幼犬腹泻综合症的防治     

张洪军  臧金运  祝秀梅  陈龙 《吉林畜牧兽医》2007,28(3):58

随着物质文化生活条件的提高，城市居民养犬者越来越多，犬病也不断发生，了解城市宠物犬生活规律及其疾病发生特点，有助于犬病的防治，确保人畜健康，一般来说，犬得病是由于饲养管理方法不当等原因造成的，且往往治疗腹泻的费用占医疗费的50％，因此，有必要格外重视。  相似文献   

一例雏鸡传染性喉气管炎的诊治     

杨云清  赵鸿雁  祝秀梅  石少华 《吉林畜牧兽医》2007,28(8):42-42

鸡传染性喉气管炎是由疱疹病毒引起的鸡的一种急性呼吸道传染病。其特征是呼吸困难、咳嗽和咳出含有血液的渗出物。喉部和气管粘膜肿胀,出血并形成糜烂。本病传播快,死亡率高,主要是侵害于鸡,虽然各种年龄的鸡均可感染,但多以成年鸡为特征,而雏鸡感染本病比较少见。  相似文献   

口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC基因重组杆状病毒的构建与表达     

马江涛  卢曾军  曹轶梅  郭慧琛  郭建宏  祝秀梅  刘在新  杨孝朴 《甘肃农业大学学报》2007,42(4):5-10

通过设计特异引物,扩增获得口蹄疫病毒3ABC编码区的目的基因片段,将其用SalI和NcoI双酶切后,与经同样处理的带有一段信号肽序列的穿梭质粒pMelBac-B连接,经筛选、鉴定及DNA序列分析后,获得重组质粒pMel-3ABC.将重组质粒与线性化的杆状病毒骨架Bac-N-Blue共转染Sf9昆虫细胞,通过噬斑筛选和PCR鉴定,获得了含有目的基因的重组杆状病毒.用重组病毒感染Sf9昆虫细胞,通过间接ELISA方法,检测细胞培养基上清液中表达的口蹄疫病毒抗原.结果表明,口蹄疫病毒基因片段3ABC正确克隆到杆状病毒载体上,重组病毒可在昆虫细胞中表达目的蛋白.  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒GP3/GP5/M真核表达载体的构建及其体液免疫应答   总被引：1，自引：0，他引：1  

王凡  刘建斌  祝秀梅  吕志慧  马全英  杜平  刘学荣  牟克斌 《畜牧兽医学报》2012,43(8):1266-1272

本试验旨在构建表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP3、GP5和M蛋白的真核重组质粒。以PRRSV LN株为模板,采用PCR方法扩增出GP3、GP5、M基因片段,将扩增的GP5、M通过Linker序列串联成GP5-M,然后将GP3与GP5-M双酶切后插入pcDNA3.1(+)构建重组质粒pcDNA3.1-GP3-GP5-M,将其转染COS7细胞。PCR鉴定表明重组质粒pcDNA3.1-GP3-GP5-M含有PRRSV GP3、GP5-M基因,间接免疫荧光检测表明GP3、GP5-M蛋白在COS7细胞内获得表达。Western blotting检测证实GP3、GP5、M蛋白获得正确表达,并且所表达的GP3、GP5、M蛋白是融合蛋白。将pcDNA3.1-GP3-GP5-M免疫BALB/c小鼠,首免后2周可检测到特异性PRRSV中和抗体,首免后8周中和抗体效价最高可达1∶32。进一步将pcDNA3.1-GP3-GP5-M免疫断奶仔猪,首免后4周即可产生1∶4～1∶8的中和抗体。本试验成功构建了表达PRRSV GP3、GP5和M融合蛋白的真核重组质粒pcDNA3.1-GP3-GP5-M,中和抗体检测表明pcDNA3.1-GP3-GP5-M具有良好的免疫原性,从而为PRRSV基因工程疫苗的研制奠定基础。  相似文献   

测定牛奶中铅含量的两种前处理方法比较分析     

祝秀梅  梁斌  张憬  南玉琴  吴志奇  戴海洁 《中国乳业》2018,(7)

牛奶样品经微波消解、压力罐消解两种前处理方法处理后,用石墨炉原子吸收光谱法检测铅含量。结果表明,两种前处理方法的测定结果没有显著性差异,都能较好地满足牛奶中铅含量的检测。但微波消解处理样品过程省时,操作相对简单、安全,重现性好,回收率高,可作为检测牛奶铅含量的首选前处理方法。  相似文献   

