猪IgG1-Fc基因的克隆、原核表达及表达条件优化     

连凯琪  周玲玲  王英杰  李翠  宋玉伟  张明亮 《江苏农业科学》2019,47(15)

为了探索猪IgG1-Fc(pIgG1-Fc)基因在大肠杆菌中的高效表达,首先通过反转录PCR(RT-PCR)扩增pIgG1-Fc基因,并构建重组表达质粒pET30a(+)-pIgG1-Fc,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行原核表达,然后通过优化异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导浓度、菌体培养温度及菌体培养时间,实现pIgG1-Fc重组蛋白的高效表达。结果表明,成功克隆了pIgG1-Fc的基因666 bp,共编码222个氨基酸;重组原核表达质粒pET30a(+)-pIgG1-Fc经过酶切和测序证明构建正确,重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中能够表达,表达的融合蛋白分子量约为36 ku。其最佳表达条件如下:在25℃条件下加入终浓度为1 mmol/L的IPTG诱导6 h可形成大量包涵体蛋白。pIgG1-Fc基因被成功克隆并原核表达,为进一步研究该蛋白的功能及实现其他蛋白与pIgG1-Fc融合后原核表达奠定了基础,为制备能与猪IgG1结合的二抗提供了材料。  相似文献   

貂源铜绿假单胞菌耐药性及生物学特性     

张明亮  张淼丹  闫新武  孙长江  顾敬敏  崔子寅  韩文瑜 《河南农业科学》2019,48(5)

为了解貂源铜绿假单胞菌流行株基本特性,对分离的20株铜绿假单胞菌进行药物敏感性试验、血清型鉴定、ToxA基因检测、强毒株筛选及绝对致死量(LD_(100))测定。结果表明,铜绿假单胞菌分离株耐药现象比较严重,对氨苄西林、头孢呋辛、头孢曲松、头孢噻吩、头孢噻肟、头孢西丁、头孢唑林和四环素不敏感,对妥布霉素敏感率为95%;铜绿假单胞菌分离株的血清型为G型和B型,分别占85%和15%;20株铜绿假单胞菌均能检测出毒素基因ToxA;小鼠致死性试验表明,铜绿假单胞菌分离株之间毒力差异很大,少数菌株如ZHDL9、ZHDL6等均表现出较强的毒力。以菌株ZHDL9为代表株建立小鼠鼻腔感染模型,采用建立的感染模型测定得菌株ZHDL9对小鼠的LD_(100)为5×10~7 cfu。由此可见,分离的20株铜绿假单胞菌对临床常用抗生素耐药严重,对妥布霉素的敏感率为95%,提示该种抗生素可用于临床治疗水貂出血性肺炎,而菌株ZHDL9可作为生物制品研发的候选菌株。  相似文献   

高效硫酸盐还原菌的分离鉴定及其特性研究   总被引：3，自引：0，他引：3  

马保国  胡振琪  张明亮  陈胜华  王萍  黄晓燕 《农业环境科学学报》2008,27(2):608-611

从煤矸石山淋溶水长期污染的黄土中分离获得一株硫酸盐还原菌.研究了菌株的生理生态特性,探讨了温度、pH和氧气对菌株的生长及转化硫酸盐效能的影响.结果表明,该菌株是革兰氏阳性菌,可以含有醇羟基的有机碳为碳源(电子供体),硫酸盐等为硫源(电子受体);在有氧和无氧条件下均能生长,菌株为兼性厌氧菌;生长的最适宜pH为7.16;最适生长温度为35℃;硫酸盐转化率最高达94.3%.同时测定了菌株的生长曲线.  相似文献   

桑沟湾六种大型海藻光合特性的比较研究     

高亚平  张继红  方建光  吴桃  张明亮  唐望  毛玉泽  任黎华  刘顶海 《渔业现代化》2011,38(1):33-37

利用水下饱和脉冲荧光仪(Diving PAM)对桑沟湾6种常见海藻的光合荧光特性进行了原位测定.结果显示:表征植物PSⅡ潜在光能转化效率的指标:Fv/Fm在孔石莼(Ulva pertusa)、羽藻(Bryopsis plumosa)、蜈蚣藻(Grateloupia filicina)、扇形拟伊藻(Ahnfeltiops...  相似文献   

养殖栉孔扇贝对桑沟湾碳循环的贡献   总被引：3，自引：1，他引：2  

张明亮  邹健  毛玉泽  张继红  方建光 《渔业现代化》2011,(4)

通过室内实验、数学模拟的方法研究了桑沟湾养殖栉孔扇贝通过呼吸、钙化等活动对湾内碳循环的影响,并与生物沉积碳相比较发现,养殖扇贝每年通过呼吸和钙化分别放出碳1.22×104t和7.57×102t;但通过生物沉积作用每年有8.71×104t碳被沉降到沉积物界面,这些碳绝大部分被埋藏从而脱离了地球化学循环。尽管养殖扇贝通过呼吸和钙化释放出部分碳,但有更多的碳通过生物沉积作用被埋置因此,从整体上看,养殖栉孔扇贝在湾内碳循环中参与了碳汇的作用。  相似文献   

