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根据A型流感病毒基质蛋白(matrix protein,M)基因保守序列设计并合成特异性引物和TaqMan BHQ探针,建立快速检测A型流感病毒的实时荧光定量RT-PCR方法。通过RT-PCR方法克隆A型流感病毒M基因靶序列并将其连入pMD-18T载体,制备阳性标准品,优化反应条件,以10倍系列稀释的标准品绘制标准曲线,其相关系数为0.998。检测结果显示,该方法的灵敏度可达10 copies/μL或1 EID50病毒且特异性良好,除A型流感病毒外,对猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪输血传播病毒检测结果均为阴性。该方法重复性好,批内和批间变异系数均小于3%。对40份实验感染样品的检测结果表明,该方法与病毒分离结果一致,比常规RT-PCR检测方法灵敏度更高,特异性更强。 相似文献
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目前流行的甲型H1N1流感病毒是一个复杂的基因重配病毒。对病毒的分子生物学研究,尤其是病毒囊膜蛋白血凝素(haemagglutini,HA)基因和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)基因的研究,为控制和预防H1N1流感病毒具有重要的意义。本研究对中国流行的2009甲型H1N1猪源流感病毒的HA和NA基因与疫苗株A/California/07/2009(H1N1),以及不同国家和地区的病毒株进行核苷酸和氨基酸序列分析。从NCBI的GenBank数据库下载所需要毒株的序列,采用Lasergene 6.0软件包中的EditSeq和MegAlign进行序列分析,进化树分析采用MEGA4.1软件。进化分析表明,中国流行的2009 H1N1流感病毒与疫苗株的核苷酸同源率分别在98.8%~99.7%和98.6%~99.6%之间;裂解位点处为I/VPSIQSR↓G,不具备高致病性流感病毒的特征;有1株NA抗性病毒。尽管与疫苗株相比,中国流行株2009甲型H1N1猪源流感病毒的HA和NA基因有部分突变,但这些突变并不是重要的。本研究首次详细分析了中国流行的2009甲型H1N1猪源流感病毒株与疫苗株的HA和NA基因的分子特征,对实时监测流感病毒HA和NA基因的变化具有重要意义。 相似文献
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工程质量是公路项目建设的核心,也是监理工作的重点,本文结合公路工程实例对工程质量监理如何在施工中各个环节进行全面系统的监督、检查和控制进行了简析. 相似文献
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随着经济社会的逐步发展和进步,茶叶经济逐步发展壮大,要求茶叶企业持续提升自身的经营管理能力。笔者分析了平衡积分卡在茶叶企业绩效管理中的应用状况,希望茶叶企业积极行动起来,采取针对性较强的措施,持续提升自身的绩效管理能力和水平。 相似文献
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青草搐搦又称低镁血性搐搦或低镁血病等.春夏季节,牛羊等牲畜由舍饲转为青草地上放牧,此季节青草富含蛋白质,而镁、钙、钠及糖较少,故易发生青草搐搦病,尤其是在初次放牧期间.
1 病因
春、夏季的幼嫩青草和生长旺盛的栽培牧草中镁的含量比成熟鲜草低,加上栽培牧草大量施用氮肥和钾肥,使土壤含钾量增高、土壤偏酸性,进一步降低了牧草对土壤中镁的吸收,牛采食了这种牧草后易发生低镁血症.泌乳高峰期的牛对镁的需求量高,更易发生此病.牛不慎大量采食大麦、燕麦等幼苗,也易引发本病.冬季给牛饲喂大量玉米、黄豆等钙少磷多的饲料,春季舍饲转放牧时牛大量采食钾多钠少的青草,致使血液中镁和钙的含量急剧下降,易引发本病.施用了大量氮肥和钾肥的牧草,是引发本病的高危险源. 相似文献
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H9N2亚型禽流感疫苗在我国普遍使用,在强大免疫压力下,H9N2亚型禽流感病毒变异加快,现有商品化灭活苗无法完全保护免疫鸡免受H9N2亚型禽流感病毒流行株的感染。为此,本研究以从近期流行毒株中筛选出的一株H9N2亚型禽流感病毒A/Chicken/Shanghai/441/2009(H9N2)(简称为SH441)为种毒,制备灭活苗,进行了最小免疫剂量及抗体消长规律的初步研究。将制备的H9N2亚型禽流感灭活苗以0.01、0.02、0.04、0.05、0.08 mL/只的不同剂量,胸部肌肉途径免疫3周龄SPF鸡只,并于免疫后21天静脉感染SH441病毒,结果显示该疫苗最小免疫剂量为0.02 mL/只。以0.05 mL/只剂量免疫SPF鸡只,该疫苗能刺激SPF鸡只产生较高的HI抗体滴度,且在免疫后第5周达到峰值(12 Log2以上),随后稍有下降但保持相对稳定,且在免疫后29周时依然保持在7 Log2以上。这些结果为为该疫苗的进一步开发奠定了良好的基础。 相似文献