雪山草鸡感染传染性法氏囊病病毒新型变异株的鉴定     

姜楠  王雨龙  张文英  牛鑫鑫  刘长军  高玉龙  高立  崔红玉  李凯  潘青  张艳萍  刘爱晶  王笑梅  祁小乐 《中国动物检疫》2021,38(5):119-125

传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)新型变异株正在我国广泛蔓延,给商品肉鸡群和蛋鸡群带来了新的威胁。本研究对一个疑似发生非典型传染性法氏囊病的地方品种雪山草鸡群进行了RT-PCR检测,并对分离的3株毒株进行了基因测序及序列分析。结果显示,引起该鸡群发病的病原是IBDV新型变异株,属于A2dB1基因型;这3个毒株的VP2高变区编码蛋白上含有IBDV变异株的特征性氨基酸,也具有IBDV新型变异株的独特氨基酸。结果提示,我国地方品种鸡群中也有IBDV新型变异株的流行,现有的部分商品化IBDV疫苗已不能有效预防IBDV新型变异株的流行。  相似文献   

表达鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因的重组火鸡疱疹病毒的构建及生物学特性分析     

李晓涵  杨伏春  刘芮  高立  崔红玉  张艳萍  刘长军  祁小乐  王笑梅  高玉龙  李凯 《畜牧兽医学报》2023,54(2):656-662

鸡传染性法氏囊病（IBD）是一种严重危害养禽业的高度致死性和免疫抑制性传染病。为研制IBD重组火鸡疱疹病毒（HVT）活载体疫苗,本研究构建了表达鸡传染性法氏囊病病毒（IBDV）保护性抗原VP2基因的重组HVT并对其体外生物学特性进行了分析。通过RT-PCR扩增IBDV超强毒株VP2基因并克隆入pCI载体,获得重组真核表达质粒pCI-VP2。用限制性内切酶将携带CMV启动子的VP2基因表达框架切下,连接于入门质粒pENTR,构建获得重组入门质粒pENTR-VP2。将pENTR-VP2与HVT重组黏粒H3-Kan/ccdB进行LR重组反应,构建重组表达黏粒H3-VP2。用H3-VP2与其他4个相互重叠并覆盖HVT全基因组的黏粒共同转染鸡胚成纤维细胞（CEF）,拯救获得重组病毒rHVT-VP2。将重组病毒在CEF中连续传至20代后用PCR、间接免疫荧光试验和免疫印迹试验进行检测,并绘制重组病毒体外生长曲线,分析其体外复制特性。结果表明,重组病毒rHVT-VP2能够稳定表达VP2蛋白,rHVT-VP2在CEF中的复制能力与亲本病毒无明显差异。重组病毒rHVT-VP2免疫鸡后能够诱导产生IBDV中和抗体,并对IBDV强毒株攻击引起的死亡提供90%免疫保护。重组病毒rHVT-VP2的构建为研制IBD重组HVT活载体疫苗奠定了基础,对IBD的防控具有重要意义。  相似文献   

肉仔鸡传染性法氏囊病混合感染白痢杆菌病的诊断与防治     

王亚萍  崔红玉  丛巍 《中国动物检疫》2006,23(8):37-37

鸡传染性法氏囊病(IBD)是由病毒引起的鸡的一种急性、高度接触性传染病,在我国的流行非常广泛。本病主要侵害免疫中枢器官—法氏囊。因法氏囊被破坏,使鸡降低其对各种传染病的抵抗力并造成鸡对免疫接种的应答反应低下或造成免疫失败,患病鸡群常继发感染新城疫、大肠杆菌病、球虫病、白痢病等。2006年1月宣化区某鸡场发生了鸡传染性法氏囊病及白痢病混合感染,现将诊治情况报告如下。1发病情况春光乡大北街村某户饲养肉仔鸡1500只,从2006年1月份起,鸡群开始发病,发病率85%,死亡率40%。以后经法氏囊苗免疫的鸡群仍然有很大一部分发病,发病率3…  相似文献   

张家口地区奶牛临床型乳房炎病原菌的中草药体外抑菌试验     

赵香汝  葛利忠  郑雪花  李寸欣  徐彤  徐占云  徐明举  薛拥志  崔红玉  张瑞华 《黑龙江畜牧兽医》2010,(1)

奶牛乳房炎是奶牛养殖业中的常见病和多发病,根据临床上是否表现症状分为临床型乳房炎和隐性乳房炎.该病不仅会降低产奶量,而且还会影响奶及奶制品的品质,给养殖业造成巨大的经济损失,严重制约着奶牛养殖业的健康发展.  相似文献   

ND—EDS鸭源二联油乳剂灭活苗的研制     

阚德义  崔红玉  王爱华  赵彦岭 《今日畜牧兽医》1998,(3)

以鸭源NDV和EDSV适应株同时接种鸭胚,收获48一120小时鸭胚尿囊液,测其NDV和EDSV的HA价后,制成二联油乳剂灭活苗,免疫130日龄蛋鸡,免疫后30天HI抗体达到高峰,免疫后180天ND—HI抗体≥8log_2,EDS—HI抗体≥6.5log_2,与进口和国产二联苗比较抗体水平相近,P>0.05无显著差异,疫苗保存6—9个月不影响免疫效果。  相似文献   

