鸡肝原代细胞药物代谢模型的建立与优化     

刘丽  季辉  彭麟  阮祥春  吉利伟  江善祥 《南京农业大学学报》2015,38(1):127-133

[目的]建立成年鸡原代肝细胞的药物代谢模型并对其进行优化。[方法]以改进的二步灌流法分离8~12周龄的雄性黄羽鸡肝细胞,比较在不同细胞基础培养液条件下鸡肝细胞体外培养的情况,利用倒置显微镜观察肝细胞的形态,利用MTT检测法绘制生长曲线,测定细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性,用q PCR和Western blot测定肝细胞中CYP450酶亚型CYP1A4、CYP1A5和CYP3A37 mRNA相对表达水平和3种酶蛋白的表达量。[结果]离体灌流操作简便,获得的细胞存活率高达90%以上;用含0.5 mg·L-1牛胰岛素、10 g·L-1双抗(100 U·m L-1青霉素和链霉素)和体积分数为10%胎牛血清的DMEM基础培养液体外培养鸡肝细胞,贴壁培养时可见到肝细胞较为明显的分化过程,贴壁后呈上皮细胞样生长,多角形,胞浆内容物均匀丰富,细胞核清晰透亮,少数有双核,细胞生长状态良好。生长曲线和LDH活性测定结果显示:培养3~5 d时细胞状态稳定,并且在肝原代细胞培养的8 d内,CYP1A4、CYP1A5和CYP3A37 mRNA相对表达水平和蛋白的表达量没有显著差异。[结论]以改进的二步灌流法分离鸡肝细胞操作简便,分离的鸡肝原代细胞存活率高,用含0.5 mg·L-1胰岛素、100 U·m L-1青霉素、100μg·m L-1链霉素和10%胎牛血清的DMEM基础培养液体外培养鸡肝原代细胞效果最好,培养3~5 d是进行体外药物代谢等试验的最佳时机。  相似文献   

液质联用方法测定鸡血浆中妥曲珠利及其代谢产物   总被引：2，自引：0，他引：2  

徐颖洁  韩航如  郭永刚  江善祥 《南京农业大学学报》2006,29(1):127-130

初步建立肉鸡血浆中抗球虫药物妥曲珠利及其代谢产物妥曲珠利砜的液质联用(LC/MS)定性定量的测定方法。血浆样品加乙腈混匀后离心,取上清液进行液质联用(LC/MS)分析。色谱分析采用C18反相柱,流动相为乙腈水溶液(体积比为55∶45),质谱分析采用ESI离子源、二级串联质谱、负离子检测方式进行检测,妥曲珠利定量分析采用分子离子峰。该方法可以准确测定妥曲珠利的变化并判断代谢物的产生,在1次进样中实现同时检测妥曲珠利及其代谢物,妥曲珠利检测的线性范围为1~500 ng.mL-1,定量检测下限为0.5 ng.mL-1。此方法与液相色谱法相比灵敏度高、可靠、快速,该方法的建立为今后同类药物的定性定量分析提供基础。  相似文献   

氨苄西林的体外抗菌后效应及抗菌后亚抑菌浓度效应研究     

王丽平  江善祥  史晓丽 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2004,32(8):75-80

采用菌落计数法测定了氨苄西林对4株细菌的体外抗菌后效应(PAE),以及对2株细菌的体外抗菌后亚抑菌浓度效应(PASME)。结果显示,氨苄西林在0.5,1,2,4×MIC浓度时,对金黄色葡萄球菌C26112的PAE值分别为1.14±3.05,1.62±2.11,1.87±1.70和2.45±1.31h,对金黄色葡萄球菌临床分离株的PAE值分别为1.05±1.84,1.38±1.25,1.56±1.35和2.29±2.04h;对大肠杆菌ATCC25922和临床分离株的PAE很小甚至没有;在1/8,1/4,1/2×MIC时对金黄色葡萄球菌C26112及临床分离株的PASME值分别为3.61±1.38,4.75±2.18,6.8±1.51h和3.01±2.5,4.2±1.21,5.9±1.23h;氨苄西林对金黄色葡萄球菌的PAE(0.5～4×MIC)及PASME(1/8～1/2MIC)与浓度在一定范围内呈剂量依赖性,并且在亚抑菌浓度下也具有PAE,当药物浓度达4×MIC时,PAE明显延长(P<0.05),且所测得的PASME较PAE长。所有结果提示:在临床设计给药方案时,对金黄色葡萄球菌敏感株引起的临床感染,除了考虑药代动力学和MIC指标外,还应考虑PAE和PASME因素,可适当延长给药间隔时间;而对PAE无意义的大肠杆菌敏感株引起的临床感染,宜持续给药或缩短给药间隔,也可达到较好的治疗效果。  相似文献   

氨苄西林与阿莫西林对金黄色葡萄球菌及大肠杆菌的体外抗菌后效应   总被引：8，自引：0，他引：8  

王丽平  江善祥  史晓丽  郭永刚  陈绍峰 《南京农业大学学报》2004,27(1):93-96

采用菌落计数法分别测定了氨苄西林和阿莫西林在 0 5、 1、 2、 4倍于各菌最小抑菌浓度 (MIC)时对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌标准株及其临床分离株的体外抗生素后效应 (PAE)。结果显示 ,氨苄西林和阿莫西林在 0 5、 1、 2、 4倍MIC时对金黄色葡萄球菌C2 61 1 2 及临床分离株均具有一定的PAE ,且PAE与浓度在一定范围内 (0 5～ 4倍MIC)呈剂量依赖性 ,当药物浓度达 4倍MIC时 ,PAE明显延长 (P <0 0 5 ) ;但两药对金黄色葡萄球菌C2 61 1 2 及临床分离株的PAE值仅在4倍MIC时差异显著 (P <0 0 5 )。在相同浓度下 ,两药对大肠杆菌ATCC2 5 92 2和临床分离株的PAE很小甚至没有。提示 :在临床设计给药方案时 ,对金黄色葡萄球菌敏感株引起的感染 ,除了考虑药代动力学和MIC指标外 ,还应考虑PAE因素 ,可适当延长给药间隔时间 ;而对PAE无意义的大肠杆菌敏感株引起的感染 ,宜持续给药或缩短给药间隔时间  相似文献   

