反转录PCR扩增鸡传染性支气管炎病毒核衣壳蛋白基因   总被引：1，自引：0，他引：1  

赵晓岩  刘长军 《中国畜禽传染病》1993,(5):45-47

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火鸡疱疹病毒转移载体的质粒的构建   总被引：1，自引：0，他引：1  

赵晓岩  刘长军 《中国畜禽传染病》1995,(6):45-47

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禽源U6启动子介导鸡马立克氏病病毒gI、gE基因特异siRNA的筛选及干扰活性鉴定     

全炎铭  崔红玉  赵妍  赵晓岩  石星明  高宏博  闫帅  张晓艳  王玫  王云峰 《中国预防兽医学报》2011,33(5)

为筛选鸡马立克氏病病毒(MDV)gI、gE基因特异性siRNA,本研究以鸡胚成纤维细胞(CEF)的DNA为模板,扩增禽源cU6-3启动子序列,并合成针对gI和gE基因各5个靶位点的10条shRNA序列.通过重叠PCR将cU6-3启动子与shRNA融合扩增制备shRNA表达盒,将制备的shRNA表达盒分别与重组质粒pEGFP-gI或pEGFP-gE共转染CEF细胞,并根据荧光显微镜观察和流式细胞仪检测结果评价siRNA抑制融合荧光蛋白表达的效率.结果表明,gI和gE基因的抑制效率为10%～80%.分别将其中抑制效率最高的一条shRNA插入pGEM-T载体中构建重组表达质粒pcU6-shgI735和pcU6-shgE936,通过不同细胞系稳定干扰试验和抑制病毒复制试验评价其干扰活性.结果显示,pcU6-shgI735和pcU6-shgE936能够明显抑制融合蛋白的表达及MDV在CEF细胞中的增殖,并且禽源U6启动子构建的表达盒在禽源细胞(DF1)中的活性比在哺乳动物细胞(Vero、MDCK)的活性高1.21～1.45倍.本研究鉴定获得了gI和gE基因的特异性siRNA,筛选出能够抑制MDV复制的靶位点,为MDV基因的功能和抗MDV病毒研究奠定了基础.  相似文献   

火鸡疱疹病毒转移载体的质粒的构建     

赵晓岩  刘长军  李曦  宁晓檬  徐宜为 《中国预防兽医学报》1995,(6)

本试验采用以SV40早期启动子控制的大肠杆菌β—半乳糖苷酶(LacZ)基因作为报告基因,将其插入到含有火鸡疮疹病毒(HVT)糖蛋白A(gA)抗原基因的克隆片段中,构建成HVT转移载体质粒,在该转移载体质粒中,大肠杆菌LacZ基因的两端分别与两段1.4kb和1.8kb的HVT同源片段相连,克隆于pUC19质粒中,将含有LacZ基因的载体质粒与感染HVT的鸡胚成纤维细胞(CEF)中提取的全细胞DNA共同转染CEF,待病毒蚀斑出现后,用含有X-gal的琼脂糖覆盖细胞单层,可见到有兰色的病毒蚀斑,这些结果表明外源性的LacZ基因已被重组到HVT DNA中,同时还证明HVT的gA基因与HVT的复制无关,可以用于外源基因的插入和表达。  相似文献   

马立克氏病三价疫苗免疫效力的研究   总被引：3，自引：0，他引：3  

朴钟洙  赵晓岩 《中国畜禽传染病》1990,(3):16-19

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不同引诱剂产品对桔小实蝇引诱效果比较     

王俊文  孙太华  何建群  陈晓兰  张迪  苏薛阳  冯雨晴  许秀宝  赵昭鑫  徐磊  杨双鹏  季劲风  赵晓岩  王琳 《中国果业信息》2023,52(5)

为筛选一种对桔小实蝇具有较好引诱效果的昆虫信息素引诱剂产品，在福建对比了3种不同配方实蝇双性引诱剂对桔小实蝇的引诱效果，并在广东、广西和云南对比了6种实蝇引诱剂产品对桔小实蝇的引诱效果。田间结果显示，实蝇双性引诱剂SYSXYYJ02对桔小实蝇的引诱效果最佳；柑桔小实蝇引诱剂对桔小实蝇诱捕量最高；柑桔小实蝇引诱剂、果蝇颗粒剂和聪绿?果实蝇饵剂对桔小实蝇雌成虫基本无引诱效果；实蝇双性引诱剂对桔小实蝇具有雌雄双诱效果，且诱捕雌虫占比达58.84%以上。柑桔小实蝇引诱剂在桔小实蝇监测上极具推广价值，实蝇双性引诱剂对桔小实蝇引诱效果稳定，雌雄双诱，在防治上极具推广价值。  相似文献