鸭肠炎病毒UL41基因缺失株的构建及其体外增殖能力分析     

杨伏春  刘芮  李晓涵  高立  刘长军  祁小乐  崔红玉  王笑梅  高玉龙  李凯 《畜牧兽医学报》2022,53(8):2689-2696

旨在构建鸭肠炎病毒（DEV）UL41基因缺失毒株,并对其生物学特性进行分析,本研究以克隆有DEV UL41基因的重组黏粒D1为骨架,利用Red/ET重组技术构建缺失UL41基因的重组黏粒D1 dUL41;将UL41基因缺失重组黏粒D1 dUL41与其他4个克隆有DEV基因组片段的亲本黏粒共转染鸭胚成纤维细胞（DEF）,拯救获得UL41基因缺失毒株rDEV-SD19/dUL41。将该基因缺失病毒感染DEF后,提取病毒基因组进行PCR鉴定及测序,并利用间接免疫荧光试验检测该病毒感染细胞中UL41基因表达情况;绘制拯救的基因缺失病毒的生长曲线,分析其体外复制特性。PCR及测序结果显示,本研究成功构建了缺失UL41基因的重组黏粒D1 dUL41。将该基因缺失黏粒与其他含有DEV基因组的亲本黏粒共转染DEF后能够产生典型的蚀斑病变。PCR及测序结果显示,UL41基因成功从DEV基因组中缺失;间接免疫荧光试验发现,基因缺失病毒rDEV-SD19/dUL41感染DEF后,未见UL41蛋白表达。综上表明,本研究成功构建了DEV UL41基因缺失病毒。体外生长曲线显示,rDEV-SD19/dUL41在DEF中的复制能力明显低于亲本病毒,提示UL41蛋白在DEV复制中发挥重要作用。UL41基因缺失DEV的构建为进一步研究UL41基因在DEV感染和致病中的作用机制奠定了基础。  相似文献   

增免散对雏鸡免疫功能和增重的影响   总被引：6，自引：1，他引：5  

张秋君  刘旭东  康志勇  崔红玉  王爱华  杨玉成 《中国兽医杂志》2002,38(1):34-35

近年来 ,随着中药免疫药学研究的逐步深入 ,人们发现许多中药或其活性成分能增强机体免疫功能 ,促进机体生长 ,预防疾病的发生。对于应用中草药防治鸡传染病、提高免疫力机理的研究报道很多 ,如陆钢[1] 报道党参等药具有提高鸡血清抗体和雏鸡保护率的作用 ,延长抗体存留时间 ,增强吞噬细胞的功能 ,提高机体免疫力 ;方维焕报道黄连等 2 2种中药对鸡新城疫病毒有不同程度的抑制作用 ,1 6种中药能明显抑制病毒血凝和有不同程度减少病毒空斑形成的作用。可见具有治疗传染病作用的中药除含有效物质杀灭、抑制病毒外 ,还能激发机体抗感染的免疫力 …  相似文献   

一株鸡传染性喉气管炎病毒的分离鉴定及TK基因分析     

孔聪聪  赵妍  张晓敏  崔红玉  薛美  胡顺磊  闫帅  李巧玲  牛秀杰  王云峰 《中国预防兽医学报》2012,(12):955-958

黑龙江省牡丹江市某养鸡场28周龄蛋鸡发生以呼吸困难、咳血和产蛋下降为主要症状的疾病。本研究利用特异性引物,从发病鸡喉头及其分泌物中扩增出鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)gB基因的567 bp大小片段;将发病鸡喉头及分泌物处理后接种鸡胚,在鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)上形成痘斑。病毒接种鸡胚肾细胞48 h后电镜下可以观察到典型的疱疹病毒粒子形态,并且该分离株能够与ILTV单克隆抗体发生特异性反应。动物回归试验显示,感染的SPF鸡出现典型ILT症状,并能够从发病鸡体内重新分离到ILTV,由此判定该分离株为ILTV,并将其命名为MDJ0442。根据NCBI登录的ILTV序列(HQ630064)设计引物,以MDJ0442基因组为模板,PCR扩增TK的基因片段,进行测序和序列分析。结果表明,与其他ILTV参考病毒株相比,TK基因的核酸同源性为99.62%。本研究可以为ILTV的流行病学调查和分子生物学研究提供参考。  相似文献   

马立克氏病病毒囊膜糖蛋白Ⅰ的原核表达及多克隆抗体的制备     

李巧玲  崔红玉  牛军伟  王云峰 《中国家禽》2013,35(6)

提取感染MDV 814A3毒株的鸡胚成纤维细胞(CEF)总基因组,利用PCR技术扩增获得gI基因.将鉴定正确的gI基因克隆至pET-32a(+),构建原核表达载体pET-gI.将诱导表达获得的gI重组蛋白免疫新西兰大白兔,产生的抗血清能够与MDV814A3病毒发生特异性反应.本试验所制备的gI重组蛋白和多克隆抗体将在MDV检测、血清学诊断等方面具有重要应用价值.  相似文献   

传染性喉气管炎病毒WG株糖蛋白gJ基因的克隆与表达     

何来  王云峰  石星明  崔红玉  韩文雄  兰德松  王玫  童光志 《中国预防兽医学报》2008,30(2):118-121

根据GenBank中已发表的传染性喉气管炎病毒全基因组序列（NC006233）设计引物,以传染性喉气管炎病毒WG株基因组为模板,PCR扩增糖蛋白gJ基因,并对其进行序列分析。用DNAStar软件分析酣蛋白的抗原性,选择抗原性强的140aa-483aa片段,克隆并连接到原核表达载体pET-32a（＋）中,转化BL21（DE3）菌株。经IPTG诱导后,获得大小为65．2ku的重组蛋白,命名为卜出,表达量占菌体蛋白总量的60．8％;Westernblot分析表明r-gJ具有较强的抗原性。  相似文献