冰糖橙成年态节间茎段遗传转化体系的建立     

杨莉  张家银  谢玉明  杨迎花  李琳洁  覃磊  邓子牛 《经济林研究》2009,27(3):42-46

以柑橘成年态材料作为外植体进行遗传转化试验对遗传改良性状的早期评估是非常有利的,尤其是无核的品种如冰糖橙。本试验旨在建立一套冰糖橙成年态节间茎段再生及遗传转化体系,材料取自温室中嫁接于枳上的成年态植株。结果表明：新改良消毒处理可将外植体死亡率从27.2%降低为0,成活率从60%升高到80%左右;当采用MS＋2ip 2 mg.L-1＋2,4-D 2 mg.L-1共培培养基及MS＋6-BA 3 mg.L-1再生培养基进行不定芽的诱导时,不定芽再生率最高为47.89%,在进行转化试验时,再生培养基需加入30 mg.L-1卡拉霉素和500 mg.L-1头孢霉素;采用3种方法将不定芽嫁接到14 d枳橙砧木上,其中微型嫁接中＂改进的‘⊥’压法＂可使嫁接成活率达到90%;通过上述方法,本试验将chit42基因转入冰糖橙中,并通过PCR检测,表明目的基因的成功导入,其转化率达到了7.6%。  相似文献   

湖南省部分柚及近缘种遗传多态性的SRAP分析     

杨迎花  李先信  曾柏全  邓子牛  邹学校 《经济林研究》2009,27(4):61-64

采用新型分子标记SRAP技术对湖南省32份柚类及近缘种进行遗传多态性分析.筛选110对引物,选取稳定的12对引物扩增基因组DNA,各引物组合产生10～23条扩增带,共获得172条带,其中150条为多态性条带,每对引物平均提供12.5个标记信息.由UPGMA方法得到的聚类分析结果表明SRAP标记是一种能够较好的区分柚类种质的分子标记.  相似文献   

抗PthA-NLS多肽单克隆抗体的制备及单链抗体基因的构建   总被引：1，自引：0，他引：1  

胡春华  龙桂友  戴素明  马先锋  谢玉明  李娜  邓子牛 《中国农业科学》2009,42(3):884-890

 【目的】制备抗PthA-NLS多肽单克隆抗体并构建其单链抗体（single chain variable fragment,ScFv）基因,为从PthA角度进一步研究柑橘溃疡病致病机理创造条件,并为构建单链抗体基因植物表达载体,尝试利用转基因和植物抗体技术创制抗溃疡病柑橘新种质奠定基础。【方法】利用PthA-NLS重组多肽免疫Balb/c小鼠,制备抗PthA-NLS多肽单克隆抗体,从分泌抗PthA-NLS多肽单克隆抗体的杂交瘤细胞中提取总RNA,采用RT-PCR和重叠延伸PCR（splicing by overlap extension PCR,SOE-PCR）法构建其单链抗体基因,并克隆到pGEM-T载体和原核表达载体pET32a(+)中,重组原核表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)后诱导重组蛋白的表达。【结果】获得了3株能稳定分泌抗PthA-NLS多肽的单克隆抗体杂交瘤细胞株1C8H1、2D12B6、3D8A10。成功构建了单链抗体基因ScFv,获得的ScFv基因大小约750 bp,其中重链可变区（VH）基因有360 bp,轻链可变区（VL）基因有342 bp,中间连接肽基因45 bp,经过IPTG诱导ScFv原核表达,获得了大小为44.5 kD的ScFv重组蛋白。【结论】试验获得了3株能稳定分泌抗PthA-NLS多肽的单克隆抗体杂交瘤细胞株,成功构建了ScFv基因,并实现了原核表达,为进一步探索PthA的致病机理和下一步利用抗体技术获得抗溃疡病柑橘种质的研究打下了基础。  相似文献   

柑橘类病毒CVd-Ⅲ的检测及鉴定     

马先锋  李芳  胡春华  韩健  戴素明  曾柏全  邓子牛 《植物病理学报》2009,39(2):207-211

  相似文献   

建立和完善“四个机制”发展农民专业合作组织     

喻雨林  汪学军 《农村经济与科技》2009,(6):48-50

近年来,湖北省孝感市坚持“边发展边规范,在发展中规范、在规范中发展,引导发展、扶持规范”的指导思想,按照农民的合作要求和市场的发展需要,开展多渠道、多区域、多层次的联合与合作,逐步形成了形式多样、层次丰富、内容广泛的农民专业合作组织体系。但是,目前全市合作组织的发展还存在不少困难和问题,要促进农民专业合作组织又好又快发展,必须建立和完善“四个机制”。  相似文献   

家福捕鸟蛛毒腺cDNA文库构建及其毒素-16序列和活性分析     

卓城洁  袁萌  伍文攀  邓娟华  喻振国  向小亮  胡朝暾 《江苏农业学报》2018,(1)

