无乳链球菌CAMP因子(cfb)的克隆及原核表达质粒的构建   总被引：1，自引：0，他引：1  

王向柳  王长法  杨少华  杨宏军  阿合买提·买买提  高运东  仲跻峰 《西南农业学报》2008,21(4)

提取无乳链球菌的基因组DNA,PCR扩增CAMP因子基因,重组到PMD18-T载体中。测序结果表明,扩增片断含有768bp的ORF,可编码含256个氨基酸的成熟蛋白,与已报道的无乳链球菌CAMP因子蛋白的氨基酸组成圊源性为98．4％。挑选阳性菌落经PCR鉴定和酶切鉴定后表明成功构建原核表达载体pET32a＋／cfb。这为进一步研究其致病与免疫机理、疫苗设计提供了条件。  相似文献   

牛源无乳链球菌CAMP因子(cfb)的克隆及原核表达     

王向柳  王长法  杨宏军  阿合买提·买买提  高运东  仲跻峰 《新疆农业科学》2009,46(1):54

提取能产生CAMP反应的牛源无乳链球菌山东分离株的基因组DNA,PCR扩增CAMP因子基因,重组到pMD18-T载体中.测序结果表明,扩增片断含有768 bp的ORF,可编码含255个氨基酸的成熟蛋白,与已报道的无乳链球菌CAMP因子蛋白的氨基酸组成相比, 第8位Tyr→Cys,第95位Pro→Ser,第126位Thr→Ala的3个氨基酸发生了点突变,同源性为98.4;.成功构建原核表达载体pET32a+/cfb,SDS-PAGE分析蛋白质表达水平,IPTG诱导后表达的融合蛋白分子量为48 kD,表达量占菌体总蛋白的52.7;.这为进一步研究其致病与免疫机理、疫苗设计提供了条件.  相似文献