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利用改进的锚定PCR方法克隆了团头鲂(Megalobrama amblycephala)促性腺激素Ⅱβ(GtHⅡβ)亚基基因5′端侧翼序列,并在生物信息学方法分析的基础上构建了荧光素酶质粒表达载体。序列分析结果显示:克隆得到的GtHⅡβ亚基基因5′端侧翼序列长度为1354bp,其中包括TATA盒、ERE、ARE、PRE、GRE、LHX3、SF-1、Sp1、Pit-1、NF-Y和AP1等可能对GtHⅡβ亚基基因转录调控起重要作用的功能转录因子结合位点;转录起始位点位于-40～10bp。进一步利用PCR方法扩增得到了811bp(-771～+40bp)、601bp(-561～+40bp)、386bp(-346～+40bp)、239bp(-199～+40bp)和98bp(-58～+40bp)的5个缺失片段,并同全长片段一起分别连接至pGL3-Basic报告基因载体,成功构建了团头鲂GtHⅡβ亚基基因5′端侧翼序列的表达载体,为进一步研究、分析其转录调控机制提供了基础依据。 相似文献
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氨氮对白斑狗鱼成鱼的急性毒性研究 总被引：2，自引：1，他引：1
采用常规生物急性毒性实验法,研究了在pH7．85、水温8℃条件下,氨氮对白斑狗鱼成鱼的急性毒性。结果表明,自斑狗鱼对氨氮的耐受力不强,氨氮对白斑狗鱼成鱼的24、48、72、96h的半数致死浓度分别为45．85、35．26、27．24、24．92mg/L,安全浓度为2．492mg/L;非离子氨对白斑狗鱼的24、48、72、96h的半数致死浓度分别为0．613、0．471、0．364mg/L、0．333mg/L,安全浓度为0．033mg/L。 相似文献
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首先运用PCR-末端加尾法克隆了团头鲂（Megalobrama amblycephala）脑下垂体糖蛋白激素α亚基（Pituitary glycoprotein hormone α subunit,PGPH α）基因5’端侧翼序列;然后利用生物信息学理论对该序列进行了序列分析;最后在序列分析结果的基础上,构建了荧光素酶质粒表达载体。序列分析结果显示,克隆所得到的团头鲂PGPH α亚基基因5’端侧翼序列长1399bp;其序列中包含潜在的TATA盒、GC盒,以及ERE、TRE、CRE、PGBE等对PGPH α亚基基因转录调控起重要作用的转录因子结合位点;启动子区域位于-40-10bp处。利用PCR方法扩增得到了全长1439bp以及1120bp、532bp、173bp均包含转录起始位点下游40bp序列的缺失片段,并将其连接至pGL3-Basic报告基因载体,成功构建了团头鲂PGPH α亚基基因5’端侧翼序列的表达载体,为进一步研究、分析其转录调控机制提供了基础。 相似文献
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饥饿对白斑狗鱼耗氧率、代谢率及主要生化指标的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
在不同温度下[(3±0.5) ℃,(8±0.5) ℃和(13±0.5) ℃)]对白斑狗鱼的呼吸耗氧率、代谢率及主要生化指标(肝糖元,乳酸,酸、碱性磷酸酶)进行120 h的饥饿试验.试验结果表明:在水温为(3±0.5) ℃、(8±0.5) ℃和(13±0.5) ℃下,白斑狗鱼的耗氧率与饥饿时间呈负相关,分别由(0.005 1±0.001 7) mg/(g·h)、(0.016±0.001 9)mg/(g·h)和(0.025±0.005 4) mg/(g·h)下降至(0.001 1±0.000 35)mg/(g·h)、(0.009 8±0.001 2) mg/(g·h)和(0.015±0.003 2) mg/(g·h).代谢率随着饥饿程度的加深而降低,分别由(5.23±0.34) mg O2/(kg·h)、(16.05±23.89) mg O2/(kg·h)和(25.39±37.28) mg O2/(kg·h)下降至(1.08±0.052) mg O2/(kg·h)、(7.48±14.77) mg O2/(kg·h)和(14.99±21.94) mg O2/(kg·h).肝糖元随着饥饿程度的加深而减少,分别由(67.70±6.66) mg/g、(59.69±5.75) mg/g和(41.83±3.72) mg/g减少至(54.14±5.12) mg/g、(38.77±3.38) mg/g和(19.18±1.14) mg/g;肝组织中乳酸含量随饥饿程度的加深而增加,分别从(0.36±0.004) 1 mmol/g prot、(0.25±0.002 9) mmol/g prot和(0.15±0.003 4) mmol/g prot增加至(3.16±0.089) mmol/g prot、(0.87±0.008 4) mmol/g prot和(0.48±0.028) mmol/g prot;随着饥饿时间的推移,肝胰脏中的酸、碱性磷酸酶活力也出现不同程度的增强,在(3±0.5) ℃下,分别增加了217.36 U/g prot和157.85 U/g prot;在(8±0.5) ℃下,分别增加了27.67 U/g prot和34.43 U/g prot;在(13±0.5) ℃下,分别增加了98.62 U/g prot和10.95 U/g prot. 相似文献
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两种“吉富”罗非鱼耗氧率、窒息点的初步研究 总被引：1，自引：0，他引：1
[目的]为两种“吉富”罗非鱼的养殖结构优化及其运输提供理论依据。[方法]在恒温20±0．5℃条件下,用呼吸室法对“JNM”和“GTC”两种吉富罗非鱼的呼吸耗氧率、窒息点进行了试验。[结果]①平均体重为381．90±19．25g的“JNM”昼夜平均耗氧率为O．069±0．022mg/（g·h）;平均体重为302．00±7．76g的“GTC”昼夜平均耗氧率为0．033±0．017mg/（g·h）。②两种试验鱼的耗氧率与饥饿时间呈负相关,代谢率随着饥饿程度的加深而降低。③“JNM”和“GTC”的窒息点分别是：1．54±0．17、1．70±0．23mg/L。[结论]当温度在20±0．5℃时,“GTC”与“TNM”相比,需氧量大．窒息点低。 相似文献
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二氧化碳麻醉对白斑狗鱼的影响 总被引：2，自引：0，他引：2
在不同水温(8℃和13℃)试验条件下,观察了白斑狗鱼经二氧化碳麻醉处理后的麻醉行为,测定了其主要生化指标的变化.试验表明:(1)白斑狗鱼的麻醉行为是一个渐变的过程,可分为不被麻醉(O)、轻度麻醉(A1)、中度麻醉(A2)、深度麻醉(A3、A4).(2)麻醉效果随着水温的升高而增强.从8℃水温到13℃水温时,麻醉用时由17 min 21 s缩短至14 min 15 s,复苏用时由8min 29 s缩短至3min 14 s.(3)在不同温度下经过麻醉处理后,白斑狗鱼的肝糖原减少;乳酸增加,酸、碱磷酸酶的活性都有所增加. 相似文献
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氨氮对白斑狗鱼成鱼的急性毒性研究 总被引：3，自引：0，他引：3
采用常规生物急性毒性实验法,研究了在pH7．85、水温8℃条件下,氨氮对白斑狗鱼成鱼的急性毒性。结果表明,白斑狗鱼对氨氮的耐受力不强,氨氮对白斑狗鱼成鱼的24、48、72、96h的半数致死浓度分别为45．85、35．26、27．24、24．92mg／L,安全浓度为2．492mg／L;非离子氨对白斑狗鱼的24、48、72、96h的半数致死浓度分别为0．613、0．471、0．364ms／L、0．333mg／L,安全浓度为O．033mg／L。 相似文献
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