过表达ZmIBH1-1提高玉米苗期抗旱性     

朱芳芳  董亚辉  任真真  王志勇  苏慧慧  库丽霞  陈彦惠 《中国农业科学》2021,54(21):4500-4513

【目的】干旱是严重影响玉米生长发育进程的一个重要因素。挖掘玉米抗旱相关基因,通过转基因功能验证和转录组分析,解析关键基因在响应干旱胁迫过程中的分子调控机制,为抗旱分子育种和遗传改良提供理论依据。【方法】以玉米自交系B104（WT）为背景材料,利用农杆菌介导方法构建过表达ZmIBH1-1转基因株系（ZmIBH1-1-OE）;通过对转基因植株进行草铵膦抗性筛选、标记基因和目的基因PCR检测,以及运用实时荧光定量PCR检测目的基因的表达情况,鉴定阳性植株和株系;以WT和ZmIBH1-1-OE转基因株系为材料,通过干旱处理（20% PEG6000）,进行表型鉴定和耐旱生理生化指标测定,验证ZmIBH1-1的抗旱功能;通过对干旱胁迫下玉米4叶期转录组的比较分析,鉴定出差异表达的基因（differentially expressed genes,DEGs）;结合DAP-seq（DNA affinity purification sequencing）分析,初步确定ZmIBH1-1蛋白直接调控与抗旱相关的下游靶基因,利用基因组可视化软件IGV（integrative genomics viewer）分析ZmIBH1-1蛋白结合候选靶基因的位置,然后通过Dual-Luciferase试验验证ZmIBH1-1蛋白与靶基因的调控关系。【结果】通过玉米遗传转化获得12个转化事件;T₃代中,能同时检测到标记基因Bar和目的基因ZmIBH1-1的植株有458个,实时荧光定量PCR检测结果表明,ZmIBH1-1-OE中ZmIBH1-1的表达量显著高于WT,株系3和株系8表达量最高,将其自交获得T₄代转基因株系用于后续试验。在干旱胁迫条件下,ZmIBH1-1-OE株系存活率、叶片相对含水量、叶绿素含量、可溶性蛋白含量及其生理生化指标（超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶活性）均显著高于WT,说明玉米中过量表达ZmIBH1-1赋予玉米更高的耐旱性。转录组分析结果表明,WT与ZmIBH1-1-OE株系在干旱胁迫下有1 214个差异表达基因;Gene Ontology（GO）功能富集分析结果表明,差异表达基因主要涉及生物过程、细胞组分和分子功能,如在生物过程中主要涉及到光合作用、应激响应、脱水响应等;KEGG富集分析表明,差异表达基因主要参与植物激素信号传导、新陈代谢等过程。结合转录组显著差异表达基因和DAP-Seq分析所得到ZmIBH1-1蛋白的靶基因,初步确定ZmIBH1-1蛋白直接调控与抗旱相关的11个候选靶基因,包括2个钙信号相关基因、3个半胱氨酸代谢相关基因、1个bHLH转录因子、1个应激响应蛋白、1个谷胱甘肽转移酶、1个氧化还原过程蛋白和2个乙烯响应因子;基因组可视化结果显示ZmIBH1-1蛋白可以结合靶基因启动子区;随后通过Dual-Luciferase试验进一步表明,ZmIBH1-1蛋白可以直接作用于11个候选靶基因,其中,ZmIBH1-1蛋白可以促进ZmCa-M、ZmSYCO、ZmbHLH54、ZmGlu-r1、ZmCLPB3和ZmP450-99A2的表达,抑制ZmAGD12、ZmCYS、ZmCYSB、ZmERF-107和ZmEIN3的表达。此外,在干旱胁迫下NAC、WRKY、MYB等转录因子在ZmIBH1-1-OE和WT株系中也存在差异表达。【结论】ZmIBH1-1的过表达可以增强玉米苗期的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白通过直接调控乙烯信号通路中的ZmERF-107和ZmEIN3的表达提高玉米的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白通过直接调控钙信号相关基因ZmCa-M和ZmAGD12增强玉米的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白可能通过间接调控NAC、WRKY、MYB等转录因子响应干旱胁迫。  相似文献   

食疗提高免疫力哪些蔬菜更好     

张书芳 《吉林蔬菜》2004,(1)

