多重PCR诊断猪细小病毒、伪狂犬病毒和圆环病毒Ⅱ型方法的建立和应用     

刘洋  李俊  时建立  孙文博  徐绍建  吴家强  李坤  于江  王金宝  周顺 《家畜生态学报》2010,31(5)

根据GenBank中已发表的猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒(PRV)和猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)等3种病毒基因序列,对各病毒基因区进行同源性分析,确定PPV VP2、PRV gB、PCV2 ORF1基因的保守区为各病毒的诊断靶序列.在建立各病毒单重PCR技术的基础上,优化多重PCR反应条件,建立了三种病毒的多重PCR技术.用78份临床病料对本研究多重PCR技术和单重PCR技术进行对比验证,结果显示,总符合率为97.4%以上.该方法特异性强、敏感性高,为PPV、PRV和PCV2临床诊断和流行病学调查等研究提供了新手段.  相似文献   

食草动物食物选择机制     

孟玉萍  李坤  张林源  陈颀  陈星 《现代农业科技》2011,(2):335-336

介绍食草动物的食性选择及其指标体系,阐述其食性选择机制研究概况,并就食性选择与食物营养质量评价进行探讨,以促进食草动物食性选择的研究。  相似文献   

凡纳滨对虾对蛋白质和氨基酸营养需求的研究进展     

怀明燕  王晨辉  李坤林 《饲料工业》2010,(Z1)

文章综述国内外有关凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)对蛋白质和必需氨基酸需要的研究进展,并详细分析影响其定量研究结果的主要因素,以期为凡纳滨对虾的生产应用和相关研究提供科学依据.  相似文献   

细胞规模化生产过程中的质量控制     

赵蕾  管宇  梅建国  唐娜  李坤林 《山东畜牧兽医》2010,31(6):78-80

<正>细胞大规模培养在生物制药和疫苗生产领域是一项基础工作,是整个生产工艺过程中的中心环节,具有十分重要的地位。细胞培养基质的优劣直接决定终端产品的质量与疗效,因此严格做好细胞培养过程的质量控制显得尤为  相似文献   

兽用生物制品常用的菌种保存方法探讨     

赵蕾  沈志强  梅建国  李坤林 《畜牧兽医科技信息》2010,(7):8-9

<正>菌种的保存是兽用生物制品生产和研发一项重要的基础工作,每一类型的菌种都具有不同的特性,如果连续不断地培养传代,将花费大量的人力、财力,同时在多种理化和生  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒WF-1株的分离鉴定及NSP2和ORF5基因的变异分析     

李坤  吴家强  张金强  李俊  于江  刘洋  张玉玉  刘少宁  王兆  周顺  王金宝 《西南农业学报》2010,23(4)

从山东某大型猪场患"猪高热病"的病料中分离到1株病毒,该病毒可在Marc-145细胞上增殖,产生细胞病变。经RT-PCR鉴定证明,该病毒为美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),将其命名为WF-1株。用RT-PCR法分别扩增该分离株的NSP2基因和ORF5基因,并进行核苷酸序列测定和分析。结果表明,PRRSV WF-1株的NSP2发生30个氨基酸的不连续缺失,缺失位置与PRRSV参考变异株JXA1相同;ORF5基因与JXA1、CH-1a、VR2332核苷酸同源性分别为98.0%、94.2%、86.4%,氨基酸同源性分别为97.5%、94.0%、87.5%。基因遗传进化树分析结果显示,WF-1株与2006～2008年期间分离的JXA1、SX-1等高致病性变异株的亲缘关系很近,与1996年分离的中等毒力毒株CH-1a亲缘关系较远,与VR2332、CC-1、MLV等弱毒株或疫苗株处于不同的分支。  相似文献   

蓝色贸易壁垒探析     

李世军  李坤刚 《河北农业科学》2010,14(12):84-87,93

近年来贸易自由化程度不断提高,但一些发达国家正力图构筑起一种新型的贸易壁垒———蓝色贸易壁垒。我国作为世界上最大的发展中国家,出口产品以劳动密集型产品为主,劳动力廉价是我国出口产品的比较优势所在,而这正是蓝色贸易壁垒针对的主要对象。在分析我国遭遇蓝色贸易壁垒的现状和必然性的基础上,探讨蓝色贸易壁垒对我国外贸、国际收支平衡以及劳动者3个方面的影响,并从国际和国内2个层面提出应对蓝色贸易壁垒的策略。  相似文献   

