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大麻素Ⅰ型受体(CNR1)是介导内源性大麻素发挥作用的关键分子,在食欲和能量代谢调控中发挥着重要作用.为了更深入研究CNR1的基因功能,本实验旨在构建和筛选有效沉默CNR1基因的干扰表达载体,并筛选出稳定转染干扰质粒的阳性细胞系.设计合成3对CNR1基因的特异性发夹小干扰RNA(siRNA)干扰引物,将其连接入干扰载体pYr-1.1,构建可沉默CNR1基因的siRNA表达载体CNR1-1、CNR1-2和CNR1-3.并采用LipofectamineTM(Lip)2000介导质粒转染L6细胞,绿色荧光蛋白的表达和流式细胞仪监测转染效率,通过实时荧光定量分析siRNA表达载体的干扰效果.并进一步用G418进行了稳定转染细胞筛选.结果显示,CNR1基因的siRNA表达载体构建正确,瞬时转染L6细胞的转染效率分别为10.45％(P＜0.01)、8.57％(P＜0.01)和8.71％(P＜0.01);干扰效率为39％(P＜0.05)、64％(P＜0.01)及68％(P＜0.01).稳定筛选的最佳G418浓度为800 μg/mL,稳定筛选后干扰效率分别为43％(P＜0.05)、78％(P＜0.01)及91％(P＜0.01).干扰效率较高的CNR1-3表达载体和稳定转染CNR1-3的细胞系为构建筛选成功的siRNA表达载体和阳性细胞系.本研究提供了一种有效沉默CNR1基因表达的方法,同时稳定沉默的阳性L6细胞系成功筛选为进一步研究大麻素Ⅰ型受体的基因功能提供了基础资料. 相似文献
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随着全球范围内可持续发展观的确立，土地开发利用中的生态保护问题已经引起了广泛关注，文章以常德市鼎城区为例，通过比较2005年和2013年土地资源利用情况总结出在土地利用过程中产生的生态问题，探索解决办法。 相似文献
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ATGL是一种新发现的甘油三酯分解酶。根据猪ATGL基因全长cDNA序列,设计合成其特异性RNA干扰片段,将其克隆入pSilencer 4.1-CMV neo干扰载体中,构建猪ATGL基因的小干扰RNA（siRNA）真核表达载体,并对其进行PCR、双酶切及测序鉴定。结果表明,成功构建了猪ATGL基因的特异性siRNA表达载体。这为进一步利用RNAi技术研究猪ATGL基因在脂肪代谢中的功能奠定了基础。 相似文献
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基于探索性空间数据分析(ESDA)方法,以新疆84个市县为空间观测单元,利用2009-2015年果蔬产量和保鲜储藏设备量数据,对新疆果蔬生产集聚和产地预冷保鲜现状进行全局和局域时空差异实证分析。结果表明:果蔬生产空间分布具有集聚性,但蔬菜和果用瓜的集聚区有所不同,而产地预冷保鲜未见明显集聚区,且发展水平较低;全局Moran′s I统计分析可以看出,果蔬生产存在显著的空间自相关,而产地预冷保鲜呈随机分布,无明显相关性;通过局域分析空间相关模式及时空演变态势可以看出,蔬菜分布变化较小,果用瓜H-H集聚区有扩大趋势;蔬菜生产集聚在乌昌地区、果用瓜生产集聚在吐哈地区,喀什地区是果蔬生产的双集聚区;最后,该研究为解决生鲜农产品"最先一公里"问题提出了政策建议。 相似文献
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"党的十八大关于‘三农’问题的政策更深入系统了、更实际可行了、更贴近生活了."2012年11月19日上午,从京回家的十八大代表、《重庆日报》首席记者罗成友带着这个好消息来到了璧山县福禄滇划船湾大院,深入浅出的为院民们解读了党的十八大报告关于"三农"问题及其他方面的新政策. 相似文献
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金华猪和长白猪背最长肌不同肌纤维类型表达差异 总被引：1，自引：0，他引：1
为揭示国内外猪种肌纤维组成差异及其对肉质的影响,本实验以肉质优良的地方品种金华猪和肉质欠佳的外来良种长白猪为研究对象,在比较了180 d两猪种胴体性能及肉质差异的基础上,利用荧光定量PCR方法探讨了两猪种背最长肌4种肌球蛋白重链(MyHC)亚型基因(Ⅰ、ⅡA、ⅡX、ⅡB)mR NA表达量在30、90、150、180 d的差异。结果表明:180 d金华猪活体重、瘦肉率、眼肌面积、滴水损失极显著低于长白猪(P<0.01);背膘厚、肌内脂肪含量极显著高于长白猪(P<0.01)。金华猪背最长肌中含有更多的氧化型肌纤维,特别是Ⅰ型肌纤维,酵解型肌纤维特别是ⅡB型肌纤维含量极显著地低于长白猪(P<0.01)。本研究初步揭示了两猪种在生长发育过程中肌纤维组成的品种差异,为进一步通过营养调控肌纤维类型及组成,进而改善肉质提供基础数据。 相似文献
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厕所革命是推进农村人居环境改善,实施乡村振兴战略,促进农村全面发展的重要抓手。自2015年推行厕所革命以来,各地区已经取得了显著的成效,但仍然存在着改革阻力大、机制落后等瓶颈性问题。为了更加深入地了解重庆农村厕所革命的发展现状,通过多次实地调研,对其推进状况和成效进行了初步探析。据此,文章针对各地环境异质性和资源禀赋的差异,提出采用生态无水式马桶、微水式厕所以及节水式厕所等方法来充分发挥厕所革命的效益,切实提高当地人民群众的生活水平。最后提出了具备落地可行性且实施性强的长效机制,以更好地推动当地农村厕所革命的可持续发展。 相似文献
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为培养适应新疆特色农产品发展需要的高素质技术技能型物流人才。基于PEST宏观环境分析模型,对新疆农业类职业院校农产品物流专业的建设进行定位;针对新疆特殊的人文经济环境,分析现行"工学结合"培养模式所存在的不足,以及职业学校教育与职业培训融通的必要性;提出以融合职业培训的农产品物流核心技能开发为目标,探索其培养路径、实施保障及融通机制。 相似文献
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