每年10月至次年2月是猪群呼吸道疾病高发时期,PRRSV、PCV-2的检出率超过70%,主要的病毒性病原在现有免疫压力下表现出明显的基因变异;本研究提出了我国猪场科学实施防控呼吸道疾病的检测手段及防控方案,为我国猪呼吸道疾病的防治提供了依据。 相似文献
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数字PCR（digital PCR,dPCR）技术是基于“有限稀释”和“泊松分布”原理迅速发展的第三代PCR技术,无需标准品即可实现样品的绝对定量,灵敏度高、操作简单,在疫病检测、转基因鉴定、食品检测等方面得到快速发展,而在动物疫苗研究领域也被越来越多用于质控、筛查和定量。本文从动物疫苗研究的角度,阐述了数字PCR在动物疫苗基因变异检测、基因定量、效价测定、疫苗效果评价等方面的发展潜力。该技术将有助于解决动物疫苗研究过程中的病毒生长曲线和疫苗效价测定以及基因变异分析等重点难点问题,未来将成为疫苗研发的有力工具。 相似文献
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随着mRNA技术在疫情防控、肿瘤治疗等领域的迅速发展,其在动物疫病疫苗研究方面也受到了广泛关注。mRNA疫苗具有研发周期短、安全性高以及高效激活免疫系统等特点,已成为当前疫苗研究领域的热点。本文概述了mRNA疫苗的类型及特点,总结了近年来mRNA技术在流感、狂犬病、蚊媒病毒病等人兽共患病,口蹄疫、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬病、猪流行腹泻、牛结节性皮肤病、非洲猪瘟等动物病毒病,以及结核病、弓形虫病等细菌病和寄生虫病疫苗研发方面的进展,同时提出了该技术面临的挑战,以期为我国动物疫病疫苗技术的发展提供帮助。 相似文献
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