日本沼虾SRAP反应体系正交设计及优化   总被引：3，自引：0，他引：3  

姚建华  傅洪拓  龚永生  吴滟  何新龙  李慧萍  乔慧 《华北农学报》2008,23(Z2)

对影响SRAP反应的4个因素(Taq酶、dNTP、Mg2+、引物)4个水平进行正交组合,以建立日本沼虾的SRAP分子标记技术。试验分两步进行:第一步筛选出可有效扩增的引物组合;第二步对筛选出的体系进行优化。结果表明,日本沼虾SRAP反应体系适宜引物组合为Me4Em2,最适条件为在25μL的反应体系中,Mg2+、dNTP、Taq酶、引物浓度分别为2.5 mmol/L、0.25 mmol/L、0.64 U/20μL、0.6μmol/L。本研究结果为SRAP分子标记技术在日本沼虾中的应用奠定了基础。  相似文献   

杂种优势预测研究进展     

李明爽  傅洪拓  龚永生  吴滟  李法君 《勤云标准版测试》2008,(1)

杂种优势预测对于杂种优势的利用具有重要意义,然而传统的杂种优势预测方法由于要花费大量的人力、物力和财力,限制了杂种优势的进一步利用。几十年来,育种工作者从亲缘关系、生态类型、生理生化和数量遗传等不同方面,进行了大量的研究,提出了许多预测杂种优势的方法。通过概述有关杂种优势预测,及数量性状、同工酶、分子标记亲本间遗传距离和杂种优势关系的研究现状．对杂种优势预测的发展方向进行了展望。  相似文献   

低氧对甲壳动物的影响及其分子调控研究进展   总被引：1，自引：1，他引：0  

孙盛明  祝孟茹  潘方艳  王柠  傅洪拓  戈贤平 《水产学报》2020,44(4):690-704

氧是众多生物赖以生存的首要条件,动物处于低氧环境时,机体的生化反应和生理功能也会相应发生改变,严重时可引起一系列机体损伤甚至死亡。低氧胁迫下的应激机制是涉及多基因参与的复杂的生理调控过程,与哺乳动物相比,甲壳动物的低氧应激与分子适应机制尚不明晰。本文分析了低氧胁迫产生原因,并从生理层面阐述了甲壳动物对低氧胁迫的应激反应和生理适应策略、以及低氧对甲壳动物的行为、存活、抗氧化能力和代谢的影响,又从HIF-1信号通路、AMPK信号通路以及细胞凋亡通路阐述了甲壳动物对低氧环境胁迫的分子响应机制。本文在总结低氧信号传导及其调控通路研究进展的基础上,提出了低氧胁迫对甲壳动物影响的预防和调控手段,包括选育耐低氧新品种和营养调控手段,以期为人们更深入地理解甲壳动物低氧应激和分子适应机制提供理论参考。  相似文献   

二种微生物制剂对青虾池水质和生长的影响   总被引：2，自引：0，他引：2  

李跃华  葛家春  彭刚  王嘉俊  傅洪拓  陆全平 《水产养殖》2009,30(10):65-67,70

将二种微生物制剂施用于青虾养殖池,观察池塘水质的变化和对青虾规格及产量的影响,结果表明,施用微生物制剂后,池水的溶解氧、总磷增加,氨氮值下降,而COD、pH和总氮则没有明显变化和差异。试验池青虾的生长速度明显要大于对照池,说明微生物制剂可明显改善水环境,提高养殖青虾的产量和规格。  相似文献   

日本沼虾4个地理群体遗传变异的RAPD分析   总被引：4，自引：0，他引：4  

蒋速飞傅洪拓  熊贻伟吴滟龚永生  何新龙 《长江大学学报》2006,3(2):179-182

采用随机扩增多态DNA（RAPD）技术对取自六安、龙感湖、淮南和高淳等4个地理群体的日本沼虾（Macrobrachium nipponense）各30个个体进行遗传多样性分析。在事先优化的反应条件下。所使用的OPP、OPX2个系列40个随机引物中，有16个引物扩增出清晰稳定的片断。共产生173个位点。大小在250～2000bp，利用PopGen1．32进行分析，日本沼虾多态位点为75个（多态性片断的比例为43．4％），Shannon信息指数为0．1771～0．2466。遗传距离显示日本沼虾群体间有一定遗传分化。其中高淳群体和龙感湖群体之间遗传距离最大（0．1712）．六安群体和淮南群体之间最小（0．1146）。用UPGMA对4个地理群体进行聚类分析，六安和淮南群体首先聚在一起。高淳和龙感湖群体最后。  相似文献   

