茎环RT-PCR检测马立克氏病毒感染鸡相关miRNA方法的建立     

陈燕梅  连玲  曲鲁江  刘长军  杨宁 《中国家禽》2011,33(9)

本研究旨在建立一种检测马立克氏病毒人工感染鸡相关miRNA表达变化的RT-PCR方法,探讨该方法在miRNA定量检测方面的应用价值.试验选择6个具有典型肿瘤结节的马立克氏病毒感染脾脏样品作为研究材料,同时采用6个正常鸡的脾脏样品作为对照材料.利用特异的茎环反转录引物以及miRNA上下游引物对gga-miR-181a进行基于SYBRGreen Ⅰ的荧光定量PCR检测,并以U6为内参基因、2<'-ΔΔα>法检测gga-miR-181a的相对表达量.结果,在马立克氏病毒人工感染鸡的脾脏和正常鸡的脾脏中成功检测出gga-miR-181a-1的表达.证明茎环RT-PCR法能用于检测马立克氏病毒人工感染鸡的相关miRNA,并具有准确、快速、节约成本的优点.  相似文献   

南美白对虾混养中华鳖试验   总被引：1，自引：0，他引：1  

周志强  刘长军  郑凯宏  张文剑 《河北渔业》2007,(3):33-34

随着南美白对虾养殖发展规模急剧扩大,我县淡水南美白对虾面积达到1333.3hm2,产值达到1.3亿元,南美白对虾产业已经成为我县七大龙型产业又一大产业。但是我县的南美白对虾养殖池塘大多数是低洼、盐碱地改造成的池塘,大多数池塘的塘龄在七、八年以上,在高温期间出现因放养密度过高、池塘底质老化等原因引起病害的发生,经济效益呈下滑趋势,因此,为了减少养殖风险,积极进行生态养殖模式探索,以求达到高效生态养殖的目的。2006年6月,我们在高塘岛乡开展了南美白对虾混养中华鳖试验,取得了较好的经济效益,现将试验情况总结如下。1材料与方法1.1池塘条件及准备4只池塘总面积1.67hm2,单塘面积0.33～0.47hm2,水深0.8～1m,每只池塘配套1.5kW水车式增氧机2台;池塘周围用高40cm左右的黑塑料膜拦围作为防逃设施;水源无工业污染,水质富营养化程度较高,高温期间易出现水源不足;苗种放养前,池塘经清淤、曝晒、生石灰消毒清塘。1.2苗种放养2006年6月2日投放规格为0.8cm左右虾苗120万尾,由宁海购进;6月28日投放规格为300g/只的本地幼鳖208只;7月5日投放规格为50g/只的幼鳖162只。投放幼鳖行动活泼...  相似文献   

南美白对虾春季全过程大棚养殖试验     

张文剑  刘长军  张万良 《渔业现代化》2005,(3):29-30

针对目前各地南美白对虾养殖效益普遍下滑的现状，探讨了江浙地区南美白对虾春季全过程大棚养殖的可行性及相关技术。结果养殖周期缩短到62～71天，亩利润5020元，效益显著提高。同时对大棚的结构设计、苗种放养时间、水质控制技术等提出了相应的建议。  相似文献   

海水池塘底充氧增氧养殖三疣梭子蟹高产试验   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘长军  郑凯宏  周志强  张达云 《中国水产》2007,(6)

I三疣梭子蟹是我国沿海重要的养殖经济蟹类。三疣梭子蟹随着其人工育苗技术的成熟,已经进入全人工养殖阶段。2006年,浙江省象山县水产养殖技术推广站在梭子蟹苗种中间培育、梭子蟹多级分茬高产技术等课题成功的基础上,提出池塘底充氧增氧养殖三疣梭子蟹高产试验,旨在提高池塘底部溶解氧含量,为梭子蟹生长蜕壳提供一  相似文献   

鸡马立克氏病病毒编码的miRNA体内表达特征分析     

郑惠文  李志杰  张艳萍  包珂岩  郑永胜  刘长军  王笑梅 《中国预防兽医学报》2014,36(10)

最新研究发现,鸡马立克氏病病毒(MDV)基因组编码的miRNAs在肿瘤发生发展中发挥了重要的调控作用.为阐明强弱毒株编码的miRNA差异表达与病毒复制的关系,本研究采用SYBR Green荧光定量PCR方法检测了MDV CVI988疫苗株和MDV GA强毒株编码的M4-5P、M8-3P和M12-3P 3种miRNAs在肝脏和胸腺中的动态表达特征.结果表明,强弱毒株编码的这3种miRNAs在病毒感染过程中具有明显的差异性,其中GA株编码的miRNAs表达量高于CVI988株,这是由于强弱毒株在体内的复制滴度差异造成的,表明在感染前期miRNAs的表达量与病毒载量有关.该研究为进一步研究miRNAs的功能提供了实验依据.  相似文献   

