猪繁殖与呼吸综合征病毒河南分离株ORF5基因的克隆与变异分析   总被引：4，自引：4，他引：4  

周海范  夏平安  崔保安  柴春霞  张红英  杨霞 《中国兽医学报》2007,27(6):810-813,817

从河南郑州、新乡、周口不同地区猪场的急性病猪中分离到3株猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproduc-tive and respiratory syndrome virus,PRRSV),分别命名为PRRSV Hn-1/06、PRRSV Hn-2/06和PRRSV Hn-3/06,细胞中和试验证实其血清型与美洲型一致。利用RT-PCR方法克隆了它们的ORF5基因,并对其基因序列和推导的氨基酸序列与7个不同来源的PRRSV毒株进行了同源性和亲缘关系比较分析,结果表明,3个分离株之间的ORF5基因及其推导的氨基酸均同源性均大于95.5%;与VR-2332标准北美洲株和疫苗株RespPRRS MLV间的同源性均低于与中国CH-1a毒株,而与流行的欧洲株间的同源性均低于54.5%。同时对推导氨基酸序列与6个北美洲型PRRSV株进行变异分析比较,证实其推导氨基酸序列发生了变异,特别是中和位点处第39位明显不同,表明河南省流行的PRRSV为北美洲型的变异株。  相似文献   

板蓝根、黄芪对猪繁殖与呼吸综合征病毒的体外抑制作用   总被引：5，自引：0，他引：5  

王学斌  魏战勇  崔保安  郭世栋  徐端红 《畜牧与兽医》2006,38(4):11-14

为了解中草药黄芪、板蓝根对病毒增殖的抑制作用,对黄芪、板蓝根及二者联合使用在Marc-145的单层细胞上对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)增殖的抑制作用进行了研究。结果表明,板蓝根能够显著抑制PRRSV体外增殖,对PRRSV的最小直接杀灭浓度为0.195 mg/mL,最小阻断浓度为0.097 mg/mL;黄芪对PRRSV增殖的抑制作用较弱。板蓝根、黄芪联合使用时对PRRSV的抑制作用显著增强,板蓝根对PRRSV的最小直接杀灭浓度降为0.097 mg/mL,最小阻断浓度降为0.049 mg/mL。  相似文献   

多重PCR检测猪细小病毒和猪伪狂犬病病毒的研究   总被引：7，自引：0，他引：7  

李小康  赵丽  崔保安  陈红英  魏战勇 《中国预防兽医学报》2007,29(3):227-230

根据GenBank上已发表的猪细小病毒（Porcine parvovirus，PPV）的VP2基因序列和猪伪狂犬病病毒（Porcine pseudorabies virus，PRV）的gH基因序列，设计合成了两对特异引物，分别建立了PPV和PRV的单项PCR诊断方法，通过对扩增条件的筛选，最终成功地建立了PPV和PRV的复合PCR诊断方法，即利用一次PCR反应，可同时扩增PPV的751bp和PRV355bp的特异性片段，而扩增猪圆环病毒Ⅱ型（PCV．2）及相应的培养细胞（PK-15）核酸结果均为阴性，对PPV和PRV的最低检出量分别为100Pg和10Pg的DNA。该方法适合对PPV和PRV的联合检测和鉴别诊断。  相似文献   

RAPD技术在产气荚膜杆菌基因分型中的应用研究     

杨明凡  田永军  崔保安  张自富  王学斌 《河南农业大学学报》2000,34(1):85-87

采用随机扩增多态性ＤＮＡ技术对产气荚膜杆菌进行ＰＣＲ扩增。结果产气荚膜杆菌Ａ，Ｂ，Ｃ，Ｄ４个型均可扩增出约４３０ｂｐ的条带，Ｂ，Ｃ型还扩增出约２１０ｂｐ条带，Ｂ，Ｄ型还扩增出约１２１０ｂｐ条带，Ａ型还扩增出约２４０ｂｐ和６９０ｂｐ条带，各型之间的条带差别明显，从而为产气荚膜杆菌的基因分型、ＰＣＲ快速诊断提供可靠的依据。  相似文献   

麋鹿魏氏梭菌病和巴氏杆菌病混合感染   总被引：3，自引：0，他引：3  

杨明凡  崔保安  魏战勇  王学斌  张素梅  徐端红 《中国兽医杂志》2004,40(3):51-52

20 0 3年 1月 ,河南省野生动物救护中心饲养的30只麋鹿 ,先后有 3只青年麋鹿突然发病死亡 ,临床主要表现为严重败血症、腹泻而衰竭死亡 ,病程短 ,病死率高。1　临床症状　 3只麋鹿均突然发病 ,精神不振 ,腹痛 ,呼吸困难 ,全身肌肉震颤 ,口吐白沫 ,流涎 ,随后倒地 ,四肢划动 ,抽搐死亡。死亡后腹部迅速胀大 ,口腔流出带红色泡沫状水样物。2　病理剖检　剖检 3只麋鹿的症状基本相似 ,主要表现为 :可视黏膜出血 ,皮下组织浆液浸润。心外膜有无数大小不等的出血点。脾脏稍肿 ,边缘钝圆 ,脾髓暗红色 ,稍软化。肝肿大 ,有出血斑。肺有暗红色硬块 ,…  相似文献   

