番茄组织总RNA提取方法研究   总被引：8，自引：4，他引：8  

李大志  邓子牛  熊兴耀  谢丙炎 《湖南农业大学学报(自然科学版)》2007,33(5):572-575

从RNA的完整性、纯度和产量等方面比较了TRIzol,RNAplant,TRIpure等3种RNA提取试剂对番茄不同组织部位总RNA的提取效果.结果表明,RNAplant能从成熟组织中获得较高质量和产量的总RNA,用该方法提取的番茄老化组织总RNA经RT-PCR能成功进行内参检测.  相似文献   

柑橘衰退病毒基因RNAi载体的构建     

李芳  邓子牛  赵亚  李大志  戴素明 《湖南农业大学学报(自然科学版)》2017,43(2)

基于转化病毒基因介导抗性,通过在植物表达载体p CAMBIA 2301上插入启动子–内含子–终止子的方式,构建一种含有发夹结构的、通用型强的RNAi载体骨架结构;以柑橘衰退病毒(citrus tristeza virus,CTV)的p25、p20和p23基因保守序列为模板设计正向片段和反向片段,先后与骨架载体连接,成功构建了3个RNAi载体(分别命名为ds2301–p25、ds2301–p20和ds2301–p23),并将载体ds2301–p23注射入墨西哥莱蒙叶片。制作p23基因的地高辛标记探针,用Northern杂交检测是否有si RNA产生。结果表明:用Northern杂交可以检测到p23特异的si RNA,在墨西哥莱蒙叶片中瞬时表达的农杆菌ds2301–p23可以发生RNAi,表达有效的si RNA。本研究中构建的骨架载体可以广泛用于RNAi载体的构建,含有柑橘衰退病毒基因片段的3个载体可以用于基因功能分析及具有CTV抗性的柑橘种质资源获得。  相似文献   

电子计算机在褐稻虱预测预报上的应用     

王禄斌  陈建川  于梅萍  李大志 《植物保护》1987,13(4):29-30

褐稻虱是涪陵稻区主要害虫之一。为了提高预测预报水平,我们把电子计算机应用于褐稻虱的预测预报,指导防治取得了一定的效果,本文就这方面的研究结果初报如下。 一、资料的积累、整理 (一)灯下资料: 按全国病虫测报总站编制的《农作物主  相似文献   

湖南省葡萄扇叶病调查及检测研究     

周敏  ;聂松青  ;罗奕凡  ;刘昆玉  ;舒广平  ;邓子牛  ;李大志 《湖南农业科学》2014,(4):50-52

对湘西北、湘南、湘中和湘西等葡萄主产区的扇叶病发病及危害情况进行了调查,并通过生物学和分子生物学的方法对各地区的疑似病株进行了检测。结果表明：在湖南的葡萄主产区,葡萄扇叶病的感病品种较多,在夏黑无核、红地球、金星无核和金手指等品种上均有发生,但湘西的刺葡萄表现出对葡萄扇叶病有一定的抗性;感病症状总体上表现为叶片褪绿、黄化,叶缘锯齿变尖锐或形状不规则,并严重影响葡萄植株的生长,导致树势减弱、产量下降、果实品质变差;生物学检测结果显示,采集的54个样品,其中有52%的样品在千日红和本氏烟草上表现出系统性斑驳和变形;而分子生物学检测结果显示,54个样品中有29个样品检测到葡萄扇叶病病毒,以金星无核和红地球两个品种的检出率较高。  相似文献   

番茄抗溃疡病品种的转育与SSR鉴定     

李燕凌  张文  张新宇  李大志 《湖南农业科学》2012,(13):8-13

番茄溃疡病是危害番茄生产的主要病害之一,抗病育种是解决该病害的最佳途径。以感病番茄98-1为母本、茄科茄属龙葵为父本进行杂交育种,经过四代回交和一代自交,获得了对番茄溃疡病具有抗性的杂交后代群体,并通过SSR鉴定得到了1个与番茄溃疡病抗性相关的SSR标记-CAT01。  相似文献   

崀丰脐橙的选育及其耐贮性研究     

李大志  张秋明  邓子牛  熊兴耀  唐云彪  邓昌明  田正清 《广西园艺》2005,16(3):2-3

丰脐橙是从华盛顿脐橙( Citrus sinensis( L) osbeck)中选育出优良芽变品种。该品种遗传性状稳定,综合性状优良。丰脐橙属中晚熟品种,品质上等,早果性、丰产性、稳产性、耐贮藏性好,适应性强,适合在南方各省推广栽培。  相似文献   

毒蛇的人工养殖     

肖红波  李大志 《特种经济动植物》2000,3(3):4-5

毒蛇的全身是宝,经济价值高,而且养蛇本小利大,市场广阔.毒蛇的人工养殖已成为一门新兴的养殖业.现将毒蛇的人工养殖技术介绍如下:  相似文献   

柑桔容器育苗     

李大志 《湖南农业》2005,(9):13-13

柑桔苗木是发展柑桔生产的基础,培育品种纯正、生长健壮、根系发达、无检疫对象或病毒病的优质苗木,是柑桔育苗的主要任务。目前,生产上多用露地育苗的方式培育嫁接苗。但按照国内外发展的趋势,容器育苗是培育无毒苗的发展方向。容器育苗育成的苗木可带原土,减少定植时根系损伤  相似文献   

应用cDNA-AFLP技术分离应答BABA诱导的番茄抗病相关基因     

李大志  陈霄  邓子牛  杨宇红  熊兴耀  谢丙炎 《湖南农业大学学报(自然科学版)》2007,33(1):32-36

应用cDNA-AFLP技术研究番茄根部组织应答BABA(β-Aminobutyric Acid,β-氨基丁酸)诱导后基因转录谱,得到与植物获得性抗性相关的差异表达片段29条,克隆测序后获得10个上调基因片断.经过生物信息学分析和功能预测,其同源基因都是植物体在抗病、抗逆反应中的表达序列标签.根据功能可将其分为5类:第1类是防御反应基因,为病程相关蛋白基因P69家族成员,具有蛋白水解酶功能;第2类是转运蛋白基因,负责细胞内外离子、水和小分子物质的跨膜运输;第3类是信号传导蛋白,是Ca2 信号传导途径上重要的功能蛋白;第4类是分子伴侣蛋白BIF1,协助蛋白质的复性;第5类属功能未知基因.研究表明:BABA诱导植物根部抗病机制涉及植物多方面生理生化反应,由多个功能不同基因共同参与控制.差异表达片段的获得将有助于下一步全长抗病基因的克隆和BABA诱导植物抗性机制的研究.  相似文献   

利用qPCR技术检测柑橘溃疡病菌的灵敏度分析     

李文娟  肖翠  戴素明  李大志  邓子牛 《湖南农业科学》2015,(3)

以常规PCR为对照,分析了实时荧光定量PCR(q PCR)检测柑橘溃疡病菌DNA和柑橘溃疡病菌菌量的灵敏度,并对接种柑橘溃疡病菌后的冰糖橙样品进行了动态监测。结果显示,q PCR检测柑橘溃疡病菌DNA和柑橘溃疡病菌菌量的灵敏度比常规PCR高1~3个数量级,且常规PCR对柑橘溃疡病菌DNA的检测会受到寄主植物DNA的干扰,q PCR不受寄主植物DNA影响;对接种后冰糖橙样品的分析,q PCR即时就能检测到柑橘溃疡病菌,并能实时观察到柑橘溃疡病菌在寄主叶片的增殖情况,而常规PCR要接种后2 d才能检测到柑橘溃疡病菌。  相似文献