猪带绦虫六钩蚴TSOL16基因的表达及免疫原性分析     

马全英  LUO Xue-nong  骆学农  王颖  丁军涛  岳城  景志忠  才学鹏 《中国预防兽医学报》2007,29(12):920-924

本研究采用RT-PCR技术扩增猪带绦虫六钩蚴TSOL16免疫原基因,将扩增产物与pMD18-T载体连接,重组质粒经PCR、酶切鉴定后进行测序;构建TSOL16基因的pGEX-4T-1原核表达载体,用IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE、Western blot分析;将所表达的蛋白免疫小鼠,经ELISA检测血清抗体验证其免疫原性。结果显示:所克隆的TSOL16基因片段长度为559bp,含有1个402bp的开放阅读框架,编码134个氨基酸,与已报道的猪带绦虫六钩蚴TSOL16基因核苷酸序列同源性为99%;表达的融合蛋白大小为40Ku,并能被猪带绦虫六钩蚴阳性血清所识别;免疫小鼠在1周后即检测到血清抗体,第30d即达到较高水平,说明该融合蛋白具有较好的免疫原性。  相似文献   

卵黄抗体在疾病防治中应用的研究进展     

安芳兰  李菁  张荣  武发菊  武永淑  董文教  马全英  王凡  刘学荣 《安徽农业科学》2016,(5):68-71

卵黄抗体是一种多克隆抗体,由禽类经特异性抗原刺激后通过B淋巴细胞产生并运行至卵黄中所形成,具有强大的免疫功能。对卵黄抗体的结构特点、理化性质、作用机理及其在各类动物疾病治疗预防方面的应用进行了综述,并指出了目前存在的问题。  相似文献   

口蹄疫病毒非结构蛋白3AB基因的可溶性表达与反应原性的鉴定     

祝秀梅  卢曾军  胡永浩  曹轶梅  马江涛  刘在新 《农业生物技术学报》2008,16(1):15-19

设计特异性引物扩增得到完整的口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)3AB基因,定向克隆到表达载体pET-30a中,获得了重组质粒pET-3AB,并转化大肠杆菌(Eschenchia coli)BL21(DE3).重组菌分别在37℃和28℃条件下诱导表达,表达产物经SDS-PAGE电泳鉴定,观察到37℃培养条件下目的蛋白形成包涵体,在28℃条件下培养目的蛋白以可溶性的形式表达.Western blot分析表明,表达的目的蛋白能与FMDV感染牛血清发生特异性反应.以纯化的3AB蛋白作为抗原,采用间接ELISA模式检测了部分FMDV感染动物血清和健康动物血清,证明表达蛋白与FMDV感染血清有很好的反应而与健康动物血清无反应.  相似文献   

饲料中动物源性成分检测技术的研究进展   总被引：1，自引：0，他引：1  

戴海洁  唐煜  梁斌  张憬  吴志奇  南玉琴  祝秀梅 《中国饲料》2018,(12)

动物源性成分检测的结果不仅可以预防疯牛病等人畜共患病的传播,同时可用于兽医学的研究。文章对饲料中动物源性成分检测技术类型和研究现状进行分类论述,讨论各种方法的优势与局限性及其发展趋势,以期为动物源性饲料的质量安全监管提供参考。  相似文献   

猪带绦虫未知基因SLC10在毕赤酵母中的表达     

王颖  骆学农  郑亚东  马全英  丁军涛  景志忠  才学鹏 《畜牧兽医学报》2008,39(3):376-379

SLC10是以反式剪切引导序列为基础,通过RT-PCR从猪囊尾蚴中克隆到的一个未知基因。将猪囊尾蚴SLC10基因从重组克隆载体pGEM-SLC10扩增并酶切后,与相应酶切处理的毕赤酵母分泌性表达载体pPIC9K相连接,构建重组表达载体pPIC9K-SLC10,转化大肠杆菌JM109,经PCR、酶切和测序鉴定,基因序列完全正确。纯化的重组质粒pPIC9K—SLC10用内切酶Sac I线性化,电转化毕赤酵母,使重组表达载体与酵母染色体发生同源整合;采用G418抗性梯度法筛选多拷贝重组菌株,用甲醇进行诱导表达;通过SDS-PAGE和Western—blot分析表达产物,结果表明目的蛋白得到了表达,但不具有免疫反应性。  相似文献