海蜇浮游幼体形态特征和生长规律的研究   总被引：4，自引：0，他引：4       下载免费PDF全文

刘顶海  张继红  陈四清  方建光  燕敬平  刘春胜  张明亮  高亚平 《渔业科学进展》2011,32(3):51-56

观察描述了海蜇Rhopilema esculenta从碟状体发育至幼蛰的形态变化特征,首次观察到了消化腔残留通道口的愈合过程,并重新对海蜇浮游幼体各个阶段进行了划分和定义.依据苗种培育与生产实际采样,在水温20±1℃,盐度28～29,pH为7.8～8.2条件下,初生碟状体(伞径2～3mm)经过20 d的培养,棒状附着器形成,发育成为幼蜇(15～20 mm).测定分析了人工培养的初生碟状体到幼蜇的摄食量和生长规律(伞径和体重),2～20 mm的海蜇幼体伞径日生长率呈指数增长,方程为y-2.748 8e0.1018x,体重与伞径的关系式为Y-6×10-5-0.5χ3.5475,摄食量与伞径呈指数增长,方程为y=43.537χ1.775.  相似文献   

辽东湾叶绿素a与营养盐分布特征的数值模拟     

赵梓宇  朱晓森  王卓  张明亮 《大连海洋大学学报》2024,(1):134-143

为探究辽东湾海域内叶绿素a与营养盐的时空分布特征及相互作用机理,基于数值模拟(Delft3D)方法构建了叶绿素a (Chl-a)、溶解氧(DO)、氨氮(NH₄⁺-N)、硝酸盐氮(NO₃^--N)和活性磷酸盐(PO₄^3--P)等生态指标在辽东湾海域的生态动力学模型(Delft3D-ECO),并在验证模型的基础上分析了叶绿素a等生态指标浓度在辽东湾海域的时空变化和分布情况。结果表明：在季节变化上,叶绿素a质量浓度表现为秋季(4.83μg/L)>夏季(4.13μg/L)>春季(3.39μg/L),DO质量浓度表现为春季(9.41 mg/L)>夏季(7.26 mg/L)>秋季(5.84 mg/L),NO₃^--N质量浓度表现为春季(0.76 mg/L)>秋季(0.56 mg/L)>夏季(0.50 mg/L),NH₄⁺-N质量浓度表现为春季(0.0...  相似文献   

两株海水鱼肠道芽孢杆菌的分离鉴定及特性分析     

孙娜  王腾腾  韩慧宗  张明亮  王斐  姜海滨 《海洋渔业》2019,41(5):606

为获取具有益生特性的芽孢杆菌(Bacillus)应用于养殖生产,从野生蓝点马鲛(Scomberomorus niphonius)和许氏平鲉(Sebastes schlegelii)肠道内分离筛选出两株芽孢杆菌,分别命名为YB1和YH2,其革兰氏染色均呈阳性,基于形态学观察、生理生化特征分析及16S rDNA序列比对,鉴定YB1为蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus YB1),YH2为壁芽孢杆菌(Bacillus muralis YH2)。分析了温度、pH和NaCl含量(w/v%)对YB1和YH2生长的影响,选取蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶特性培养基检测了YB1和YH2的产酶特性,并通过腹腔注射的方式测定了YB1和YH2对许氏平鲉和大菱鲆(Scophthalmus maximus)的安全性。结果显示:YB1适宜的生长条件为温度15～35℃、pH 5～9、NaCl含量0～2%,最适生长条件为温度35℃、pH 7、NaCl含量0;YH2适宜的生长条件为温度15～45℃、pH 5～9、NaCl含量1%～3%,最适生长条件为温度30℃、pH 5、NaCl含量2%;YB1和YH2均具有产淀粉酶和蛋白酶的特性;YB1在浓度≤1×10~8 cfu·mL~(-1)时对大菱鲆和许氏平鲉均是相对安全的,YH2在浓度≤1×10~8 cfu·mL~(-1)时对大菱鲆是相对安全的。研究表明:YB1和YH2具有作为有益菌应用于海水鱼养殖的潜力,可作为候选菌株开发为芽孢杆菌微生态制剂。  相似文献   

光照强度和营养盐对海带幼苗释放溶解有机碳的影响          下载免费PDF全文

尼志杰  李斌  孙琰晴  胡顺鑫  张明亮  苏博  姜向阳  刘永春  赵晖  何乃叶 《渔业科学进展》2022,43(5):8-15

为了探究光照与营养盐对海带(Saccharina japonica)幼苗释放溶解有机碳(DOC)的影响,测定了不同光强[0、83、165和250 μmol photons/(m2·s)]和不同营养条件下(氮加富、磷加富、氮磷加富和自然海水)海带幼苗DOC的释放速率。结果显示,自然海水条件下,海带幼苗DOC释放速率与光照呈正相关性(P<0.05),光照250 μmol photons/(m2·s)时达到最高,为(24.31±5.84) μmol/(g·h),约为黑暗条件的4倍左右。单一氮加富、磷加富对海带幼苗释放DOC无显著影响,其释放速率分别为(23.04±4.23)和(18.18±4.59) μmol/(g·h)。氮磷共同加富显著提升了海带幼苗DOC释放速率,其释放速率为(37.15±6.77) μmol/(g·h),约为自然海水条件下的3倍。海带幼苗释放DOC很可能同时受“溢出”与“扩散”两种调节机制影响。在寡营养条件下,“溢出”机制占主导,表现为与光照正相关,释放物质相对分子量较高;在富营养条件下,“扩散”机制占主导,表现为受氮、磷营养盐整体水平调节,释放物质相对分子量较低。  相似文献   

AIP常规熏蒸剂量与密闭时间的探讨     

张明亮寇彦平  张全州杨潇 申祚 《粮油仓储科技通讯》2004,(3):43-44

AIP进行常规熏蒸杀虫的剂量和密闭时间，原商业部1987年颁布的《粮油储藏技术规范(试行)》中有过具体规定，即56％的AIP片剂用量为仓库空间3～6g／m^3、粮堆6～9g／m^3，施药后密闭3～15天。但近年来，随着粮库建设的发展，房式仓的仓型、材料、结构及工艺都有了很大改进，设计更加合理，门  相似文献