非肌肉肌球蛋白Ⅱ型重链A单克隆抗体的制备及其靶位点区域的鉴定     

吴海珍  刘宁宁  张璐  吕军华  肖一红  周恩民 《中国预防兽医学报》2012,(10):815-818

为制备非肌肉肌球蛋白Ⅱ型重链A(NMHC-II A)的单克隆抗体(MAb),本研究将编码NMHC-Ⅱ A羧基端1 651～1 960氨基酸的表达重组质粒转化到大肠杆菌感受态细胞Rosseta中诱导表达,重组蛋白纯化后免疫BALB/c小鼠,分离小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞用PEG 4000介导融合。ELISA方法检测筛选阳性杂交瘤细胞,制备腹水并纯化MAb,以间接免疫荧光和免疫沉淀方法鉴定MAb的特异性,western blot检测MAb靶位点区域。结果表明,通过筛选得到1株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞系,其抗体亚型为IgG1,细胞培养上清和腹水效价分别为1∶2 560和1∶1.0×106;该MAb能够特异性结合相应抗原,并结合Marc-145细胞;western blot结果显示该抗体与NMHC-Ⅱ A的1 812～1 894氨基酸位点结合。该抗体的制备为研究NMHC-Ⅱ A在猪繁殖与呼吸综合征病毒感染细胞中的作用奠定了基础。  相似文献   

柔嫩艾美耳球虫EtMIC2的酵母表面展示     

孙慧  刘卿  张杰  陈佩佩  王龙江  王甜甜  王方昆  李宏梅  肖一红  赵孝民 《中国兽医学报》2014,(2):231-235

利用酿酒酵母表面展示系统展示柔嫩艾美耳球虫微线蛋白基因EtMIC2,为下一步研制活载体疫苗奠定基础。参照GenBank中柔嫩艾美耳球虫EtMIC2基因序列设计引物,以柔嫩艾美耳球虫的RNA为模板,利用RT-PCR扩增得到预期长度的产物,双酶切连接到酿酒酵母表面展示的载体pCTCON2,转化大肠杆菌TOP10,提取阳性质粒转化酿酒酵母菌株EBY100,诱导表达后,用抗EtMIC2蛋白质特异性抗体,做间接免疫荧光(IFA)检测EtMIC2蛋白的表达。结果显示,EtMIC2成功展示到酵母细胞表面,测得最佳诱导时间为48h。  相似文献   

一例典型猪瘟病例的综合诊断     

王玉超  李保全  胡东方  古金元  陈同煜  彭涛  刘思当  肖一红 《猪业科学》2017,34(7):78-79

2016年12月山东泰安某养殖户的70头育肥猪,部分猪出现了高烧不退、弓背喜卧、眼角分泌物增多、粪便干结、全身皮肤点状出血等疑似猪瘟症状;病理剖检可见全身皮肤、浆膜、肾、胃肠黏膜、肺等器官组织广泛性渗出性出血;采集病猪病料,提取RNA,用猪瘟病毒基因特异性引物进行RT-PCR,琼脂糖凝胶电泳结果显示,病料呈猪瘟病毒核酸阳性,确诊该病例为猪瘟病毒的急性感染。  相似文献   

芦花鸡J亚群白血病的综合诊断   总被引：1，自引：0，他引：1  

李宏民  刘蒙达  孙洪磊  肖一红  刘思当 《中国家禽》2010,32(20)

<正>1989年,Payne[1]及其同事首次从肉种鸡群中分离出禽J亚群白血病病毒(avian leukosis virus subtypeJ,ALV-J)。最初ALV-J主要引起成年肉鸡以骨髓细胞瘤为主的白血病,感染鸡群发生肿  相似文献   

当前我国养猪状况及存在问题分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

王淑静  郝建民  肖一红  王桂芝 《山东畜牧兽医》2010,31(4):62-63

<正>我国猪病防制大致经过4个时期:(1)无医无药期。养猪刚起步时,既无懂猪病的兽医,也无适合猪病的兽药;(2)药物治疗期。此期广大养猪户大量用药,相信药物能治疗一切猪病;(3)免疫、治疗期。此期人们相信各色各样的疫苗免疫,配合药物防治就能控制猪病;  相似文献   

蛋鸡网状内皮组织增生病病毒分离鉴定     

孙洪磊  秦梅  肖一红  杨凤  倪伟  聂丽  刘思当 《江西农业学报》2010,22(6):137-140

山东某鸡场饲养的10000只父母代海兰蛋种鸡于育成前期出现进行性消瘦、生长发育不良等症状;剖检以腺胃肿胀、淋巴器官萎缩为特征,至70日龄发病率达90%;经ELISA方法检测抗体及间接免疫荧光原位病原检测证明该病与网状内皮组织增殖病病毒(REV)感染有关。取7只病鸡肝脏研磨处理后接种鸡胚成纤维细胞(CEF),用REV单抗11B118进行间接免疫荧光检测,结果均呈阳性;根据REV-HA株前病毒基因组DNA env囊膜糖蛋白基因序列设计引物,提取阳性CEF基因组DNA作为模版,PCR扩增后得到438 bp的目的片段;PCR产物测序结果比对显示,该毒株与其他中国野毒株的同源性高于与REV-HA株的同源性。综合诊断判定该病可能与鸡群早期感染致病力较强的REV有关。  相似文献   

