全文获取类型
| 收费全文 | 1239篇 |
| 免费 | 21篇 |
| 国内免费 | 43篇 |
专业分类
| 林业 | 82篇 |
| 农学 | 59篇 |
| 基础科学 | 43篇 |
| 41篇 | |
| 综合类 | 544篇 |
| 农作物 | 72篇 |
| 水产渔业 | 10篇 |
| 畜牧兽医 | 335篇 |
| 园艺 | 94篇 |
| 植物保护 | 23篇 |
出版年
| 2024年 | 14篇 |
| 2023年 | 58篇 |
| 2022年 | 43篇 |
| 2021年 | 29篇 |
| 2020年 | 46篇 |
| 2019年 | 58篇 |
| 2018年 | 51篇 |
| 2017年 | 25篇 |
| 2016年 | 53篇 |
| 2015年 | 49篇 |
| 2014年 | 97篇 |
| 2013年 | 80篇 |
| 2012年 | 86篇 |
| 2011年 | 97篇 |
| 2010年 | 94篇 |
| 2009年 | 64篇 |
| 2008年 | 56篇 |
| 2007年 | 57篇 |
| 2006年 | 54篇 |
| 2005年 | 33篇 |
| 2004年 | 30篇 |
| 2003年 | 23篇 |
| 2002年 | 25篇 |
| 2001年 | 15篇 |
| 2000年 | 15篇 |
| 1999年 | 13篇 |
| 1998年 | 3篇 |
| 1997年 | 10篇 |
| 1996年 | 6篇 |
| 1995年 | 3篇 |
| 1994年 | 1篇 |
| 1993年 | 2篇 |
| 1991年 | 2篇 |
| 1987年 | 2篇 |
| 1986年 | 3篇 |
| 1985年 | 1篇 |
| 1984年 | 3篇 |
| 1983年 | 2篇 |
排序方式： 共有1303条查询结果，搜索用时 15 毫秒
121.
122.
参考GenBank中兔巴氏杆菌16SrRNA和波氏杆菌的fim2的基因序列,应用Premier 5.0软件在二者高度保守区设计了2对引物,建立了适合巴氏杆菌和波氏杆菌快速检测的多重PCR检测方法。以该方法对巴氏杆菌和波氏杆菌参考菌株进行PCR扩增,分别能从各自的基因组中扩增出与试验设计相符的644bp和425bp的特异性DNA片段。将扩增所得的DNA片段进行克隆测序,测序结果表明分别为巴氏杆菌16SrRNA和波氏杆菌fim2基因序列。该方法对波氏杆菌的检测下限为4×102 CFU,对巴氏杆菌的检测下限为6×101 CFU。对兔源性沙门菌、葡萄球菌、大肠杆菌、魏氏梭菌扩增结果为阴性。表明所建立的RT-PCR检测技术具有特异、快速和敏感的特点,可用于鉴别诊断兔巴氏杆菌和波氏杆菌以及2者混合感染。 相似文献
123.
124.
为建立一种快速准确检测兔多杀性巴氏杆菌(P.multocida)的PCR方法,本研究以P.multocida的高度保守的16S rRNA为靶基因,参考已公布的P.multocida的16S rRNA基因设计1对特异性引物,优化PCR反应条件,建立了P.multocida PCR快速检测方法。该PCR方法的敏感性达到60 cfu/mL,采用该PCR方法扩增P.multocida标准株和分离株均能扩增出643 bp的目的片段,扩增兔大肠杆菌、支气管败血波氏杆菌结果为阴性,证明本实验所建立的P.multocida PCR检测方法快速、敏感、特异、可靠,可用于P.multocida的快速鉴定与诊断。同时用建立的PCR方法对临床疑似病兔的脏器分离菌进行扩增,可扩增出目的条带,与细菌的分离结果相一致。 相似文献
125.
狐狸源致病性维氏气单胞菌的分离鉴定及耐药性分析 总被引：6，自引：0，他引：6
本研究通过生物学特性、16S rRNA基因和4种等看家基因的序列测定与分析,对分离自北京动物园死亡狐狸病变组织的1株细菌进行鉴定,并对其进行小鼠致病力试验及药物敏感性试验。结果显示:该细菌为革兰氏阴性杆菌,培养特性、理化反应与维氏气单胞菌温和生物型基本相同;根据16S rRNA基因和dnaJ、rpoD、gyrB、cpn60等看家基因的系统进化及其同源性分析,确定所分离的细菌与维氏气单胞菌属于同一系统发育分支,各基因同源性最高分别为97.6%～99.9%。分离菌株对CD-1小鼠有较强的致病作用,其半数致死量为2.8×105cfu/只;对氧氟沙星、头孢他啶等14种抗菌药物敏感,对青霉素G、克林霉素等9种抗菌药物耐药。 相似文献
126.
为建立支气管败血波氏杆菌(Bb)外膜蛋白(OMPs)双向电泳(2-DE)图谱,本研究利用碳酸钠法提取OMPs,并分别对裂解液、pH值、上样量、聚焦条件、染色方法等进行优化。2-DE结果表明,用裂解液5 MUrea、2 M Thiourea、2%CHAPS、2%SB3～10溶解蛋白,pH4～7的13 cm线性胶条考染上样量为750μg、银染上样量为75μg,聚焦条件为500 V,2 h,1 000 V,1 h,8 000 V,2∶30 h,8 000 V,4 h时,能获得聚焦良好、分离清晰的Bb OMPs图谱。本研究首次建立了Bb OMPs的2-DE图谱,为其蛋白质组学研究奠定了基础。 相似文献
127.
2008年以来,在国家奶牛生产性能测定补贴项目的推动下,奶牛生产性能测定技术在宁夏奶业优势区域12个县(市、区)全面实施。DHI技术已越来越被广大奶农所重视、接受,利用DHI报告已为牛场解决了一些生产中的实际问题,带来了相应的经济效益。实施DHI测定已成为指导养殖者科学管理牛群的依据,但随着这项工作的不断深入,数据精准性问题已成为制约应用DHI技术指导奶牛养殖场(户)精准化健康养殖的瓶颈问题,如何解决好这个问题对今后DHI工作的发展意义重大。本文总结了宁夏奶牛生产性能测定数据精准性的因素并提出相应的解决措施和建议。 相似文献
128.
129.
130.
为评价牛乳腺炎无乳链球菌重组表面蛋白(pgk)免疫原性,并通过建立检测抗体的间接ELISA方法对免疫抗体效价进行评价,本研究根据GenBank登录的无乳链球菌pgk基因序列,设计一对引物,以临床分离菌株基因组DNA为模板PCR扩增出pgk蛋白抗原优势区的编码基因序列。将其插入pET-30a(+)中,并在大肠杆菌中表达。Western blot鉴定表明,表达的重组蛋白与阳性血清具有良好的反应原性。采用纯化的表达产物作为包被抗原建立了检测无乳链球菌抗体的间接ELISA方法,确定抗原最佳包被浓度为3.115μg/mL,血清最佳稀释度为1∶160,酶标二抗最适稀释度为1∶4 000。初步应用于检测无乳链球菌、化脓性链球菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌小鼠阳性血清的检测。结果表明牛乳腺炎无乳链球菌pgk亚单位抗原具有良好的抗原性,抗体检测灵敏度达到1∶4 000,同时表现良好的特异性。 相似文献