基于F和HN蛋白的基因Ⅶ型新城疫病毒嵌合疫苗的构建及免疫效力评估     

李丽  王国康  商雨  徐英英  冯贺龙  汪宏才  张蓉蓉  曾哲  罗青平  邵华斌  曾驰  温国元 《中国畜牧兽医》2022,49(11):4346-4355

【目的】 试验旨在构建一种基因Ⅶ型新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）嵌合疫苗,并对其免疫效力进行评估。【方法】 利用反向遗传学技术,以含有禽偏禽腮腺炎病毒2型（Avian metaavulavirus-2,AMAV-2） Y2株基因组的重组质粒pT7-Y2为模板,将Y2株的F和HN蛋白的胞外区替换为基因Ⅶ型NDV HB0901株的F和HN蛋白的胞外区,将HB0901株的F蛋白裂解位点突变为LaSota弱毒株的F蛋白裂解位点,构建嵌合重组病毒rY2-FHNR株。对rY2-FHNR株的增殖特性、致病力及遗传稳定性等生物学特性进行检测,并通过接种2周龄SPF鸡评估rY2-FHNR株的免疫原性及其免疫血清与Y2株的交叉反应性,利用NDV NP蛋白的间接ELISA方法对免疫血清进行检测,验证其鉴别诊断效果。【结果】 试验成功获得了嵌合重组病毒rY2-FHNR株,生物学特性检测结果显示,rY2-FHNR株在鸡胚中的增殖滴度和致病性符合弱毒特征,其鸡胚传代的遗传稳定性良好。rY2-FHNR株可诱导机体产生针对NDV的抗体,且免疫血清不与rY2株抗原发生交叉反应。通过NDV NP ELISA抗体检测方法可以实现区分疫苗免疫与野毒感染。【结论】 本试验研发了一种基因Ⅶ型NDV嵌合候选疫苗,为基因Ⅶ型NDV的监测、防控和净化提供了技术支撑。  相似文献   

湖北省部分地区鸭致病性大肠杆菌的分离与血清型鉴定   总被引：4，自引：0，他引：4  

罗玲  艾地云  杨峻  邵华斌  王红琳  温国元  罗青平  张蓉蓉 《中国家禽》2009,31(8)

鸭大肠杆菌病是一种急性败血性传染病,因而又名鸭大肠杆菌败血病[1].该病在临床剖检上主要表现为纤维素性心包炎、肝周炎、气囊炎.各种年龄的鸭均可感染,雏鸭最易感,2～6周龄多发,发病率和死亡率较高,在商品肉鸭中死亡率可高达50%左右,而且常常与鸭传染性浆膜炎混合感染,成年鸭和种鸭主要表现为零星死亡.随着养鸭业的日益发展和集约化程度的提高,鸭大肠杆菌病的发生日趋严重,给养鸭业造成了严重的经济损失[2].为弄清湖北省鸭场大肠杆菌病的流行情况及其致病性菌株的优势血清型、致病力等特点,我们对湖北省部分地区鸭场的大肠杆菌进行了分离与鉴定,并对分离株进行血清型鉴定和动物致病力试验,以便筛选出致病性大肠杆菌的优势血清型,从而为今后进一步制备灭活疫苗预防本地的大肠杆菌病提供科学依据.  相似文献   

鸭病毒性肝炎高免卵黄抗体研制与应用     

杨峻  王红琳  温国元  罗玲  罗青平  艾地云  张蓉蓉  邵华斌 《湖北农业科学》2012,51(17):3789-3790,3793

用鸭肝炎病毒(DHV)地方分离毒株HB98株经鸡胚连续传53～62代适应鸡胚的鸭肝炎病毒作为种毒,制备成弱毒疫苗和灭活疫苗分别免疫伊莎产蛋鸡,经3次免疫后,收获卵黄,测定病毒中和效价可达103以上,经30万只雏鸭临床应用,对未发病的雏鸭预防保护率达90％以上,发病鸭群治疗保护率达80％以上.  相似文献   

猪圆环病毒2型HBZX株的全基因组克隆及序列分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

温国元  罗青平  杨峻  李坤  商雨  张蓉蓉  罗玲  王红琳  艾地云  邵华斌 《湖北农业科学》2008,47(10)

参照GenBank发表的猪圆环病毒2型(Porcine Circovirus type 2,PCV2)序列,设计合成了1对用于扩增PCV2全长基因组的特异性引物,从患断奶后仔猪多系统衰弱综合征(PMWS)的病料中,采用PCR方法克隆了PCV2 HBZX株的全长基因组序列,并进行了序列测定与分析.结果显示,PCV2 HBZX株的基因组全长为1 767nt:同源性比较发现,HBZX株与其他PCV2株的核苷酸同源性为95.0%～98.9%;遗传进化树分析表明,根据PCV2全基因组序列和ORF2编码蛋白的氨基酸序列所绘制的遗传进化树相似度较高;PCV2可分为两个亚型,以中国株为代表的亚洲株和以加拿大株为代表的美洲株分布在亚型1中,以法国株为代表的欧洲株分布在亚型2中.说明PCV2各分离株之间存在较为明显的地理位置上的相关性.  相似文献   

一种黄病毒引起鸭产蛋下降的诊断报告     

张蓉蓉  温国元  罗青平  杨峻  王红琳  罗玲  艾地云  邵华斌 《湖北农业科学》2011,(19):4010-4012,4017

2010年以来湖北省部分地区蛋鸭群出现了严重的产蛋下降以及持续性死亡,对发病鸭进行了病理剖检以及病毒的PCR鉴定.其中用RT-PCR检测鸭黄病毒为阳性,禽流感病毒、新城疫病毒和减蛋综合征病毒均为阴性.对PCR扩增的鸭黄病毒目的片段进行回收测序,将测序结果与黄病毒属的7个不同的病毒群进行序列比对,表明该病毒与黄病毒科黄病...  相似文献   

