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为建立一种快速、高通量的多重耐药基因检测方法,利用Luminex液态芯片平台,建立了可同时检测17种耐药基因的液态芯片检测方法。该方法对大肠杆菌常见的七大类抗菌药物所对应的17种耐药基因(blaSHV、blaCMY-1、Aph3-IIa-1、aac(6)-Ib-cr、aadA-1、cmlA-1、gyrA、mcr-1、NDM-1、parC、qnrS-1、sul-1、sul-2、sul-3、tetA、tetB、tetX)进行序列分析,随后依次对其设计多重PCR特异性引物,构建特异的阳性质粒作为阳性参比品进行液态芯片检测条件优化,从而进行多重耐药基因液态芯片检测方法的研发。结果显示:成功构建了17种耐药基因的阳性质粒,并建立了两套体系用于检测17种耐药基因。在特异性试验中,两套体系中的检测信号无干扰,具有较高的特异性数值;敏感性试验中,体系一的单一质粒最低检测量为102~104 copies/μL,混合质粒为103~105 copies/μL;体系二的单一质粒最低检测量为102~105 copies/μL,混合质粒为104~106 copies/μL;有效性试验中,液态芯片法与PCR检测结果的Kappa值多在0.60以上,具有高度一致性。结果表明,本研究建立的2套液态芯片检测体系具有高通量、高灵敏和高特异性的优点,可同时对17种耐药基因进行检测,能够达到快速检测的目的。 相似文献
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以中国中医科学院2007-2009年的164篇中医药博士学位论文的外文引文作为研究对象,采用文献计量学方法对其外文引文的类型、数量、期刊被引年代分布、学科专业分布、语种分布、外文期刊被引频次等指标进行了统计与分析,以此了解中医药科研人员对外文文献需求的特点和规律,为图书馆资源建设和用户服务提供指南和参考。 相似文献
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小麦高产三段栽培管理法是在1984年至1994年之间,由鸣皋元东、自元谢庄;城关瑶孪槐树街、马营;酒后三王和葛寨沙元、平等马回营等六个乡、八个村试验田,小麦亩产450—550公斤的十七块共三百八十亩麦地中总结出来的。经1995、1996两年应用,1995年亩产达596公斤,1996年亩产增至630公斤。 相似文献
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鸡腺胃型传染性支气管炎病毒山东分离株S基因的克隆及序列分析 总被引:1,自引:0,他引:1
为研究3株鸡腺胃型传染性支气管炎病毒(IBV)山东分离株(青岛腺胃株QX株、东营腺胃株DY株、肥城腺胃株FC株)病毒纤突蛋白基因(S基因)的核苷酸特征,与呼吸型M41标准株及肾型IBV进行S基因核苷酸进行同源性比较。采用RT-PCR技术方法,对IBV分离株(QX、DY、FC)及标准毒株M41株S基因进行克隆和序列测定,对其中QX和DY株S基因核苷酸分别用3种方法(Clustal V method、Jotun Hein method和Clustal W method)对获得的基因核苷酸序列进行分析。结果显示,QX株和DY株的S基因核苷酸与标准毒株M41株S基因核苷酸的同源性最高为79.3%和79.2%,最小差异性为24.5%和22.3%。QX株和DY株与肾型IB分离株HD同源性最高为78.4%和78.9%,最小差异性均为22.7%。HD株与M41株的同源性最高达到80.8%。通过对S基因进化关系分析,说明腺胃型IBV山东分离株(QX、DY株)与呼吸型和肾型IBV是引起不同组织嗜性的IBV变异株,与呼吸型IBV和肾型IBV有明显的差异,是在IBV遗传变异进化过程中具有重要地位的进化阶段。 相似文献
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从1999年11月至2002年9月农业部动物检疫所质检中心共进行鸡、猪、鸽、鸵鸟、鹅、牛、鹿、水貂、兔等细菌样品检测123例,其中大肠杆菌111例,猪链球菌4例,猪副伤寒沙门氏菌1例,鸡沙门氏菌2例,鸡葡萄球菌1例,牛乳酸杆菌1例、猪魏氏梭菌1例、羊魏氏梭菌1例、兔巴氏杆菌1例。在大肠杆菌病例中,鸡占87例,猪占13例,鸵鸟4例,鹿2例,兔、鸽、鹅、羊各1例、水貂2例、。根据药敏试验可知,当前对鸡大肠杆菌比较敏感的药物有头孢类抗菌素如先锋Ⅴ号、先锋Ⅵ号、菌必治(头孢三嗪、头孢曲松钠)、先锋必(头… 相似文献
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2003年,OIE提出了动物疫病区域化政策的新理念——生物安全隔离区划(Compartmentalisation),即通过采取生物安全管理控制措施等手段,建设基于企业水平的无疫生物安全隔离区。从2004年起,OIE先后在《陆生动物卫生法典》和《OIE公告》中提出了定义、评价和确认生物安全隔离区的原则、要素和步骤建议,为世界各国开展生物安全隔离区建设评估工作提供了方向性指导。虽然生物安全隔离区划的概念提出时间较短,但作为一种全新的动物疫病区域化管理模式,生物安全隔离区划已经引起了世界范围的广泛关注,美国、泰国等畜牧业发达国家均在积极研究探索生物安全隔离区建设评估的模式。 相似文献