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奶牛硬脂酰辅酶A去饱和酶基因(SCD)启动子的克隆及活性分析 总被引:1,自引:0,他引:1
硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)是脂肪酸合成过程中的一个主要限速酶,为了研究奶牛脂肪合成的基因调控机制,本研究首先从奶牛组织中克隆得到4个不同长度的SCD基因启动子片段(分别为212、380、416和760bp),采用生物信息学的方法分析了启动子上不同的转录因子结合位点,将克隆片段与pGL3-basic荧光素酶报告基因载体进行KpnⅠ和XhoⅠ双酶切,连接形成重组启动子载体pGL3-SCD1、pGL3-SCD2、pGL3-SCD3和pGL3-SCD4。将载体纯化后,瞬时转染到HepG2细胞,对细胞施加胰岛素(10IU/mL)和亚油酸(120μm)处理,通过双荧光素酶报告基因检测启动子荧光素酶相对活性,结果发现,在SCD启动子序列上存在Sterol-regulated element(SRE)转录因子的结合位点,随着SCD启动子片段长度的延长,启动子活性也显著提高,pGL3-SCD4具有最高的启动子活性。与对照组相比,pGL3-SCD1~4启动子的活性在胰岛素刺激下都显著增强(P<0.05),其中pGL3-SCD4的启动子的相对活性最高,达到了46.93。在亚油酸刺激下,pGL3-SCD1~3的启动子活性没有显著变化,而pGL3-SCD4的活性显著减弱(P<0.05),研究表明pGL3-SCD4启动子上增加的片段(-398~-742)可能对于SCD基因的表达调控具有重要作用。 相似文献
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猪链球菌多价灭活苗研究及免疫效果观察 总被引:6,自引:0,他引:6
选C、D、L、E四群血清菌株为菌种、制备多价链球菌灭活苗,用于发生或发生过链球菌的猪场作预防,通过20多个集约化猪场小区试验,证明该灭活苗安全性好,免疫效果明显。 相似文献
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摘要:猪繁殖与呼吸综合征病毒可以在原代猪肺泡巨噬细胞(PAM)、CL2621细胞系及Marc-145细胞系上生长繁殖,但对于其增殖规律不甚了解。试验利用实时荧光定量PCR技术,研究猪繁殖与呼吸综合征病毒在Marc-145细胞中的增殖规律;结果发现:病毒在接种后12 h开始大量增殖,在18-36 h增殖最为迅速,在36-48 h病毒增殖达到最高峰;研究还发现在18 h 时Marc-145细胞开始释放病毒,48 h达最高峰。该结果为研究猪繁殖与呼吸综合征病毒的致病机理及利用细胞毒生产疫苗提供试验基础。 相似文献
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从发生水肿病的仔猪脏器中分离的细菌,通过茵体形态、革兰氏染色特性、生化特性等一系列的 鉴定,确定为大肠埃希氏茵.动物致病性试验表明,该茵对小鼠有较强的致病性,可引起小鼠死亡.药敏试验证明,该茵对诺氟沙星、环丙沙星、卡那霉素、氯霉素和庆大霉素较敏感. 相似文献
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从发生水肿痛的仔猪脏器中分离的细菌,通过菌体形态、革兰氏染色特性、生化特性等一系列的鉴定,确定为大肠埃希氏菌。动物致病性试验表明,该菌对小鼠有较强的致病性,可引起小鼠死亡。药敏试验证明,该菌对诺氟沙星、环丙沙星、卡那霉素、氯霉素和庆大霉素较敏感。 相似文献
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临床感染猪肠球菌菌株的分离与鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
对分离自河南洛阳、济源、许昌、南阳等地送检病猪内脏的42份革兰阳性球菌分离纯化,根据细菌形态学、培养特性和生长耐性试验结果,初步确定为肠球菌,采用V itek-32全自动细菌鉴定系统对其进行鉴定,共鉴定出了34株肠球菌.其中,粪肠球菌(Enterococcus faecalis)10株、屎肠球菌(E.faecium)2株、铅黄肠球菌(E.casselifla-vus)22株.另有8株未鉴定到种的水平. 相似文献
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从个人特征、葡萄酒认知水平、消费动机、产品特征、参照群体、产品涉入水平、传统文化及生活方式等方面对国内外葡萄酒消费者行为影响因素研究成果进行了梳理,指出了我国学者葡萄酒消费者行为研究的方向。结果表明:我国学者对葡萄酒消费者行为影响因素的研究主要以大学生和青年消费者群体为主,对其他消费群体的研究较少;大多是针对某一城市或地区的研究,缺乏地区之间的比较;描述性研究较多,缺乏多因素模型的系统研究。未来研究中,研究人员可以引入我国传统文化及酒文化作为葡萄酒消费者行为的前置影响因素;可以开展固定样本连续调查研究,以探析我国葡萄酒消费者购买行为的动态变化过程,把握其行为变化的内在规律。 相似文献
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猪源肠球菌两种致病基因和表型的检测 总被引:1,自引:0,他引:1
摘要:目的:调查53株猪源肠球菌2种致病基因和2种表型的分布。方法:应用聚合酶链反应检测53株肠球菌的2种致病基因,用50mL/L兔血平板和30g/L明胶平板检测β溶血和明胶溶解表型。结果:粪肠球菌、屎肠球菌和鸟肠球菌2种致病基因的检出率分别为cylA 94.4%、96.9%、100%; gelE 100%、87.8%、50%;β溶血检出率分别为72.2%、42.4%、0;明胶溶解检出率分别为100%、0、0。结论:细胞溶解素激活基因(cylA)明胶酶基因(gelE)为猪源肠球菌的主要致病基因;粪肠球菌2种致病基因和2种表型的检出率高于屎肠球菌;来源于新鲜猪肉中的粪肠球菌存在较强的毒力,提示注意食品卫生安全;在新鲜猪肉中检测到2株鸟肠球菌,基因型和表型检测说明其存在较弱毒力。 相似文献
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仔猪感染粪肠球菌的病原鉴定及病原特性初报 总被引:3,自引:0,他引:3
旨在对引起河南省三门峡某猪场肥育仔猪发病死亡的病原菌进行鉴定,并对其病原特性进行初步分析。用常规手段分离纯化可疑病原菌,观察其形态染色特性和培养特性,然后利用Vitek-32全自动细菌鉴定系统进行生化特性鉴定,并进一步检测分离菌株的明胶酶和溶血素等毒力因子表型及其药物敏感性。结果表明:①经细菌分离纯化,得到2个呈链状排列的G+球菌分离株,分别命名为HE1和HE2株。②经Vitek-32全自动细菌鉴定系统鉴定,2株分离菌均为粪肠球菌(E. faecalis)。③毒力因子表型试验表明,HE1和HE2均具有溶解明胶的能力,且能裂解兔红细胞,其中HE1呈现β型溶血,HE2呈现α型溶血。④动物试验表明,分离菌株对小鼠具有致死作用,其中HE1毒力更强。家兔对上述分离株具有一定耐受性,仅表现出临床症状但不死亡。⑤药敏结果显示分离菌对万古霉素、替考拉宁、利富平和氨苄西林敏感,对诺氟沙星、红霉素、卡那霉素和四环素耐药。粪肠球菌感染可以导致仔猪发病死亡,但不同的粪肠球菌分离株对动物的致死能力有差异。 相似文献