广西猫杯状病毒全基因组序列测定及其遗传进化分析     

丁仰保  何剑桥  刘林林  余良政  崔柏杨  周华波  韦祖樟  欧阳康  黄伟坚  陈樱 《中国动物传染病学报》2022,(2):67-73

为了掌握广西猫杯状病毒(FCV)的流行情况及其变异规律.本研究于2018年3月至2019年9月采集疑似FCV鼻拭子59份,其中阳性检出率49.2％(29/59).将阳性病料接种CRFK细胞,成功分离获得一株FCV毒株,命名为NN01-19.为深入了解其遗传进化规律和分子特征,本研究通过RT-P C R方法扩增获得该毒株...  相似文献   

四株分离自同一猪场的H3N2亚型猪流感病毒的进化分析     

余良政  丁仰保  何剑桥  刘林林  崔柏杨  韦祖樟  欧阳康  黄伟坚  陈樱 《畜牧兽医学报》2020,51(4):801-809

猪作为流感病毒异源毒株间发生基因重组的"混合容器",其呼吸道上皮细胞上同时存在着能够感染人（SA α-2,6-Gal）和禽（SA α-2,3-Gal）两种流感病毒的受体,具备产生新型流感病毒的潜力。在我们的前期研究中,连续两年（2013年和2014年）从南宁地区某个规模化养猪场当中分离获得了2株新型甲型流感病毒重配的H3N2亚型猪流感病毒（swine influenza viruses,SIVs）。为了解SIVs在同一地方的遗传进化规律,我们在2018年至2019年间对该猪场进行了持续的监测,并于2019年再次成功分离获得了2株H3N2亚型的三源重组毒株,命名为A/swine/Guangxi/JG13/2019（简称JG13/2019）和A/swine/Guangxi/JG20/2019（简称JG20/2019）。遗传进化分析表明其基因重配形式与2013年分离株A/swine/Guangxi/JGB4/2013（简称JGB4/2013）和2014年分离株A/swine/Guangxi/JG1/2014（简称JG1/2014）相同,表面基因HA和NA来源于类人H3N2谱系,内部基因NP、M、PA、PB1和PB2来源于2009年甲型H1N1大流感谱系（pdm/09H1N1）,NS基因来源于古典型H1N1谱系。此外,新分离株JG13/2019和JG20/2019同早期分离株JGB4/2013和JG1/2014 HA和NA基因的核苷酸相似性分别为95.3%~97.4%和93.9%~97.0%,内部基因（NP、M、PA、PB1和PB2）的核苷酸相似性为96.2%~98.1%,NS基因的核苷酸相似性为97.1%~97.6%。通过分析比较这些年代不同毒株之间的关键氨基酸位点差异,结果发现JG20/2019和JG13/2019的HA蛋白仍旧保持了与人型受体结合的分子特征（190D、226I和228S）,却也出现了V223I或P227S的新变化,JG13/2019的PA蛋白（R356K）和PB2蛋白（I588T）也与之前的毒株有所不同。这些位点上的氨基酸改变是否影响到病毒的致病能力、复制能力以及跨种间传播能力,有待今后进一步研究。历经6年,携带有pdm/09 H1N1多种内部基因片段（PB2、PB1、PA、M、NP）和类人表面基因（HA和NA）的H3N2亚型SIVs依旧在同一个猪场的猪群中流行,虽然其关键的功能区域出现了基因突变,但是仍然保持着能够感染人的受体结合特性。因此,加强对SIVs流行情况的监测,将为今后防控人类流感大暴发提供预警。  相似文献   

两株H1N1亚型重组流感病毒的猪致病性研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

何剑桥  何平  赵卫锋  周华波  丁仰保  梁明丽  祝健  李瑞凯  莫彦宁  韦祖樟  欧阳康  黄伟坚  陈樱 《动物医学进展》2019,40(2):45-50

选取2种不同宿主来源的新型甲型重组H1N1亚型流感病毒(犬流感病毒(A/canine/Guangxi/QZ5/2013)(简称CIV-QZ5)和猪流感病毒(A/swine/Guangxi/QZ5/2014)(简称SIV-QZ5),以猪为动物模型,分别以106 PFU/mL病毒剂量和气管攻毒的方式感染3周龄仔猪,从而探究新型甲型重组犬流感病毒对猪的致病性。试验发现CIV-QZ5及SIV-QZ5均能有效感染仔猪,攻毒仔猪均出现发热(≥39.5℃)、流鼻涕、食欲减退、活动减少等流感症状,其中CIV组出现1头仔猪(A3)死亡。通过对肺脏灌洗液进行病毒滴定,发现CIV组在攻毒后3d和5d在肺脏的复制能力较SIV组强,最高达到3.12log10PFU/mL。病理剖检发现,肺脏出现不同程度的实变。肺脏病理切片发现两组均出现不同病变,其中以死亡仔猪(A3)最为明显,主要以支气管上皮细胞坏死脱落,肺泡壁增厚,肺泡腔以及支气管内有大量的弥漫性浸润的单核细胞为主要特征。结果表明,猪源甲型重组CIV不仅能引发猪出现明显流感症状,而且能有效地在肺脏复制,为了解潜在的猪-犬跨宿主传播机制奠定了基础。  相似文献   

犬流感的流行病学研究进展     

石松平  何剑桥  丁仰保  周华波  崔柏杨  刘林林  余良政  陈樱 《中国动物传染病学报》2020,(2):104-109

近年来,不同宿主来源的流感病毒感染犬的病例报道使得犬成为流感病毒生态循环中的重要中间宿主。介于人与犬之间的亲密关系,其公共卫生意义越来越值得人们关注。本文从流感病毒由马—犬、禽—犬、猪—犬和人—犬等跨宿主传播方面阐述不同宿主流感病毒在犬中的流行现状及其重配现象,这对今后全面掌握其流行特征和切断其传播途径具有重要的借鉴和指导意义。  相似文献   

鸡MDA5的序列分析与结构域预测     

庄海彬  李伟强  黄小武  叶芷羽  丘林峰  林宏文  宋亚婷  丁仰保  黄鉴妮  焦培荣 《中国家禽》2023,(6):36-42

为了解鸡黑色素瘤分化相关基因-5(Melanoma differentiation-associated protein 5,MDA5)的序列和结构域，试验使用PCR方法扩增了鸡MDA5基因并构建真核表达质粒，实现了鸡MDA5蛋白的真核表达，同时利用MegAlign等软件对鸡MDA5氨基酸序列进行分析。结果显示：鸡MDA5全长3 006 bp，编码1 001个氨基酸；鸡MDA5与人、猕猴、野猪、小鼠、绿头鸭、灰雁、鸿雁、鲫鱼、草鱼的氨基酸相似性分别为62.4%、62.9%、62.7%、64.1%、86.8%、87.3%、87.4%、48.1%、46.3%；鸡MDA5与鸟类进化关系较近，与哺乳动物次之，与鱼类进化关系较远；鸡MDA5由N端两个半胱天冬酶激活招募结构域、DExD/H box RNA解旋酶结构域和C端结构域组成；鸡MDA5二级结构包含α螺旋（50.95%）、延伸链（11.19%）、β转角（3.9%）和无规则卷曲（33.97%），三级结构与人MDA5类似，在空间上呈现半闭合环状结构。研究成功鉴定了鸡MDA5基因，分析了其基因序列并预测其结构域，为深入研究鸡MDA5结构与功能及其...  相似文献