焊制管道三通塑性极限载荷弯矩的计算方法   总被引：2，自引：0，他引：2  

轩福贞  刘长军  李培宁 《油气储运》2001,20(6):10-15

基于极限分析的观点，推导出面外弯矩作用下焊制三通的极限载荷估算公式。理论分析和试验验证结果表明，得到的公式能够较为准确地估算工业上常用的等强度焊制管道三通塑性极限弯矩，有较大的工程应用推广价值。  相似文献   

东北地区秸秆打捆直燃供暖案例及效益分析     

裴占江  刘杰  史风梅  王粟  高亚冰  吴晓春  李冰峰  刘长军 《黑龙江农业科学》2019,(12)

东北地区每年产生大量秸秆,据测算,辽宁、吉林、黑龙江和内蒙古四省区的可收集秸秆量2亿t·a~(-1)、占全国的24.4%,其中黑龙江省的可收集秸秆量1.1亿t·a~(-1)、占四省区的52.1%。虽然国家和地方出台了一系列禁止露天焚烧秸秆的规定,采取了严格的禁烧措施,同时也投入了大量资金支持秸秆综合利用工作,当面临着大量的秸秆离田处理压力和春季紧张的农事安排,面对农民的诉求,个别省份仍然会留有露天焚烧秸秆的窗口期。针对上述情况,本文对黑龙江、辽宁等地的秸秆直燃锅炉实际运行效果进行了现场调研。首先对东北地区秸秆直燃锅炉供暖案例进行了实地调研,其次对东北地区秸秆直燃锅炉的经济效益、社会效益和环境效益进行了分析,最后针对秸秆直燃锅炉的发展提出了具体对策和措施。  相似文献   

有机负荷对UASB产氢反应器中颗粒污泥的影响研究     

王梦一  刘爽  李文哲  鞠文聪  殷丽丽  孙铭超  刘长军 《农机化研究》2020,42(11)

为增强产氢颗粒污泥性能,通过UASB反应器进行中温连续产氢试验,探索有机负荷对产氢颗粒污泥性能的影响。结果表明:随着有机负荷的逐渐增加,产氢速率、颗粒污泥粒径、胞外聚合物(EPS)含量逐渐增加,颗粒污泥沉降性能和强度明显提高。在有机负荷为80gCOD/(L.d)时,产氢速率达到最大值8.6L/(L.d);当有机负荷进一步增加至90gCOD/(L.d)时,紧密结合的胞外聚合物(TB-EPS)的含量减少,松散附着的胞外聚合物(LB-EPS)的含量增加,导致颗粒污泥沉降性能和强度变差,产氢速率降低。因此,适度增加有机负荷可增强产氢颗粒污泥的强度及沉降性能,进而提高其产氢效率。  相似文献   

玉米秸秆生物炭与牛粪混合厌氧发酵工艺优化     

王粟  李家磊  史风梅  裴占江  刘长军  刘杰 《黑龙江农业科学》2020,(6):87-92

  相似文献   

gga-miR-140-3p抑制马立克病病毒转化细胞MSB1增殖、迁移和侵袭     

赵春芳  李新  韩博  曲鲁江  刘长军  Jiuzhou Song  连玲  杨宁 《畜牧兽医学报》2018,(5)

以马立克病病毒(MDV)感染SPF白来航鸡,收集脾和肝来源的淋巴瘤,利用实时荧光定量PCR(qRTPCR)进行检测,结果显示gga-miR-140-3p在感染MDV的肿瘤化脾和肝淋巴瘤中低表达。为揭示该miRNA在马立克病(MD)肿瘤转化过程中的作用,以该miRNA为研究对象,MDV转化细胞系MDCC-MSB1为试验材料,分别转染miRNA激动剂或阴性对照,检测细胞增殖和迁移,并检测与细胞侵袭密切相关的基因MMP2和MMP9mRNA表达情况。结果显示,与阴性对照组相比,转染gga-miR-140-3p激动剂后,细胞增殖在24、36和48h后发生显著(P0.05)抑制,在60和72h后发生极显著(P0.01)抑制。转染激动剂后,细胞迁移数也显著(P0.05)减少。转染激动剂后,MMP2在转染后24h转录显著下调(P0.05),转染后48和72h转录极显著(P0.01)下调,MMP9基因在转染后48h转录显著(P0.05)下调。gga-miR-140-3p作为在MDV感染组织中异常表达的miRNA,能够影响MD肿瘤淋巴细胞的特征——增殖、迁移和侵袭,提示该miRNA可能参与MD肿瘤转化过程。  相似文献