抗菌药物的抗菌后效应研究进展及其意义   总被引：4，自引：0，他引：4  

王丽平  江善祥  史晓丽 《动物医学进展》2003,24(5):39-41

抗菌药的抗菌后效应 (PAE)是新近提出的一个重要概念 ,它是细菌对抗微生物药敏感性的结构特征性指标 ,几乎是所有抗菌药物的一种性质。PAE以时间的长短来表示 ,可作为重要的药效学参数 ,可作为设计给药方案的参考依据 ,并为临床调整用药间隔提供理论基础 ,且对给药方案中存在的疗效、不良反应、费用和方便性等问题提供了很好的解决办法。该参数能较大程度地完善药效动力学评价指标 ,全面反映药物、细菌及宿主三者之间的关系 ,为临床中抗菌药物的合理使用提供了一定的思路  相似文献   

硫酸头孢喹肟中4种有机溶剂残留量的测定     

刘利锋  江善祥 《畜牧与兽医》2009,41(11)

建立以气相色谱法测定硫酸头孢喹肟中乙醇、丙酮、二氯甲烷、甲苯等4种有机溶剂残留的方法。采用DB-624石英毛细管柱,FID检测器,程序升温:40℃(保持10 min)~220℃(保持5 min),升温速率为30℃.min-1,进样口温度为220℃,检测器温度为230℃,流速:5mL.min-1,分流比为20∶1。结果显示:硫酸头孢喹肟原料药中乙醇、丙酮、二氯甲烷、甲苯在所考察的浓度范围内与峰面积比值呈良好的线性关系(r=0.999 4~0.999 8),检测限分别为1.67,1.89,2.56和2.02μg.min-1(S/N=5),平均加样回收率97.69%~99.42%,RSD均小于5%(n=3)。本试验建立的色谱方法简便、灵敏、准确、重现性好,适用于硫酸头孢喹肟中有机溶剂残留量的检测。  相似文献   

N，O-羧甲基壳聚糖对小鼠骨髓嗜多染红细胞的微核试验   总被引：1，自引：0，他引：1  

张萍  江善祥  万荣峰 《上海畜牧兽医通讯》2009,(1):32-33

壳聚糖（Chitosan）又名壳多糖、可溶性甲壳素、氨基多糖、甲壳多聚糖等,是一种天然的高分子碱性多糖。它广泛存在于真菌的细胞壁及虾、蟹等甲壳动物外壳中以及一些藻类中,是自然界中唯一含游离氨基酸基团的阳离子可食性动物纤维,在动物体内可进行能量转换、释放生物活性物质并能调节动物体生理节律、增强免疫功能、促进肠道有益菌增值、抑制有害菌生长,可以作为一种安全有效的新型、绿色饲料添加剂被开发应用。  相似文献   

有机胂制剂在畜禽生产中的作用、毒性及环境行为   总被引：2，自引：0，他引：2  

姚秀娟  王米  江善祥  薛飞群 《兽药与饲料添加剂》2009,14(6):11-13

介绍了有机胂制剂在畜禽生产中的作用、机理、毒性和残留。提出了由于其使用不当,通过其粪便进入环境中时对土壤和农作物产生一定危害。简单叙述了食品中有机胂的检测方法。  相似文献   

固体过氧化氢的制备及其杀菌效果和稳定性研究     

季辉  金前跃  彭麟  万荣峰  王清运  江善祥 《科学养鱼》2022,(4):48-49

过氧化氢又称双氧水(H2O2),为常用的消毒灭菌剂,且含氧高、氧化能力强、具有良好的消毒杀菌功能、不产生二次污染等优点,但其因稳定性差、储存条件要求高、8％以上的双氧水被列入危化品管理的特点,极大地限制了其应用.因此对其进行改造并解决稳定性,将能极大地提高其临床应用范围.本试验研究了一种稳定性过氧化氢的制备方法,并对其...  相似文献   

小鼠血浆中马度米星铵超高效液相色谱—串联质谱检测方法的建立     

宋昕昊  林梦娟  左儒楠  王俊棋  高修歌  胡诗恒  郑玉玲  季辉  郭大伟  江善祥 《畜牧与兽医》2022,(6):47-52

旨在建立一种用于小鼠血浆中马度米星铵残留量的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法。在ICR小鼠血浆样品中加入内标，用乙腈提取，使用Acquity UPLC~? BEH C18色谱柱(50 mm×2.1 mm, 1.7μm)洗脱，内标法定量分析。方法学验证显示，待测物马度米星铵在1～400 ng·mL^-1的浓度范围内，线性良好(R~2≥0.99),回归方程为：y=1.697 37x+1.622 69,在小鼠血浆中回收率为82.87%～117.74%,日内和日间精密度为：0.99%～12.18%。结果表明：该方法特异性强、灵敏度高、重复性好，适用于小鼠血浆中马度米星铵浓度测定。  相似文献