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金属硫蛋白-1基因(metallothionein-1,MT-1)是一类广泛存在于动物体内的金属结合蛋白,除维持金属动态平衡和重金属解毒外,还可参与清除自由基、拮抗电离辐射和抗应激等。为深入研究MT-1基因参与动物机体抗逆性的分子机制,本研究采用RT-PCR和RACE(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术获得天祝白牦牛(Bos grunneins)MT-1基因全长cDNA序列,运用生物信息学方法分析MT-1蛋白的理化性质、结构和不同物种间的同源性,并利用RT-qPCR方法分析MT-1基因在天祝白牦牛各个脏器和组织中的表达丰度。结果表明,天祝白牦牛MT-1基因cDNA序列全长为408 bp(GenBank登录号:KF770836),开放阅读框(ORF)长186 bp,编码61个氨基酸,氨基酸的分子量为5.981 kD;氨基酸序列分析显示,天祝白牦牛MT-1基因编码氨基酸序列与牛(Bos taurus)的同源性高达100%,同时与大多数哺乳动物相似;荧光定量PCR结果发现,MT-1 mRNA在天祝白牦牛8个不同脏器和组织中均有表达,心脏中表达量最高。天祝白牦牛MT-1基因的成功克隆为进一步研究该基因的功能提供了基础资料。 相似文献
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乳牛肝MTP基因mRNA定量检测模板的构建 总被引:2,自引:1,他引:1
应用RTPCR方法。克隆394bp的MTP片段,连接到pMD18-T载体上构建pMD-MTP394重组质粒;应用限制性内切酶ApaI消化重组质粒pMD-MTP394,切下-194bp的小片段。回收大的线性片段。T4DNA连接酶连接,成功构建了-个重组的竞争模板质粒pMD-MTP200。为建立竞争性RTPCR法检测乳牛肝MTP基因mRNA奠定了基础。 相似文献
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观察双峰驼奶对2型糖尿病大鼠肾组织结构及其细胞凋亡的影响,为临床预防和治疗糖尿病及其并发症提供理论参考。通过链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)结合高糖高脂饮食诱导构建2型糖尿病(type 2diabetes mellitus,T2DM)大鼠模型,糖尿病大鼠随机分为糖尿病模型组(diabetes model control,DMC)、低剂量骆驼奶组(2ml/d)(low camel milk,LCM)、高剂量骆驼奶组(5ml/d)(high camel milk,HCM)和盐酸二甲双胍组(200mg/kg)(metformin hydrochloride,MTH),每组12只,另设正常对照组(control group,C)。建模成功后,试验组处理4周后检测大鼠空腹血糖(FPG)浓度变化;采用苏木精-伊红(HE)染色方法检查肾脏组织的病理变化;采用荧光定量Real time-PCR法检测Bax(Bcl2-associated X protein,Bax)、Bcl-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)、细胞凋亡蛋白酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase 3,Caspase 3)和核转录因子(nuclear factor-kappa B,NF-κB)mRNA的表达丰度;采用免疫组织化学染色法和免疫印迹法观察肾脏组织凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达变化。结果显示,与DMC组相比,LCM、HCM、MTH组大鼠FPG浓度均显著下降(P〈0.01),LCM组大鼠胰岛素敏感性指数(ISI)显著升高(P〈0.01);HE染色显示DMC组肾小球体积增大,囊腔变小,肾小球内出血严重,而LCM、HCM、MTH组肾小球体积、囊腔间隙较正常,肾小球出血明显减少;Bax mRNA和NF-κB mRNA在DMC组中表达量最高,Bcl-2mRNA和Caspase 3mRNA分别在LCM组和HCM组有较高的表达量;与DMC组相比,LCM、HCM、MTH组大鼠肾脏细胞Bax蛋白表达减低,Bcl-2蛋白表达升高。结果表明,双峰驼奶能显著降低糖尿病大鼠肾脏损伤,抑制其细胞凋亡,对糖尿病及其并发症的治疗发挥有效作用。 相似文献
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为阐明胰岛素、胰高血糖素在奶牛脂肪代谢中的调控作用,应用RT-PCR法观察了胰岛素、胰高血糖素对体外培养脂肪细胞胰高血糖素受体(GLNR)mRNA丰度的影响。结果发现,随着培养液中胰岛素质量浓度的升高,GLNR mRNA表达逐渐增加(P<0.05);而随着培养液中胰高血糖素浓度的升高,GLNR mRNA表达逐渐降低(P<0.01)。本研究结果表明,胰岛素、胰高血糖素直接调控奶牛脂肪细胞胰高血糖素受体mRNA的表达。 相似文献
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条华蜗牛(Cathaica fasciola)翻身习性的研究* 总被引:1,自引:0,他引:1
