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为评价共表达鸡IL-6和H5亚型禽流感病毒HA基因重组鸡痘病毒(rFPV-AH5AIL6)的遗传稳定性,本研究将其接种CEF,绘制生长曲线.结果显示,该重组病毒与亲本病毒的生长速度及蚀斑大小一致;在CEF 连续培养20代,取第0代、5代、10代、20代重组病毒PCR扩增HA和Ⅱ-6基因进行鉴定,显示HA基因无核苷酸突变,IL-6基因在第20代时有1个氨基酸发生突变,但不影响该蛋白的功能区;间接免疫荧光试验证明所选代次病毒均能够表达HA蛋白,RT-PCR试验表明各代次病毒均可以表达鸡IL-6基因;通过蓝斑鉴定重组病毒纯度,结果显示所有蚀斑均为蓝斑.因此,该重组鸡痘病毒具有良好的遗传稳定性,符合兽医生物制品的生产要求. 相似文献
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为探讨禽沙门菌生物被膜形成能力与耐药性的关系,对临床样品进行沙门菌分离,通过多重PCR方法和序列分析测定其血清型,结晶紫染色定量法测定其生物被膜形成能力,最低抑菌浓度(MIC)测定其对药物敏感性。结果表明:共分离到16株禽沙门菌,其中鸡白痢沙门菌7株、鼠伤寒沙门菌6株、肠炎沙门菌2株、纽波特沙门菌1株;药敏试验结果显示16株禽沙门菌对新霉素、阿米卡星、庆大霉素、氧氟沙星、氯霉素、诺氟沙星有较强的敏感性;87.5%的禽沙门菌能形成生物被膜,相对于浮游状态,沙门菌形成生物被膜后MIC值至少提高16倍,最高超过1 024倍。因此,处于生物被膜状态下的沙门菌可显著提高其对抗生素的抵抗力。 相似文献
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原蚕全龄三回育的体会 总被引:1,自引:0,他引:1
我场地处经济较发达的杭州市郊七堡 ,是生产一代杂交蚕种为主的专业蚕种场。每年养蚕制种季节 ,70 %左右的劳力是向农村招聘的季节性临时工。改革开放以来 ,随着市郊乡镇工业和家庭工商业的蓬勃兴起 ,农村劳动力大量转移 ,出现雇用季节性临时工“招聘难、用工贵 ,技术低”的矛盾 ,成为制约蚕种产量的症结所在。因此迫切需要省工、省力、省成本 ,又能保证蚕种产质量的原蚕饲育新技术。为此 ,进行原蚕3回育的试养。1原蚕3回育的试养结果我场于2000年 ,用秋丰、白玉品种试养了一日3回育 ,与一日4回育原蚕比 ,见表1。从表1可知 ,实… 相似文献
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高效表达H9亚型禽流感病毒HA基因的重组鸡痘病毒的构建及免疫效力试验 总被引:8,自引:1,他引:8
将禽流感病毒血凝素 H9A基因克隆入插入载体 p FG11S中 ,通过酶切鉴定获得了正向转移载体 p FG11SHA;将其与禽痘病毒疫苗株 (w FPV)共转染鸡成纤维细胞 (CEF) ,通过蓝白斑筛选纯化得到重组病毒 r FPV- Ps- HA;以间接免疫荧光法证实 HA基因得到了表达。将该病毒经颈部皮下免疫 1日龄 SPF鸡 ,免疫后 15 d以 H9亚型禽流感病毒 F株翅静脉攻毒 ,攻毒后第 5天采集泄殖腔棉拭子样品进行病毒分离。将此重组病毒与以痘苗病毒 P7.5启动子表达相同基因的重组病毒 r FPV- P7.5 - HA作比较 ,结果表明 ,r FPV- Ps- HA相对于 r FPV- P7.5 - HA明显抑制了病毒的排出 ;攻毒后第 2、5、7、9、11天分别对 r FPV- Ps- HA、油乳剂灭活苗免疫鸡进行泄殖腔、气管排毒规律的检测 ,发现疫苗组均能很好地抑制排毒 ,攻毒对照组泄殖腔的排毒率明显高于气管排毒率 相似文献
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肠致病性大肠杆菌的分离鉴定和耐药性分析 总被引:1,自引:0,他引:1