禽霍乱·新城疫二联油乳剂灭活疫苗研究(Ⅲ报)——疫苗对鸭和鹅的安全性及免疫效力试验     

王红琳  杨峻  邵华斌  温国元  艾地云  罗玲  罗青平  张蓉蓉 《安徽农业科学》2008,36(36)

[目的]为禽霍乱、新城疫二联油乳剂灭活疫苗免疫鸭和鹅等水禽提供理论依据。[方法]将禽A型多杀性巴氏杆菌接种固体培养基收获的菌液与鸡新城疫病毒弱毒株La Sota接种易感鸡胚收获的感染鸡胚液混合,用甲醛溶液灭活后制备成5批二联油乳剂灭活苗,用于鸭和鹅的安全性及免疫效力试验。[结果]5批二联苗对鸭和鹅的安全性试验表明,免疫鸭和鹅均未出现任何不良反应;免疫效力试验表明,免疫后3周,鸭和鹅的新城疫血凝抑制抗体效价均≥4 log2,新城疫攻毒保护率均为100%,禽霍乱攻毒保护率为66.7%~83.3%。[结论]该二联苗用于免疫鸭和鹅安全可靠,免疫效果良好。  相似文献   

鹌鹑致病性大肠杆菌与沙门氏菌混合感染的病原分离鉴定与药敏试验     

王红琳  杨峻  邵华斌  罗玲  艾地云  罗青平  温国元  张蓉蓉  张琳 《畜牧与饲料科学》2010,31(1):156-158

目的:分离鉴定发病鹌鹑的病原菌,并进行药敏试验。方法:从发病鹌鹑的肝脏和心脏等组织,分离细菌,进行纯化培养、生化试验、小鼠致病性试验和药敏试验。结果:经过实验室诊断确诊为大肠杆菌和沙门氏菌混合感染;用13种常用抗菌药物对分离菌株进行了药敏试验。结果表明,大肠杆菌对庆大霉素、复达欣、新霉素等药物高度敏感;沙门氏菌对复达欣、新霉素、氟哌酸等药物高度敏感。结论:药敏试验结果为规模化鹌鹑养殖场临床合理用药提供了科学依据。  相似文献   

禽霍乱、新城疫二联灭活苗与单苗比较试验     

王红琳  汪宏才  罗青平  温国元  罗玲  张蓉蓉  张腾飞  卢琴  邵华斌 《黑龙江畜牧兽医》2018,(16)

为了科学地评价禽霍乱、新城疫二联灭活疫苗的安全性及免疫效果,试验将二联苗分别与鸡新城疫灭活疫苗(La Sota株)和禽多杀性巴氏杆菌病灭活疫苗(1502株)在同等条件下进行了性状和无菌检验,并进行了安全和效力比较试验。结果表明:二联苗与两种单苗的性状和无菌检验均合格,安全和效力试验结果无明显差异。说明二联苗产品质量不亚于两种单苗,且实现了一针防两种病的目的。  相似文献   

鸭禽流感疫苗免疫程序研究报告     

杨峻  罗青平  艾地云  罗玲  王红琳  张蓉蓉  温国元  张腾飞  汪宏才 《湖北农业科学》2014,53(21)

为了科学制定鸭的禽流感疫苗免疫程序,进行了以下三方面的试验:①不同品种雏鸭母源抗体消长情况测定.结果表明,5～7日龄雏鸭AI-HI抗体可维持较高水平,15～17日龄下降至4.0log2以下.②疫苗首免后抗体检测.结果表明,鸭首次免疫后2周可测出AI-HI抗体,4周时达到高峰;抗体水平持续4周后开始下降.肉鸭免疫一次抗体水平差异较大,不能完全预防禽流感的发生.③肉种鸭及蛋种鸭免疫程序及抗体消长规律的测定.结果表明,7～14日龄初免,60日龄二次免疫和120日龄加强免疫(三次免疫),种鸭的AI-HI抗体水平最高分别可达到9log2、11 log2,二次免疫后8个月其AI-HI平均抗体水平为5.6 log2,三次免疫后10个月其AI-HI平均抗体水平为7.6 log2以上.  相似文献   

禽腺病毒4型荧光定量PCR检测方法的建立与初步评估     

王国康  卢琴  贾妙妙  李丽  冯贺龙  邵华斌  罗青平  曾驰  温国元 《中国兽医杂志》2022,(2):22-26

为了对禽腺病毒4型(FAdV-4)引发的鸡心包积水-肝炎综合征的病原学监测和疫情诊断提供技术支撑，本研究经对部分发表在NCBI的禽腺病毒4型序列进行比对，在其六邻体基因上找到一段相对保守序列，并设计出PCR引物和TaqMan探针。以FAdV-4 HB1510株作为标准品，通过反应条件优化，建立了FAdV-4荧光定量PCR检测方法，并对其敏感性、特异性和重复性进行了分析。结果显示，该方法的灵敏度为10 EID₅₀/mL,为常规PCR方法的10倍；组内和组间重复性良好；与鸡减蛋综合征病毒、大肠杆菌等禽类病原的核酸无交叉反应。通过对65份临床样品进行检测，FAdV-4荧光定量PCR和常规PCR的检测符合率为90.7%。因此，FAdV-4荧光定量PCR的快速、敏感、特异等优点使其在禽腺病毒4型的早期检测及预防、控制等方面有较好的应用前景。  相似文献