家福捕鸟蛛(Selenocosmia jiafu)是一种生活在广西、云南等地的蜘蛛新种。为了阐明其毒素的分子多样性和筛选河豚毒素不敏感型(Tetrodotoxin-resistant,TTX-R)钠通道抑制剂,利用SMART法构建了毒腺全长cDNA文库,并进行DNA测序和表达序列标签(Expressed sequence tags,ESTs)聚类分析。结果表明家福捕鸟蛛毒腺双链cDNA条带分布在300~3 000 bp。经测序得到752个高质量的EST序列,去冗余后得到257个唯一序列,其中毒素序列438条。家福捕鸟蛛毒素-16(Jiafu toxin-16,JF-16)是从家福捕鸟蛛粗毒中分离得到的1种分子量为3 954.616的哺乳类神经毒素,其全序列为H_2N-ECTKLLGGCTKSSECCPHLGCRRKWPYHCGWDGTF-COOH。研究结果揭示JF-16的全长cDNA为518 bp,编码87个氨基酸。全细胞膜片钳试验结果表明JF-16对大鼠背根神经节(Rat dorsal root ganglion,DRG)细胞TTX-R钠通道具有抑制作用。说明JF-16是一种潜在的具有镇痛活性的蜘蛛毒素。本研究有利于开展家福捕鸟蛛毒腺转录组研究和JF-16潜在镇痛活性分析。  相似文献   

黔西县适宜烤烟品种筛选研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

莫泽君  夏忠文  班国军  喻奇伟  陈雪  赵婷婷  颜梁  吴浪  刘仁祥 《广东农业科学》2018,45(12):13-19

为筛选适宜在黔西县种植的烤烟品种,促进烟叶产业可持续发展,选用近年育成的贵烟201等10个品种,测定其植物学、农艺、经济和品质等性状,采用灰色关联度分析法进行综合分析。结果表明:贵烟201、贵烟202、PVH1452、毕纳1号的株高、节距、茎围适宜,顶叶开片好;贵烟201的经济性状最好,产值达55169.34元/hm~2,其次是贵烟202、毕纳1号和贵烟4号,均显著优于对照品种K326;金海1号、贵烟202、贵烟201的化学成分含量和协调性略优于对照;云烟110、云烟87、金海1号的感官质量优于对照品种。灰色关联度分析结果表明:贵烟201(0.8835)、KRK26(0.8835)和贵烟202(0.8524)的综合表现明显优于对照品种K326(0.7891)和云烟87(0.7621);贵烟4号(0.8068)和毕纳1号(0.8032)的综合表现略优于对照。可见,贵烟201、KRK26、贵烟202适宜在黔西县示范推广,贵烟4号、毕纳1号宜进一步进行较大面积的示范验证。  相似文献   

樟树港辣椒引领乡邻脱贫致富     

喻永华 《湖南农业》2017,(7)

<正>樟树港辣椒以其浓厚的地域特色、悠久的历史传承、丰富的营养物质等品质特征受到人们的青睐。湘阴县镇源农民专业合作社(以下简称合作社)就是樟树港辣椒的一张王牌。合作社地处湘阴县樟树镇文泾村,是一家集蔬菜产供销于一体的新型农民合作组织。目前合作社共有社员105户,采取"合作社+基地+农户+直销"的经营模式,依托传统优势产业,大力推广高效种植技术,为农户,特别是贫困户提供产前、产中、产后的系列服务,有力促进了  相似文献   

湖南蜡蚧长角象发生规律及防治     

梁军生  钟芳竹  张玉荣  喻锦秀  卜军  陈艺  杨茂栋 《湖南林业科技》2017,44(5)

随着虫白蜡放养规模的不断扩大,传统害虫蜡蚧长角象已上升为白蜡虫主要害虫。通过标准地定期随机取样及室内饲养,研究了白蜡虫蜡蚧长角象发生规律。结果表明:蜡蚧长角象在湖南每年发生1代,成虫6月中旬至次年3月上旬,在大叶女贞等寄主植物树皮下休眠长达9个月时间,成虫3月中旬活动产卵,4月上旬幼虫开始孵化取食白蜡虫卵为害,幼虫3龄,幼虫期平均食卵1 458粒/头。该虫在传统白蜡虫产种区比产蜡区及新产区为害严重,平均为害率30%以上,最高达76.85%,湖南芷江作为传统产蜡区,为害率为16.9%。提出了适于生产操作的"虫种粒选"、"网袋放养"、"及时收包"相结合的蜡蚧长角象综合防治方法。  相似文献   

湖南金银花蚜虫种类及三种新烟碱类杀虫剂防治药效试验   总被引：1，自引：0，他引：1  

夏永刚  周刚  喻锦秀  李密  王连湘 《湖南林业科技》2017,44(1)

蚜虫是为害金银花的主要害虫,严重损害金银花的产量和品质。作者采集湖南金银花主产区蚜虫标本,经相关专家鉴定后结合发生情况明确了胡萝卜微管蚜为主要发生种类,蓼叶皱背蚜和中华忍冬圆尾蚜为次要发生种类。为筛选安全高效的金银花蚜虫杀虫剂,选用当前常用的几种新烟碱类杀虫剂作为试验对象,结果表明:10%吡虫啉可湿性粉剂、5%啶虫脒可湿性粉剂、50%烯啶虫胺可湿性粉剂、40%氧化乐果乳油防治效果最高分别达98.94%、98.57%、99.44%、97.02%,三种新烟碱类的杀虫剂是替代氧化乐果防治金银花蚜虫的理想药剂。  相似文献