同位素比率质谱法在农产品产地溯源中的研究进展     

张政权  黄冬梅  孟宪菁  孔聪  黄宣运  申兆栋 《农产品质量与安全》2019,(2):13-19

同位素比率质谱法(IRMS)是根据食品中同位素的自然丰度差异对食品产地进行区分的产地溯源方法。本文介绍了IRMS的原理,总结了IRMS在不同种类农产品的产地溯源方面的研究进展,介绍了各稳定同位素在不同农产品溯源中的优势,并提出了目前这一技术在产地溯源方面的不足,旨在为未来食品溯源研究以及优特农产品的保护工作提供理论基础和方法参考。  相似文献   

草鱼肾细胞中细胞色素P450 3A基因诱导表达及其酶活性分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

符贵红  杨先乐  喻文娟  胡鲲  章海鑫  黄宣运 《中国水产科学》2011,18(4):720-727

采用基因克隆技术获取草鱼(Ctenopharyngodon idellus)细胞色素P450 3A(CYP3A)cDNA序列长1 849 bp,包含完整开放阅读框(open reading frame,ORF)1 542 bp,1个终止密码和含polyA信号3'UTR; ORF编码514个氨基酸,含信号肽(29 aa),2个跨膜螺旋区(23 aa,23 aa),血红素结合域(21 aa)和6个底物识别位点(SRSl-6);与其他脊椎动物CYP3A氨基酸序列相似度达60％ ～ 92％.用实时定量PCR和分光光度计法分别研究了草鱼肾细胞系(Ctenopharyngodon idellus kidney cell line CIK)中利福平(rifampicin,RIF)诱导CYP3A基因表达和红霉素-N-脱甲基酶(ERND)活性,采用红霉素脱甲基酶活性法测定CYP3A的活性.结果显示,诱导组CIK细胞中CYP3A mRNA表达量在8最高,而CYP3A酶活在10h最高;CYP3A mRNA和酶活性与对照组均具显著差异性（P<0.05）.CYP3A转录水平先于相应酶活变化表达,且转录水平表达显著高于酶活性,这很可能反映了RIF对CYP3A的诱导主要作用于转录水平而不直接作用于酶活,本研究旨为药物对CYP3A转录调控和活性调节提供科学依据,并为渔药代谢酶的研究提供理论依据.  相似文献   

基于单克隆抗体的酶联免疫法与高效液相色谱法检测水产品中环丙沙星残留的比较     

胡鲲  黄宣运  姜有声  方伟  朱泽闻  杨先乐 《上海海洋大学学报》2010,(6):805-809

为了快速、灵敏地检测禁用药物环丙沙星在水产品中的残留,建立了基于单克隆抗体的间接竞争酶联免疫法(competitive indirect ELISA,ci-ELISA),并比较了其与高效液相色谱法(High Performance LiquidChromatography,HPLC)在灵敏度、准确性和重现性等方法学参数上的差异。实验结果显示,经过浓缩、净化等前处理过程,ci-ELISA与HPLC的检测灵敏度分别可以达到10μg/kg和1μg/kg,回收率分别为79.28%~92.92%和86.27%~97.32%,相对标准偏差分别在3.21%~8.88%和2.66%~5.52%。前者经济、高效,适合作为初筛方法大批量筛选样品;后者灵敏度、重现性更好,适于在实验室条件下作为验证方法。  相似文献   

胶体金免疫层析法在水产品快速检测中的应用和发展方向     

王媛  于慧娟  钱蓓蕾  蔡友琼  黄宣运 《农业质量标准》2013,(1):41-43

胶体金免疫层析法具有简单快速、敏感特异,无需辅助仪器设备,结果判读容易,稳定性好等特点,该方法已成为现今最快速敏感的免疫学检测方法之一,广泛应用于生物医学等各个领域。本文主要阐述了胶体金免疫层析法的基本原理、技术特点等,并简要介绍了该方法在水产品快速检测中的应用及发展方向。  相似文献   

微生物显色法快速检测水产品中恩诺沙星残留     

胡鲲  李怡  朱泽闻  黄宣运  王民权  方淑蓓  杨先乐 《上海水产大学学报》2009,18(4)

针对水产品中恩诺沙星残留,通过筛选药物敏感菌株和显色剂,建立了一种基于显色反应来判断结果的微生物检测方法.以腾黄八叠球菌(Sarcina ureae)为指示菌株,以氯化三苯四氮唑显色为显色剂,阳性样品呈肉眼可辨的红色,阴性样品呈无色,最低检测限可达50 μg/kg.经酶联免疫法(最低检测限可达12 μg/kg,回收率在74.25%～93.38%之间)和高效液相色谱法(最低检测限可达5.0 μg/kg,回收率在78.20%～91.27%之间)验证,该方法准确、可靠.不同于传统的方法,该方法更为快速、便捷、易于结果判定,是对现有检测方法的一种有益的补充和完善,极其适合在生产、销售、流通等非实验室条件下作为初筛方法使用.  相似文献   