中华医学会河南内科分会常务委员、呼吸科专家夏熙郑教授指出:防治“非典”最根本的办法是从健胃入手,增强自身免疫力。中国中医研究院资深研究员、享受国务院特殊津贴的老专家陆广莘教授也一再强调,预防“非典”的关键是增强肺功能,提高自身综合免疫能力。由此可见,提高人体免疫力是预防疾病的关键,运动强身是一个重要手段,食疗也是非常安全有效的。中医讲究“五脏皆坚者无病,五脏皆脆者不离于病”。所以平时要注意保养身体,“是药三分毒”,不要盲目服用清热解毒药,以免苦寒损伤脾胃。少食辛辣及肥腻食品,宜多食用清爽且营养丰富的蔬菜,如…  相似文献   

红松与色赤杨混交林改土效果显著     

王玉江  初晓丽 《新农业》2009,(11):47-47

红松阔叶混交林是长白植物区系顶级群落，由于长期受到人为采伐等非自然因素的干扰，现存量极少，代之形成了大面积红松、落叶松纯林和生产力低下的杂木林。红松人工纯林由于树种单一，导致林分的土壤肥力逐年下降。近年来，通过营造阔叶红松混交林、人工诱导阔叶红松林等措施，培育了大面积红松阔叶混交林，其中色赤杨与红松混交林是较为成功的一种混交林分，现将草河口地区红松与色赤杨混交林改土效果总结如下。  相似文献   

拖拉机维护保养及常见故障的排除     

李云霞  张书丽 《农民致富之友》2009,(18)

拖拉机是大家非常熟悉的农用机械,我国也是拖拉机的使用大国.然而近几年来.拖拉机使用故障频繁发生,严重影响了拖拉机的寿命,阻碍了农村经济的发展为使拖拉机经常处于良好的技术状态,必须设法防止和减少故障的发生.除坚持按照使用说明书的规定维护保养外,在农闲时期的保养与维护也是预防拖拉机发生故障的重要措施之一.  相似文献   

商品虾的运输技术     

杨朱森  周丽彬 《农村实用科技》2004,(1):39-39

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长白山区植物区系特点     

杨野  牛丽君 《长白山自然保护》1996,(1):14-17

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早熟特大桃新品种青研桃1号引种栽培     

昌云军  王连起  尹永胜  张书辉  李仁芳 《山西果树》2001,(4):49-50

1996年从青岛农科所引进青研桃 1号 (又称青研 1号 )。在平度栽培表现成熟早 ,果个特大 ,着色容易 ,丰产性好 ,品质优 ,经济效益高。1　试验园基本情况　试验园位于平度南现河畔 ,砂壤土 ,土壤有机质含量 0 .6% ,PH值 6.9。前茬为苹果 ,1996年定植 2 .2 hm2 ,株行距为 4 m× 5 m,授粉品种为春艳 ,自然开心形 ,肥水管理条件较好。2　主要性状　 1果实性状。果实近圆形 ,果顶微凹 ,缝合线浅 ,平均单果重 2 5 0 g,最大 5 5 0 g,果面红色 ,果肉白色 ,风味甜 ,完熟时柔软多汁 ,含可溶性固形物 10 .6% ,粘核。 2生长结果特性。树势强健 ,冠径大 ,…  相似文献   

茚三酮比色法检测饲料中赖氨酸含量的研究   总被引：3，自引：0，他引：3  

张书贤 《四川畜牧兽医》1995,(1):34-35

通过排除氨基酸添加剂中对测定赖氨酸的影响因素，用茚三酮显色，分光光度计检测Ｌｙｓ含量，所检结果与实际值比较，相对偏差符合国标规定，检测范围达０．１－１２％。缺少氨基酸自动分析仪的单位应用此方法，具有费省效宏的意义。  相似文献   

利福平治疗大家畜化脓创的效果     

张书杰  于金玲  李艳芳  杨玉香 《黑龙江畜牧兽医》1994,(11)

利福平治疗大家畜化脓创的效果张书杰，于金玲，李艳芳（辽宁省锦州畜牧医学校·１２１００１）杨玉香（县七里河兽医站）大家行化脓创以往多采用一些药液灌注或“引流”进行治疗，效果不甚理想，且比较麻烦．从１９９３年开始，我们试用和福平进行治疗，取得了良好的效果...  相似文献   

固始鸡腿肌重活体估测方法的研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

邓立新  康相涛  张书松  贺丛  田茵  王彦彬 《河南畜牧兽医(综合版)》2003,24(11):5-6

选择20周龄的固始鸡,测定其活重(x)、腿肌重(y)。经对22只固始鸡活重和腿肌重进行测定、检验,差异极显著(P<0.01)。并建立了直线回归方程y=0.137x-81.6,据此可用固始鸡活重来估测腿肌重。  相似文献