青虾无公害养殖技术（五）     

傅洪拓  龚永生 《科学养鱼》2007,(5):12-13

四、无公害青虾的病害防治技术 （一）无公害青虾病害防治与安全用药原则 无公害青虾养殖过程中，坚持以防为主、防治结合和综合防治的原则。使用渔药必须符合《NY5071—2002无公害食品渔用药物使用准则》，严禁使用违禁药物；按照《水产养殖质量安全管理规定》做好用药记录；严格遵守休药期制度，停止用药时间必须超过休药期才能上市销售，以免药物残留危害人体健康。  相似文献   

鱼类精子遗传失活的X射线诱导   总被引：1，自引：1，他引：0  

王晓娟  傅洪拓  龚永生  何新龙  吴滟  熊贻伟  蒋速飞 《中国农学通报》2008,24(5):476-480

利用X射线对鲤鱼精子进行不同照射时间的处理,然后将处理后的精子与正常鲤鱼卵进行授精试验,以检测X射线对鲤鱼精子遗传物质的灭活效果。X射线强度为100kV,5mA,源距10cm,照射时间为0、20、30、40、50、60、70和80min。随着照射时间的增加,在0～50min之间,总出苗率呈逐步下降趋势,而在50～60min之间,总出苗率又呈升高趋势,超过60min,总出苗率又呈逐步下降趋势,表现出明显的“Hertwig效应”;另一方面,随照射时间的增加,正常苗率逐步下降,而鱼苗畸形率逐步升高,照射50min以上,鱼苗畸形率均为100%。结果表明,在强度为100kV,5mAX射线管照射下,照射时间为60min时,鱼苗畸形率为100%且出苗率最高,是灭活鲤鱼精子和获得雌核发育单倍体的最佳照射时间。本文填补了近年来定量研究X射线灭活精子遗传物质的空白,为应用X射线诱导鱼类雌核发育的进一步深入研究奠定基础。  相似文献   

青虾眼柄组织总RNA提取方法的比较和分析     

王 宁 傅洪拓 乔 慧 吴 滟龚永生  蒋速飞熊贻伟 《中国农学通报》2011,27(3):378-382

为了找到最适合青虾眼柄总RNA抽提的方法,本试验先后使用RNAiso Plus、RNeasy Mini Kit、Unizol等产品抽提青虾眼柄总RNA并在方法上进行了改良,通过电泳、紫外分光光度计和RT-PCR对总RNA进行检测和分析。结果表明RNAiso法抽提的RNA色素含量高;改良RNAiso法抽提的RNA 有部分降解,含色素少,对反转录酶有一定的抑制作用但不影响RT-PCR;RNeasy Mini Kit能有效去除抑制反转录酶活性的色素且RNA无降解,但DNA污染严重;RNAiso结合RNeasy Mini Kit法和Unizol结合RNeasy Mini Kit法提取的RNA均无DNA污染,也没有抑制反转录酶活性的色素,但后者所提的RNA完整性好。因此,Unizol结合RNeasy Mini Kit法最适合青虾眼柄总RNA的提取,可获得高质量的RNA用于RT-PCR、cDNA文库构建、定量PCR等实验。  相似文献   

鲤鱼AFLP-银染体系的建立与优化     

慧萍  傅洪拓  李法君  乔慧  姚建华 《勤云标准版测试》2009,29(3)

以鲤科鱼类建鲤为材料,对扩增片断长度多态性(AFLP)反应体系进行优化,建立适合于鲤鱼的AFLP反应体系.通过对AFLP常规流程中基因组DNA提取、酶切.连接、预扩、选扩及电泳-银染过程的优化,初步建立了适合鲤鱼的AFLP分析体系:采用鲤血细胞DNA提取;MseI和EcoRI 37 ℃双酶切5 h;预扩引物为E+A和M+C;选扩引物E+3与M+3浓度配比为1:8,为提高引物与模板的结合效率,选扩程序均采用touch-down程序;最后结合经典AgNO3-Na2CO3银染显色.通过优化的AFLP程序,从64对引物中筛选出8对多态性引物,为进一步的鲤鱼种质资源研究奠定基础.  相似文献   

microRNA在水产动物中的研究进展   总被引：1，自引：1，他引：0  

李法君  李明爽  付春鹏  李群峰  罗永巨  傅洪拓 《水产学报》2016,40(6):976-988

mi RNAs是一类在真核生物中广泛存在的非编码小分子RNA,通过与靶m RNA互补配对在转录水平上对基因的表达进行负调控,导致m RNA的翻译抑制或降解。大量研究表明,mi RNA在躯体发育、癌症、细胞分化、细胞增殖与凋亡、脂肪代谢等方面发挥作用。近来在水产动物中,有关mi RNA的研究取得了众多的科研成果,然而对其进行全面总结的报道较缺乏。本文综述了mi RNA在水产动物中的研究进展,结果显示mi RNA在水产动物中表现为多样化的生物学功能,本文也对其研究前景进行了展望,旨在为以后更好地研究水产动物mi RNA的功能提供参考。  相似文献