18种中药水煎剂及其提取物浓缩粉对貂源肺炎克雷伯菌的体外抑菌作用研究     

张传美  郭玉广  孙晓琦  杨柳青青  单虎  杨海燕 《黑龙江畜牧兽医》2019,(2)

为研究连翘、白头翁、丹皮等18种中药水煎剂及其提取物浓缩粉对貂源肺炎克雷伯菌的抑菌作用,试验采用琼脂平板打孔法测定抑菌圈直径观察药物的体外抑菌作用。结果表明:中药水煎剂中,黄连、黄芩和薄荷对肺炎克雷伯分离株的抑菌效果最好,抑菌圈直径达10 mm以上,属于中度敏感。中药提取物浓缩粉中,丹皮酚对肺炎克雷菌的抑制作用最强,达到高度敏感。黄连、连翘、山豆根、白芍、薄荷和黄芪多糖6种中药提取物浓缩粉对肺炎克雷伯菌也具有较强的抑菌作用,抑菌圈直径达10 mm以上,属于中度敏感。说明18种中药水煎剂及其提取物浓缩粉对肺炎克雷伯菌有不同程度抑菌作用。  相似文献   

鸵鸟新城疫实验病理学研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

尹燕博  单虎  王建琳  刘福辰  田振宇  将正军  郭福生  陆明哲 《中国兽医学报》2008,28(8)

用鸡源新城疫(ND)强毒株F48E9和鸵鸟源新城疫强毒株O-XJ99-12,对不同免疫状态下2~4月龄鸵鸟进行动物试验。动物发病后经剖检、组织切片、病毒分离等方法证实:鸵鸟源和鸡源新域疫病毒(NDV)毒株,经静脉和黏膜感染非免疫鸵鸟,均可引起特征性的鸵鸟ND症状和病变,对鸡胚致病力强的NDV毒株,对非免疫鸵鸟的致病力也强;鸵鸟ND的免疫临界点,HI抗体效价最低为5log2。  相似文献   

鸽圆环病毒SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法的建立及应用     

亓玉卓  梁琳  朱亚丽  梁瑞英  贾亚雄  单虎  崔尚金 《中国家禽》2021,(3):22-27

为建立一种针对鸽圆环病毒(PiCV)的快速诊断方法,试验根据PiCV的Rep保守基因序列,设计合成一对特异性引物,建立了PiCV荧光定量PCR检测方法,对其敏感性、特异性、重复性进行评价并利用该方法对临床样本进行检测。结果表明:在最佳反应条件下,所建立的PiCV荧光定量PCR方法在1.43×10²~1.43×10⁸copies/μL标准品范围内具有良好的线性相关性,线性相关系数为0.998;敏感性试验结果显示,该方法最低可检测到1.43×10²copies/μL标准品,是常规PCR检测方法的1000倍;特异性试验结果显示,该方法与其他常见的鸽病病原不发生交叉反应;重复性评价结果显示,批内与批间的变异系数均小于0.8%;所建立PiCV荧光定量PCR方法对临床鸽血清样品检测结果显示,PiCV阳性率达38.7%,高于常规PCR方法的检测阳性率(28.7%),说明该方法具有良好的适用性。研究结果PiCV的流行病学调查、病原学监测及定量研究奠定了基础。  相似文献   

犬瘟热病毒疫苗免疫逃逸株的血凝素基因变异研究     

黄娟  隋晓梅  王怡男  单虎 《华北农学报》2016,(2):231-238

为了弄清是否有新基因型犬瘟热病毒出现,对山东省不同地区的免疫水貂、狐狸和犬进行了犬瘟热病毒检测,扩增了病毒核衣壳基因和血凝素基因(H),并对13个犬瘟热病毒山东株(8株貂源,2株狐狸源,3株犬源)血凝素基因进行了测序。结果表明,13个犬瘟热病毒山东株之间H基因核苷酸同源性为99.1%~100.0%,均为Asia-1型,这也是我国目前水貂犬瘟热病毒唯一的基因型。与2012年之前的犬瘟热病毒中国分离株及疫苗株相比,13个毒株H基因有4个氨基酸的一致性变异,即P200S、M263I、I542N和Y549H,N-糖基化位点比Onderstepoort株多6或7个,比CDV3株多3或4个。抗原性分析表明,与疫苗株相比,13株山东株在540-549位氨基酸出现一个新的抗原区域,210-230,327-347位的抗原区域也与疫苗株不同,这些变异可能是我国貂狐犬瘟热免疫失败的原因。  相似文献   

单抗捕捉ELISA检测猪附红细胞体血清抗体方法的建立   总被引：2，自引：0，他引：2  

张浩  单虎  吴延功  张守富  吴晓东  王志亮  刘佩兰  朱绍辉 《中国兽医学报》2009,29(1)

在制备针对猪附红细胞体病的特异性单克隆抗体的基础上,建立了单抗捕捉快速检测猪附红细胞体病抗体的ELISA方法,并对影响ELISA结果的各项反应条件进行了优化.结果表明,猪附红细胞体腹水单抗的最佳稀释度为1:20 000,猪附红细胞体病抗原工作质量浓度为4.088 mg/L,血清稀释度为1:40,HRP标记的兔抗猪IgG的工作浓度为1:5 000.待检血清和酶标二抗的反应时间均为37℃1 h;底物在室温显色时间为10 min.已建立的ELISA方法与PCR平行检测50份样本,总符合率为92%,表明该方法特异性强、快速、敏感性高.用该法检测了各地采集的171份血清,阳性率为40.4%,与镜检的符合率为59.2%;阴性率为47.4%,与镜检的符合率为66.7%,总符合率为67.3%.  相似文献   