连作土灭菌对葡萄生长及根系分泌特性的影响   总被引：6，自引：1，他引：5  

郭修武  李坤  谢洪刚  孙英妮  胡禧熙  张立恒 《果树学报》2010,(1)

为探讨葡萄连作障碍产生的原因,采用盆栽模拟试验,对葡萄连作土壤进行蒸汽灭菌,研究连作土灭菌后葡萄植株生长及根系分泌特性的变化。结果表明,连作土灭菌显著增加了葡萄植株的株高和茎粗,其中以7月份的增加幅度最大,分别比连作土增加了1.51倍和0.14倍,地上和地下鲜质量随着生长期的延长也表现出显著增加的趋势,以9月份的增加幅度最大,分别增加了1.18倍和1.09倍。并且连作土壤灭菌后葡萄叶片SOD酶活性增强,MDA含量降低,根系活力随生长期的延长,表现出先下降再上升的趋势。另外,研究发现连作土壤灭菌后葡萄根系分泌的还原糖及氨基酸总量显著降低,分别比连作土壤降低了72.60%和91.10%;氨基酸的种类及其含量也发生改变,其中Ile、Leu和Tyr3种氨基酸未达到检测水平,其他氨基酸含量降低。可见,对连作土壤进行有效的灭菌后,可以改变根际微生态的核心因素即根系分泌物的成分及含量,促进植株的生长,减轻葡萄的连作障碍,进而证实了土壤生物因素是葡萄连作障碍产生的重要原因之一。  相似文献   

与大白菜干烧边性状相关的SSR和SRAP标记分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

李坤  史庆馨  张耀伟 《中国瓜菜》2010,23(4):6-11

以大白菜感干烧边品种A67和抗干烧边品种A53配制的141个F2代单株组成的群体为材料,双亲DNA构建大白菜感病池和抗病池,对104对SSR引物和320对SRAP引物进行筛选,并对与干烧边性状相关的QTL和对应的连锁关系进行了初步分析,获得2个与大白菜干烧边性状相关的QTL,同时获得3个与这2个QTL连锁的标记,其中A29-890和E6-400标记与其最近QTL位点的连锁距离分别为1.5cM和7.1cM。为大白菜抗干烧边性状的分子辅助育种奠定了基础。  相似文献   

葡萄根系分泌物的化感效应及化感物质的分离鉴定   总被引：2，自引：1，他引：1  

郭修武  李坤  孙英妮  张立恒  胡禧熙  谢洪刚 《园艺学报》2010,37(6):861-868

采用室内组培苗（‘晚红’葡萄,Vitis vinifera L.‘Red Globe’）和室外盆栽苗（‘贝达’葡萄, V. riparia × V. labrusca‘Beta’）,研究了葡萄根系分泌物的化感效应,并利用LC-MS技术对根系分泌物中的化感物质进行了分离鉴定。室内试验表明：0.01、0.10、0.50 g ∙ mL-1（根系干质量/培养基体积）浓度的根系分泌物显著抑制葡萄组培苗的生长,浓度越高抑制作用越强。盆栽试验显示葡萄根系分泌物在低浓度的情况下促进植株生长,叶片可溶性糖、淀粉及蛋白质含量增加,苯丙氨酸解氨酸（PAL）和超氧化物歧化酶（SOD）活性与对照差异不显著,丙二醛（MDA）含量减少;而在高浓度的情况下植株生长抑制显著,PAL和SOD活性被激活,分别比对照提高了69.16%和10.35%,MDA含量增加。LC-MS检测结果确定葡萄根系分泌物中含有对羟基苯甲酸和水杨酸两种酚酸类物质,推断含有软脂酸、1–二十一醇、柠檬酸、乌头酸、β–谷甾醇、邻苯二甲酸和没食子酸。采用‘山河二号’葡萄（V. amurensis × V. riparia ‘Shanhe 2’）组培苗检测证明对羟基苯甲酸和水杨酸对葡萄具有显著的化感抑制作用。  相似文献