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采用Percoll密度离心等技术,对异育银鲫的头肾巨噬细胞和外周血白细胞进行离体培养,经人工合成的CpG-DNA序列作用后,测定其对头肾巨噬细胞的氧、氮呼吸爆发活性和对外周血白细胞增殖的影响,从CpG-DNA核心CG两端的侧翼序列(种属）、核心CG的数量和位置等方面观察CpG-DNA基序对异育银鲫免疫细胞活性的影响。结果表明：1670较1826和2006具有更显著的增强巨噬细胞的氧呼吸爆发活性和白细胞的增殖作用(P＜0.05); 1670-N与同浓度1670比较具有更强的提高白细胞的增殖能力;1670-D比同浓度的1670更能显著地促进白细胞增殖和巨噬细胞的氮呼吸爆发活性(P＜0.05）;1670-R对巨噬细胞氧、氮爆发活性及外周血白细胞的增殖无显著促进作用。结果证明了CpG-DNA可以通过促进巨噬细胞的氮氧爆发活性和增强外周血白细胞的增殖来提高机体的非特异性免疫功能,同时这种作用受到核心CG两端的侧翼序列、核心序列的位置数量及核心CG顺序的影响。 相似文献
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半微量全血培养法制备罗非鱼染色体标本的条件探索 总被引：7，自引：0，他引：7
鱼类染色体的制作方法最常用的是PHA体内培养肾细胞制片法，对野外没有良好设备的情况，此法尤为适用，但这种方法要求剖杀鱼，不利于鱼种的保存，尤其是对稀有鱼类和种鱼不太合适。因此建立一种一般实验室能够开展的方便稳定的染色体制片方法势在必行。大量研究证实采用鱼类外周血淋巴细胞培养制备染色体的方法能有效地解决这些问题 。本研究以罗非鱼为材料，对鱼类外周血淋巴细胞培养条件进行了探索，初步建立了能够制备优质染色体制片的方法，为进一步研究染色体的结构、基因定位、荧光原位杂交等奠定了基础。 相似文献
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以肝(细胞)损伤为主要特征的鱼类肝胆综合症是水产养殖中日趋严重的病害之一,目前还没有有效的防治措施.本研究拟以叔丁基氢过氧化物(t-BHP)构建建鲤(Cyprinus carpio var.jian)原代肝细胞损伤模型,并利用该模型评价甘草(Glycyrrhiza glabra)提取物对t-BHP诱导的鱼类急性肝细胞损伤的保护作用.1 mmol/L的t-BHP与原代肝细胞共培养2h能显著提高肝细胞培养上清中谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛(MDA)水平,显著降低谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)的含量以及肝细胞增殖活性.在t-BHP诱导肝细胞损伤前(前处理)、损伤后(后处理)、损伤前和损伤后(前后处理)将不同浓度(0.1、0.2和0.4 mg/mL)的甘草提取物加入肝细胞培养液中,与肝细胞共培养2h,结果显示,前后处理时,不同浓度(0.1、0.2和0.4 mg/mL)的甘草提取物均能显著抑制t-BHP诱导的GOT、GPT、LDH和MDA水平的升高,恢复GSH-Px和SOD水平;前处理时,高浓度(0.4 mg/mL)的甘草提取物对抑制GOT、GPT、LDH和MDA水平的升高,恢复GSH-Px水平有显著效果;后处理时,只有高浓度(0.4 mg/mL)的甘草提取物能有效提高GSH-Px活性;中浓度和高浓度(0.2和0.4mg/mL)的甘草提取物在前处理、后处理及前后处理时均能显著提高肝细胞的增殖活力.研究的结果表明,中药与损伤剂的给予顺序影响着甘草提取物对肝细胞的保护作用,前后处理时甘草提取物对损伤肝细胞的保护效果明显优于前处理和后处理.研究证实了甘草提取物对t-BHP诱导的鱼类肝细胞损伤具有保护作用,对应用甘草提取物作为鱼类肝胆综合症的防治药物还需要进一步的在体研究. 相似文献
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以环磷酰胺(CTX)为诱导物，建立罗非鱼体内外急性肝损伤模型。体外，0、5、10、15、20和25 mmol·L-1 CTX 分别作用于离体培养的罗非鱼精密肝切片（PCLS）6 h 后，测定切片培养上清中谷丙转氨酶（GPT）、谷草转氨酶（GOT）和乳酸脱氢酶（LDH）水平，同时收集肝切片，用噻唑蓝（MTT）法检测肝切片增殖活性，测定切片内总抗氧化能力（T-AOC）、丙二醛（MDA）、过氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽（GSH）水平。体内，采用胸腔注射法造模，每千克鱼体重分别注射0、10、25、75和100 mg环磷酰胺（下文以mg·kg-1表示），每隔3 d给药1次，连续3次。末次给药后第4天取血，测定罗非鱼血清中GPT、 GOT 和LDH及肝组织匀浆中T-AOC 、MDA、SOD和GSH水平。结果显示： 20～25 mmol·L-1 CTX作用体外培养精密肝切片6 h及75～100 mg·kg-1 CTX胸腔注射罗非鱼后，均可以导致GPT、GOT和 LDH 活力显著升高；T-AOC、SOD活力及GSH含量显著下降，MDA含量显著提高。同时，20 和25 mmol·L-1 CTX能导致肝切片增殖活性显著下降，分别为空白对照组的67.29%和55.41%，且有剂量依赖性。结果表明：CTX可引起罗非鱼肝损伤；分别采用20 mmol·L-1 CTX 作用体外培养PCLS 6 h或者采用75～100 mg·kg-1 CTX胸腔注射罗非鱼，每隔3 d给药1次，连续3次，均可以构建体内外急性肝损伤模型。 相似文献
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［目的］为高效防治稻田难治杂草,明确82%苄嘧.苯噻酰水分散粒剂应用于水稻移栽田对水稻的安全性以及对一年生杂草的防除效果。［方法］在水稻移栽后10d,水稻缓苗返青后,杂草萌发初期,采用药土法施药,施药后保持水层3～5cm,保持7d。［结果］施用82%苄嘧.苯噻酰水分散粒剂40,50,60,100g/667m2(制剂用量)30 d后,对水稻田稗草、异型莎草、野慈姑、雨久花、泽泻、狼把草等杂草的鲜重防效为90.3%～98.5%,水稻增产58.6%～62.5%。［结论］82%苄嘧.苯噻酰水分散粒剂在推荐使用剂量内对水稻安全,可有效控制水稻田恶性杂草。 相似文献