环丙沙星偶联物的制备及其产物的鉴定     

黄宣运  胡鲲  方伟  金怡  杨先乐 《上海海洋大学学报》2008,(5)

采用碳二亚胺法,制备了环丙沙星-小牛血清蛋白偶联物,评价了pH、环丙沙星和碳二亚胺浓度对偶联结合比率的影响。同时采用红外光谱、紫外光谱、聚丙烯酰胺凝胶电泳和质谱方法对偶联产物的基团、分子量等特征进行分析鉴定。正交试验结果表明,pH对环丙沙星-小牛血清蛋白的偶联结合比率具有显著性差异,碳二亚胺和环丙沙星浓度差异性不显著。在pH5．0,碳二亚胺和环丙沙星浓度分别为60mg/mL和5mg／mL的条件下,环丙沙星-小牛血清蛋白偶联结合比率为30：1。该方法条件下的偶联反应成功。结论：该方法可用于环丙沙星-小牛血清蛋白的偶联,且简便易行。  相似文献   

应用改良的碳二亚胺法制备无色孔雀石绿完全抗原及鉴定     

姜有声  安健  杨先乐  胡鲲  陈力  黄宣运 《淡水渔业》2011,(6):25-29

为完善无色孔雀石绿的免疫检测方法,通过改良的碳二亚胺法,改造无色孔雀石绿结构类似物副品红半抗原.经过紫外分光法、十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、质谱法鉴定,偶联反应成功,且偶联比最高达37∶1.以副品红一牛血清白蛋白偶联物为完全抗原免疫Balb/c小鼠,产生针对无色孔雀石绿的多克隆抗体,效价可达...  相似文献   

10种麻痹性贝类毒素的固相萃取及液相色谱 串联质谱测定法   总被引：1，自引：0，他引：1  

于慧娟  蔡友琼  黄宣运 《海洋渔业》2015,37(4):364

建立了10种麻痹性贝类毒素(PSP)的高效液相色谱-串联质谱检测方法。样品用0.5%甲酸溶液加热提取,提取液经乙酸乙酯、三氯甲烷和HLB固相萃取柱净化,乙腈去蛋白后,在正离子模式下以电喷雾串联质谱仪进行测定,TSK改性凝胶柱为色谱分离柱,5 mmol·L-1甲酸铵(含0.5%甲酸)-乙腈(含0.5%甲酸)为流动相,采用基质匹配的标准曲线进行定量,并以虾夷扇贝(Patinopecten yessoensis)和菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)为测试对象,对方法的有效性进行了评价。评价结果为:在50~600μg·kg-1添加水平下,10种麻痹性贝类毒素平均回收率为72.3%~91.1%(批内),相对标准偏差为3.9%~9.5%(批内)。STX、dc STX和neo STX定量限(S/N10)为100μg·kg-1,GTX1~GTX5、dc GTX2和dc GTX3定量限为50.0μg·kg-1。结果表明,该方法快速、准确,适合于贝类产品中麻痹性贝类毒素的测定。  相似文献   

亚甲基蓝多克隆抗体的制备与鉴定     

黄宣运  杨光昕  史永富  黄冬梅  叶洪丽  蔡友琼 《海洋渔业》2021,43(1):104-111

为建立检测水产品中亚甲基蓝及其代谢物残留的酶联免疫吸附检测方法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),以亚甲基蓝代谢物天青C(azure C)为亚甲基蓝的半抗原,采用戊二醛法,将azure C上的氨基与蛋白上的羧基进行偶联,制备免疫原azure C-BSA和包被原azure ...  相似文献   

三氯生和三氯卡班在水产品质量安全领域的研究进展     

王帅  于慧娟  黄宣运  娄晓祎  叶洪丽  杨光昕  史永富 《安徽农业科学》2019,47(8):5-14

三氯生和三氯卡班是个人护理产品和家庭日常用品中使用的高效广谱抗菌剂,鉴于公众对这些化合物的健康风险和环境影响的担忧,美国FDA于2016年已禁止含有该类化合物的非处方抗菌洗护产品进入市场,这些新型污染物不断地释放到水生环境中,具有生物活性和持久性,并通过生物积累对水生生物产生毒性作用,因而引起的水产品质量安全问题开始受到全球范围内的关注。对三氯生、其环境转化产物甲基三氯生以及三氯卡班的环境浓度水平、生物积累和毒性作用机理、生物转化途径以及定性定量检测方法等方面进行了综述,并对三氯生和三氯卡班对水产品质量安全的潜在隐患进行了深入分析。该研究有助于理解三氯生和三氯卡班对水生生物的生物积累和毒性作用,以及对水产品质量安全的潜在隐患,对全面监测水产品质量安全,以及建立水产品中三氯生、甲基三氯生和三氯卡班的检测方法具有重要的科学价值。  相似文献