微量炭凝集试验在猪瘟免疫监测中的应用     

尹风阁  卢中华  王自振  崔保安  郭永庆  晁瑞萍  林永娟  樊治业  方文松  邓文彬 《河南农业大学学报》1985,(2)

为了简便、快速而又有效地进行猪瘟免疫监测,作者通过对不同直径的炭粒,不同方法培养的病毒及不同的病毒致敏炭泥的比例反复比较,设计了微量炭凝集试验.通过对不同类型的阴性、阳性及鉴别血清进行检测,证明该炭抗原活性良好,试验方法特异性强、敏感性高.经兔体血清中和试验对微量炭凝集试验检测结果验证,初拟凝集价1:16为免疫临界线.经试验及实际应用,证实该方法快速、准确,结果明显,便于基层推广,为猪瘟免疫监测中较实用的技术.  相似文献   

地方品种固始鸭γ-干扰素基因的克隆与分子进化分析     

陈红英  崔保安  李新生  胡功政  赵丽  王东方 《华北农学报》2007,22(3):1-4

根据GenBank发表的鸭γ-干扰素cDNA基因序列,自行设计、合成1对引物,应用RT-PCR技术,无需用非特异性免疫原如ConA、PHA等刺激分离的脾淋巴细胞,直接提取总RNA,扩增固始鸭γ-干扰素基因(DuIFN-γ),并进行克隆和测序。测序结果表明,获得了DuIFN-γ全序列,其大小为515 bp,包含一个完整阅读框,编码164个氨基酸残基,推导的氨基酸有3个潜在的N-糖基化位点,有5个与二硫键形成有关的半胱氨酸。序列比较分析发现,克隆的固始鸭IFN-γ基因序列与GenBank中4条鸭IFN-γ基因序列中的3条序列(AF087134,AF100929,AJ012254)完全一致,而与另一条北京鸭核苷酸同源性为99.6%,有2个碱基发生非同义变异,氨基酸同源性为98.8%。固始鸭与人和其他种动物的IFN-γ基因序列分析和系统进化分析表明,IFN-γ基因存在种属的差异性,亲缘关系越近,同源性越高。DuIFN-γ基因的成功克隆为进一步研究固始鸭IFN-γ基因表达、生物学活性和应用奠定基础。  相似文献   

株血清学和免疫学特性的研究     

高文明  崔保安  李新生  魏战勇  徐端红 《中国畜牧兽医》2007,34(9):81-83 

 在鸡胚肾细胞上对HN₉₉株病毒进行了克隆纯化，经检测无外源病原污染。应用血清交叉中和试验确定了IBV HN₉₉株的血清型，并用免疫保护试验进行了验证，结果证明HN₉₉株与T株属同一血清型，与TJ、SD、湖北等地方分离株有一定的相关性。不同免疫剂量的效力试验结果表明用0.2 ml剂量的HN₉₉灭活苗接种试验鸡，能够对HN₉₉攻毒提供100%的保护，证明HN₉₉株具有良好的免疫原性。  相似文献   

山羊链球菌病并发巴氏杆菌病的诊断与防治     

陈丽颍  张红英  崔保安  李晓峰  梅红 《河南畜牧兽医(综合版)》1998,(5)

1997年初夏，河南省鲁山县某养殖公司从山东引进小尾寒羊3000只，分养于养殖场和农户。自6月底起，该批羊突然发病，其临床表现主要为出血性败血症，同时多伴有抽搐等神经症状，并出现死亡。综合临床症状、病理剖捡变化和细菌学分离鉴定，确诊为羊链球菌与巴氏杆菌混合感染，利用分离菌株制备灭活菌苗紧急预防接种，对发病羊采取药物治疗，使疫情得到了及时控制。一、临床症状主要表现为精神沉郁，体温41℃以上；眼结膜初期潮红有出血点，后期则极度苍白；鼻有出血和浆液性鼻漏，呼吸困难，伴有呻吟；颌下淋巴结肿大，部分羊出现头肿，并伴…  相似文献   

猪圆环病毒2型ORF2基因截断表达及ELISA抗体检测方法的初步建立     

郭官鹏  刘畅  陈龙彪  马世杰  高晓云  陈红英  崔保安 《兽医大学学报》2014,(7):1059-1064

为建立以重组PCV2Cap蛋白为包被抗原的间接ELISA检测方法,构建了猪圆环病毒2型（PCV2）ORF2基因原核表达质粒pET28a-ORF2。SDS-PAGE显示,在0.1mmol/L IPTG和37℃条件下诱导4h,重组Cap蛋白高效表达。Western blotting证实该蛋白能够被PCV2阳性血清特异性识别。以纯化的蛋白为抗原建立了检测PCV2抗体的间接ELISA方法。结果表明,抗原最适包被质量浓度为2mg/L;血清最佳稀释度为1∶100;酶标二抗最适浓度为1∶2 000,该方法的敏感性为86.96%,特异性为100%。用该方法对河南省152份猪血清样品进行检测,与间接免疫荧光（IFA）的符合率为85.53%（130/152）,与商品化的韩国金诺PCV2ELISA试剂盒的符合率为88.16%（134/152）。本试验成功建立了PCV2血清抗体间接ELISA方法,具有较高的敏感性和特异性,可用于大规模的血清学检测。  相似文献