动物干扰素研究概况     

丛芳源  曹胜亮  丁国飞  刘思当  肖一红 《动物医学进展》2020,(1):104-107

随着我国养殖业的迅猛发展,各种疾病的发生和危害日益加重,特别是病毒性疫病,已成为传染病的主体。对于病毒性疾病的治疗仍然缺乏有效的药物,且大多数尚无效果可靠的疫苗,再加上新发和再发病不断出现,使得病毒病危害尤为突出,急待寻找提高机体免疫、抵抗病毒感染的替代药物。干扰素(IFN)作为一种细胞因子具有广谱抗病毒、抗肿瘤和免疫调节活性,还可以促进机体免疫反应,提高机体抗病毒感染能力,使病毒在机体存活和复制的几率降到最低。目前发现Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型3种类型的IFN,利用3种类型的IFN的抗病毒和调节免疫的功能,研究抑制病毒复制的新型生物制剂,成为人们关注和研究的热点,为病毒性疫病,特别是新发或突发的重大疫病防控提供参考。  相似文献   

海兰褐商品蛋雏鸡毛源性上皮细胞癌病理学诊断     

孙洪磊  秦梅  肖一红  王健  杨凤  倪伟  刘思当 《畜牧兽医学报》2010,41(10)

针对目前山东省出现的某些商品蛋雏鸡皮肤增生、结痂为特征的致死性皮肤病,进行了流行病学调查、剖检、病理组织学及免疫组织化学检测.结果显示:该病仪在某场家、某批次的海兰褐商品蛋雏鸡中发现,多在5日龄左右发现病变,病程1月左右,病鸡最终衰竭死亡,发病率1%～10%不等;病初可见皮肤多发性黄色结节,随后结节融合,导致皮肤增厚、结痂,内脏器官无肉眼可见肿瘤病变;病理组织学观察,真皮层存在不同分化状态的毛囊样瘤细胞集团,瘤细胞有明显的异型性,病灶呈浸润性生长,侵犯神经及真皮下肌肉组织,伴有肌样纤维结缔组织大量增生;病变部皮肤表皮细胞显著增生,增生的基底细胞也有一定的异型性;免疫组化检测,肿瘤细胞呈广谱细胞角蛋白(CK)阳性;波形蛋白(Vim)、高分子量细胞角蛋白(CKHMW)、低分子量细胞角蛋白(CKLMW)、P53、Ki-67阴性;真皮层增生的肌样纤维结缔组织主要为平滑肌.该皮肤肿瘤初步诊断为毛源性上皮细胞恶性肿瘤.  相似文献   

几种鸡呼吸道病的鉴别诊治     

丁宝君  肖一红  刘思当 《水禽世界》2003,(1):26-27

慢性呼吸道病、传染性鼻炎、传染性喉气管炎、传染性支气管炎及曲霉菌病都是以呼吸困难、气喘为主要临床症状的鸡病，本文就这几种病的鉴别诊断及治疗简述如下。１慢性呼吸道病１．１病原鸡败血霉形体。１．２流行病学鸡和火鸡对本病有易感性，４～８周龄鸡和火鸡最易感，纯种鸡比杂种鸡易感。病鸡和隐性感染鸡是本病的传染源，本病可经水平和垂直两种方式传播。病原体可通过病鸡咳嗽、喷嚏的飞沫和尘埃经呼吸道传播，被霉形体污染的饮水、饲料、用具也能使本病由一个鸡群传至另一个鸡群；垂直传播可使本病在鸡群中连续不断的发生。１．３症…  相似文献   

雏鸡葡萄球菌病的诊治     

肖一红  丁宝君  刘思当 《畜牧与兽医》2003,35(4):45-45

1　发病及症状2 0 0 2年 9月 3日某养殖户送来十几只 3日龄的小鸡和十几个死胚 ,怀疑是葡萄球菌感染或VE 缺乏症。主要情况是该养殖场种蛋的孵化率低 ,并且孵化后期死亡率高 ,死亡率大约为2 0 %。小鸡全身逆毛 ,呆滞 ,缩颈 ,站立不稳。剖检见腹部皮下有胶冻样的渗出物 ,其他器官没有明显的病变。2　实验室诊断2 1　切片观察取小鸡的心脏、胸肌、脑放入 10 %的中性甲醛固定液中固定 12h ,按常规石蜡切片的做法切片 ,用HE染色 ,进行镜下观察。心肌纤维正常 ,胸肌纤维没有坏死现象 ,脑无明显的病理变化。2 2　细菌观察无菌采取小鸡肝脏及皮…  相似文献