为了给临床合理用药提供正确的指导,对江苏南京、扬州、镇江、泰州、盐城及安徽天长等地区送检的病死猪、羊、鸡、鹅等动物进行细菌分离和鉴定,调查肠致病性大肠杆菌对常用抗菌药物的耐药情况。结果分离出78株大肠杆菌,经过血清型鉴定,其中17株为肠致病性大肠杆菌,共属于8种血清型。通过对这17株肠致病性大肠杆菌进行耐药性分析,发现分离的肠致病性大肠杆菌对15种药物存在不同程度的耐药性。对多西环素、诺氟沙星、洛美沙星高度耐药,耐药率分别为100%、94.12%、94.12%,对头孢曲松钠、阿米卡星敏感性较高,敏感率分别为52.94%、41.18%。研究结果显示肠致病性大肠杆菌在动物感染的大肠杆菌病例中占有一定的比例,同时分离菌株的耐药性较为严重,给治疗增添了难度,因此应重视对肠致病性大肠杆菌的监测,根据药敏结果选用合适的药物进行治疗。 相似文献
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将H9亚型禽流感病毒(AIV)HA基因插入到具有新复制非必需区的通用型质粒载体pP12LS中构建转移载体pP12LSH9A,再分别转染预先感染不同毒力的2种鸡痘病毒(FPV)282E4株和LP株的鸡胚成纤维细胞,经系列蓝斑筛选纯化,获得了2种重组鸡痘病毒(rFPV),分别命名为rFPV282—12LSH9A和rFPVLP-12LSH9A。将这2株rFPV在SPF鸡和带有高水平抗H9亚型AIV母源抗体的商品鸡上分别进行免疫效力试验。结果:rFPV282—12LSH9A和rFPVLP-12LSH9A在SPF鸡上的排毒保护率均为100%(10/10),在商品鸡上的排毒保护率分别为88%(23/26)和92%(24/26)。结果表明获得了2株在带有抗H9亚型AIV高水平母源抗体的商品鸡上免疫效力较好的rFPV。 相似文献
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利用反向遗传技术,通过基因重排方法,以A/chicken/shanghai/F/98(H9N2)禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)的6个内部基因为骨架,与A/Chicken/Guangdong/SS/94(H9N2)AIV的HA和NA基因组合,产生3株H9N2亚型重排AIVs。动物试验发现A/Chicken/Shanghai/F/98(H9N2)和A/Chicken/Guangdong/SS/94(H9N2)AIV主要在呼吸系统复制,A/chicken/shanghai/F/98(H9N2)株在气管和肺组织的复制能力明显强于A/Chicken/Guangdong/SS/94(H9N2)AIV株。3株H9N2亚型重排AIVs的动物试验发现HA和NA基因对H9N2亚型AIV在呼吸道的复制特性起主要作用。内部基因对H9N2亚型AIV在呼吸道的复制也有一定的作用。结果表明1994年中国首次分离到的H9N2亚型AIV经过4年的宿主适应和基因进化,加强了其在呼吸系统的复制能力,奠定了气溶胶传播的基础。 相似文献
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斜纹夜蛾预测预报及综防技术试验研究 总被引:3,自引:1,他引:2
2003~2007年对斜纹夜蛾预测预报方法及综防技术进行了田间试验,通过试验明确利用有效积温法则、历期预测法、性诱剂引诱成虫、频振式杀虫灯引诱成虫等方法,可有效地开展对斜纹夜蛾的预测预报。并且在预测预报基础上,在2~3代幼虫1~2龄高峰期分别用20%米满胶悬剂2 000倍液、25%灭幼脲3号悬浮剂1 000倍液、5%抑太保乳油1 500倍液、Bt乳剂1 000倍液、10%除尽悬浮剂1 500倍液等5种杀虫剂对斜纹夜蛾的防治试验结果表明,这5种药剂有良好的防治效果,击倒性强且持效期长,药后7d防效最高为91.30%,药后10d对幼虫防效仍为87.00%~92.60%。 相似文献