大肠杆菌O157:H7菌毛分子伴侣基因的克隆与表达     

牛晋国  秦晓冰  单虎  韩一超  周志江 《中国兽医学报》2009,29(12)

根据Genebank中已登录的大肠杆菌O157:H7菌株EDL933基因序列中茵毛分子伴侣ycbR基因序列设计1对引物,并分别在其5'端分别加入Neo I、Xho I酶切位点,以大肠杆菌O157:H7国内分离株97094的DNA为模板,用聚合酶链反应(PCR)扩增出710 bp的DNA片段.回收并纯化该DNA片段,用限制性核酸内切酶Nco I、Xho I同时消化DNA片段和双酶切栽体质粒pET28a(+).将它们回收纯化并连接,然后转化到宿主菌大肠杆菌DH5a,从该菌中提取重组质粒,用PCR、限制性内切酶位点分析及核苷酸序列测定法对克隆的重组质粒进行鉴定,表明ycbR基因定向克隆到了载体质粒pET28a(+).再将重组质粒转化到表达宿主菌大肠杆菌BL21(DE3),在含Kan抗生素LB培养基中经IPTG诱导12～16 h,做SDS-PAGE分析,表明ycbR基因在菌株中获得高效表达,表达蛋白相对分子质量大小约为30 000,与预期结果一致.为研究大肠杆菌ycbR基因产物的功能和致病作用奠定了基础.  相似文献   

犬瘟热病毒一步RT-PCR检测方法的建立   总被引：1，自引：0，他引：1  

张洪亮  孟培培  宋晓明  杨瑞梅  秦晓冰  丰艳妮  黄娟  单虎 《畜牧与兽医》2012,44(1):49-52

根据犬瘟热病毒(CDV)弱毒株Onderstepoort的核蛋白(N)基因的相对保守区序列设计了1对特异性寡聚核苷酸引物,在国内首次建立了CDV一步RT-PCR检测方法。该法可以特异地扩增出N基因265 bp大小的目的片段,可以检测到0.043 6μg/mL的总RNA,与两步法RT-PCR的敏感性相当。对25例犬瘟热临床疑似病例样品,一步法RT-PCR检测出17份阳性,与两步法RT-PCR的阳性符合率达94.4%,胶体金检测试纸条检测出13份阳性。研究结果表明,建立的CDV一步法RT-PCR检测方便、敏感、特异,适用于CDV临床病料的检测和分子流行病学调查。  相似文献   

妥曲珠利对肉鸡生长性能和免疫机能的影响     

孙燕  单虎  史雪萍  秦志华  王述柏 《中国兽医杂志》2012,48(12):17-19

本试验旨在研究饮水中添加不同水平妥曲珠利对肉鸡生长性能和免疫机能的影响.288只1日龄AA肉仔鸡,随机分为4组.各组日粮相同,对照组(1组)饮用自来水,试验组(2组、3组和4组)于8～10日龄连续3d饮水中分别添加妥曲珠利25mg/L、50 mg/L和100 mg/L,试验期42 d.结果表明,妥曲珠利对肉鸡生长性能和血清新城疫抗体效价均无显著影响(P＞0.05);25mg/L和50 mg/L妥曲珠利组肉鸡28日龄胸腺指数和脾脏指数显著高于对照组(P＜0.05),100mg/L妥曲珠利组肉鸡28日龄腔上囊指数显著低于对照组(P＜0.05);50 mg/L妥曲珠利组外周血T淋巴细胞的转化率显著高于对照组(P＜0.05).可见,饮水中添加25 mg/L和50 mg/L妥曲珠利对肉鸡免疫机能有一定促进作用.  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒主要结构蛋白基因半定量 RT-PCR方法的建立及其在RNA干扰研究中的应用   总被引：1，自引：1，他引：0  

黄娟  单虎 《中国畜牧兽医》2012,39(6):22-26

为了建立以GAPDH基因为参照的半定量RT-PCR检测方法,根据PRRSV VR2332株病毒基因组和GAPDH序列设计4对特异性引物,分别扩增GP5、M、N和GAPDH基因序列,将shRNA表达质粒和GP5、M、N真核表达质粒共转染HEK293A细胞,应用该法检测了转染孔中GP5、M、N的相对表达量。同管和分管扩增法均建立了以GAPDH基因为参照的半定量RT-PCR检测方法。靶向GP5、M和N蛋白基因的shRNA表达质粒对其各自蛋白的抑制率为36%~69%,其中pSi-N3和pSi-G1抑制效果最为显著。结果表明,建立的半定量RT-PCR可以用于PRRSV主要结构蛋白基因表达水平的检测分析中。  相似文献   

九味中药及其复方对奶牛乳房炎病原菌的体外抑菌试验   总被引：2，自引：0，他引：2  

张传美  杨海燕  单虎 《动物医学进展》2012,33(4):132-134

针对导致奶牛乳房炎的主要病原菌(大肠埃希菌、葡萄球菌、链球菌),用平板法测定了9味中药和4种复方中药的体外抑菌效果。结果表明,方剂1及方剂2的综合效果较好,对于葡萄球菌以黄芩、黄连、红花、鱼腥草的抑菌效果明显,对大肠埃希菌以黄芩、鱼腥草、蒲公英和黄连的效果好。为防治奶牛乳房炎的中药配方科学筛选提供了理论依据。  相似文献