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选用通过常规生理生化特性鉴定的疑似粪肠球菌菌株3株,采用16S rDNA的通用引物对其可变区基因进行克隆、测序和同源性比对,并用CLUSTAL和MEGA软件分析其遗传距离并构建系统进化树.结果表明,此3株菌株通过同源性比对,与GenBank数据库中粪肠球菌的同源性均大于99.8%,经遗传距离分析和系统进化树的构建均表明为粪肠球菌.肠球菌属细菌有40个种,各种之间的生化生理特性差别甚微,在无法通过生化生理特性准确鉴定到种的情况下,用粪肠球菌的16S rDNA全序列的测定及系统进化树的分析是鉴定该菌的一个科学可靠的方法. 相似文献
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绵羊刚果嗜皮菌的分离鉴定及某些生物学特性研究 总被引:1,自引:0,他引:1
从疑似嗜皮菌感染绵羊的皮肤疙瘩病料中分离到1株细菌,通过对其形态、培养特性、生长特征、生理生化特性、16S rRNA基因序列测定与同源性分析等研究,证明分离株为刚果嗜皮菌。人工感染羔羊表现出与自然发病绵羊相同的症状并死亡,从人工感染死亡绵羊皮肤中再次获得同种细菌。药敏试验结果表明:该菌对林可霉素、卡那霉素、氧氟沙星、复方磺胺、土霉素、氟苯尼考高度敏感。 相似文献
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为了克隆从患肺炎犊牛和健康犊牛上分离的多杀性巴氏杆菌血红素结合受体(heme acquisition system receptor,HasR)基因并进行序列分析,分别以致犊牛肺炎和健康犊牛携带的多杀性巴氏杆菌DNA为模板,通过PCR反应扩增出血红素结合受体基因的全部序列,PCR产物纯化后克隆到pMD19-T载体上,经菌液PCR和酶切鉴定后进行序列测定。各菌株HasR基因序列比对结果发现,Pm-BS-a、Pm142-x-4、Pm142-x-3、Pm149-x、Pm-BS-d的序列之间亲源关系较近,而Pm149-xby与参考菌株Pm70的同源性较高。健康牛源的多杀性巴氏杆菌与致犊牛肺炎多杀性巴氏杆菌之间HasR基因的同源性非常高,说明致犊牛肺炎多杀性巴氏杆菌是一种条件性致病菌,其引起的犊牛肺炎可能属内源性感染。 相似文献
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犊牛肺炎多杀性巴氏杆菌的分离与鉴定 总被引:3,自引:0,他引:3
新疆石河子6个规模化奶牛场相继出现出生1~9周龄的犊牛发生体温升高、呼吸困难以肺部感染为主,部分犊牛发生腹泻的疾病,造成90余头犊牛因肺炎死亡.从其中2个发病牛场死亡犊牛采集痛料,经涂片镜检、细菌分离培养、生化鉴定及动物试验,初步鉴定为多杀性巴氏杆菌,分别命名为Pm142-x-3、Pm142-x-4、Pm149-xby、Pm149-x,参考多杀性巴氏杆菌种特异性基因kmtl和荚膜血清型特异性基因hyaD-hyaC、bcbD、dcbF、ecbJ和fcbD序列,合成引物,进行PCR扩增.选取Pm149-x-3的目标PCR产物进行序列测定并分析比较,结果表明,Pm149-x-3的kmtl基因片段全长为460 bp,与GenBank中各血清型kmtl基因核苷酸同源性为99.4%;荚膜血清型A菌株特异性基因核苷酸同源性为97%;而扩增其他荚膜血清型B、D、E、F的型特异性基因均未获得目的条带.由此确认,分离的4株多杀性巴氏杆菌均为荚膜血清A型.药敏试验表明分离的多杀性巴氏杆菌对氧氟沙星、庆大霉素敏感. 相似文献
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用试纸法快速检测β-半乳糖苷酶活性的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
应用5-溴-4-氯-3-吲哚-β-半乳糖苷(X-gal)试纸建立一种快速检测B-半乳糖苷酶活性的方法.其原理在于酶色原底物X-gal在β-半乳糖苷酶作用下产生蓝色的5-溴-4-氯-3-吲哚.X-gal的价格昂贵,常规法每个平皿的X-gal的用量为3~4mg.该试验以大肠杆菌为阳性对照菌株,无乳链球菌为阴性对照菌株,用试纸法对新疆石河子周边地区牛场分离出的101株链球菌是否产β-半乳糖苷酶进行检测.共筛选出阳性菌21株,检出率为20.79%;阴性菌80株,检出率为79.21%.采用试纸法不仅使X-gal用量大大减少,节省成本,同时操作快速、简便、准确. 相似文献
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为查明猪源粪肠球菌Ⅰ类整合子遗传标记及其相关耐药性,本研究对新疆某集约化猪场环境和粪便中分离的16株粪肠球菌进行磺胺类药物的敏感性测定和季胺类消毒液抑菌效果观察,同时以PCR法测定分离株中Ⅰ类整合子遗传标记,结果发现16株粪肠球菌中I类整合酶基因阳性率为75%(12/16),qacE△1-sul1基因阳性率为62.5%(10/16),对磺胺嘧啶的耐药率为81.25%(13/16),苯扎溴铵对分离株的抑菌率为31.25%(5/16)。表明分离株中I类整合酶基因和qacE△1-sul1基因携带率高;鉴于整合子对耐药基因水平传播的可能性,磺胺类药物作为预防猪场细菌性疾病的感染以及季胺类(苯扎溴铵)消毒剂作为猪场常规消毒剂需要科学的验证方可使用;同时警示应加强动物性食品源性细菌耐药性的监测,以阻断耐药基因给人的传播。 相似文献