【研究目的】研究条华蜗牛翻身习性,并研究蜗牛体重、环境温度、光照强度、饥饿和取食等因素对翻身时间的影响作用。【方法】将蜗牛身体倒置后,用秒表记录蜗牛身体从倒置至恢复原状的翻身时间长短来比较不同因素对翻身时间的影响。【结果】翻身时间随体重、光照强度和饥饿时间增加而增加,而随温度和取食时间增加而减少。体重与翻身时间呈极显著正相关(P<0.0001)。三体重组(I、III、V)翻身时间在30~40℃和取食48h分别极显著短于相应10℃和12h的(P<0.01)。在最低强度的白炽灯光(37.8LX)下翻身时间都极显著短于最高光强(4310LX)的,相同光照强度不同光质对翻身时间也有一定影响。饥饿72h后翻身时间都极显著长于12h的。【结论】条华蜗牛身体倒置恢复原状的时间可受多个因素的影响,除受到自身体重的影响外,还受到如光照、温度、是否取食等多个外界因素的影响。 相似文献
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为探讨长期钼暴露对子代小鼠肾功能的影响,采用2月龄清洁级小鼠60只(雌雄比2∶1),随机分为4组(每组10只雌鼠,5只雄鼠),雌雄分开饲养。饮水中加入不同剂量Na2MoO4.2H2O组成空白对照组、低钼组(100mg/L)、中钼组(200mg/L)和高钼组(400mg/L),4周后雌雄合笼饲养,待其产仔。妊娠期和哺乳期母鼠仍按原分组给予不同剂量的钼。仔鼠断奶后,同样按原分组给予不同剂量的钼。饲养8周后,再从每组后代中随机选取雌性小鼠10只和雄性小鼠5只合笼饲养,待其产仔。如此反复,使小鼠繁殖4代。选取第3代(F2)、第4代(F3)小鼠眼球摘除法采血并分离血清,测定血清肌酐和尿素氮。采集肾脏测定微核率和肾组织切片。结果表明,当饮水中Na2MoO4.2H2O达到200mg/L以上时,可显著增加后代小鼠肾细胞微核率(P<0.05)和血清肌酐浓度(P<0.05),降低血清尿素氮含量(P<0.05)。说明钼制剂可对小鼠后代肾脏产生损伤作用。 相似文献
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不同类型酒糟营养成分组成差异的比较研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究旨在比较不同类型酒糟营养成分组成差异并评定其营养价值。采集了5类酒糟样品共24个,其中浓香型高粱酒糟8个,酱香型高粱酒糟4个,青稞酒糟4个,玉米酒糟3个,啤酒糟5个,分析其养分组成,并应用康奈尔净碳水化合物-蛋白质体系(CNCPS)对其瘤胃降解特性进行评定,利用原子吸收法测定其铁、铜、锰、锌含量,并测定其抗营养因子单宁和硅含量。结果表明:1)啤酒糟pH和初水含量显著高于其他酒糟(P0.05)。2)啤酒糟粗蛋白质含量最高,显著高于浓香型高粱酒糟、青稞酒糟和玉米酒糟(P0.05)。啤酒糟和酱香型高粱酒糟中性洗涤不溶蛋白质(NDIP)含量显著高于其他酒糟(P0.05)。浓香型高粱酒糟和酱香型高粱酒糟酸性洗涤不溶蛋白质(ADIP)含量显著高于其他酒糟(P0.05)。玉米酒糟粗脂肪含量显著高于其他酒糟(P0.05)。浓香型高粱酒糟的粗纤维、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维和酸性洗涤木质素含量显著高于其他酒糟(P0.05)。玉米酒糟淀粉含量显著高于其他酒糟(P0.05),啤酒糟淀粉含量显著低于其他酒糟(P0.05)。3)按CNCPS划分,啤酒糟快速降解碳水化合物(CA)比例显著高于其他酒糟(P0.05),玉米酒糟中速降解碳水化合物(CB1)比例显著高于其他酒糟(P0.05),浓香型高粱酒糟不可降解碳水化合物(CC)比例显著高于其他酒糟(P0.05),啤酒糟慢速降解真蛋白质(PB3)比例显著高于其他酒糟(P0.05),浓香型高粱酒糟不可降解真蛋白质(PC)比例显著高于其他酒糟(P0.05)。4)浓香型高粱酒糟和酱香型高粱酒糟铁和锰含量显著高于其他酒糟(P0.05),啤酒糟铜和锌含量显著高于其他酒糟(P0.05)。5)啤酒糟单宁含量显著低于其他酒糟(P0.05),浓香型高粱酒糟硅含量显著高于其他酒糟(P0.05)。由此可见,不同类型酒糟营养成分组成差异较大。玉米酒糟提供了最优质的碳水化合物组分,啤酒糟提供了最优质的蛋白质组分,青稞酒糟和酱香型高粱酒糟品质较优,浓香型高粱酒糟品质最差,应根据实际生产需求合理添加。 相似文献
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以3个品系花椰菜为试材,采用同源克隆的方法,克隆了花椰菜BoPGIP2基因,并对表达水平进行分析。结果表明:该基因与油菜的PGIP2基因序列有较高的相似性;ExPASy分析发现BoPGIP2理论分子量为37.02kDa,等电点为8.51,分子式为C_(1672)H_(2604)N_(436O487)S_(13),不稳定系数为34.95,为稳定蛋白,脂肪族指数为92.48,GRAVY值为-0.096,表明其在一级结构上的亲水性、疏水性差异不显著。亚细胞定位预测分析表明,此蛋白属于分泌途径信号肽蛋白;qRTPCR分析发现BoPGIP2基因在花椰菜高抗菌核病品系、中抗菌核病品系中均是茎和叶中相对表达量较高,而在易感菌核病品系中则是根中相对表达量最高,叶和茎中相对表达量较低,这与抗菌核病强弱具有一致性,推测此基因很可能在调节花椰菜的抗菌核病中起着重要作用。 相似文献