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1.
提取实验室保存禽副粘病毒-2标准毒株Yucaipa株和3株分离毒株F4、F6、F8株的RNA,经RT—PCR,获得4株毒株的HN基因,同时测得F基因与HN基因之间的序列。序列分析结果表明,HN基因的ORF全长为1743 nt,编码一个由580个氨基酸组成的蛋白。运用DNAMAN软件分析,4株毒株与GenBank上已发表毒株的HN基因的核苷酸和氨基酸之间的同源性相比,同源率分别为99.89%和99.69%。分析F基因与HN基因间序列发现两基因间序列与副粘病毒科其他病毒的基因间序列相似,含有基因起始信号和终止信号,但不含3个碱基的连接序列。通过序列分析,在分子水平上进一步证实分离于同一批进口七彩文鸟的F4、F6株是抗原性存在差异的两个毒株。毒株间的血清学关系与分子水平的核苷酸序列、氨基酸序列的比较关系一致。  相似文献   
2.
为了测定瑞香狼毒超临界CO2萃取物对朱砂叶螨的触杀毒力,并了解其作用机理,笔者采用玻片浸渍法测定瑞香狼毒超临界CO2萃取物(SCE)对朱砂叶螨的触杀毒力,观察其对朱砂叶螨的致毒症状;结果表明:SCE对朱砂叶螨24 h的触杀LC50值为2.411 mg/mL;中毒试螨表现出类似神经毒剂的致毒症状,如兴奋、痉挛等。随后测定了SCE对朱砂叶螨神经系统靶标酶(乙酰胆碱酯酶、单胺氧化酶、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶)活性的影响。结果表明,SCE能够显著抑制试螨乙酰胆碱酯酶、单胺氧化酶、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性;据此推测,SCE对朱砂叶螨可能具有神经毒性。  相似文献   
3.
乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase,AChE)是生物体内保证神经信号正常传递的关键酶,是有机磷和氨基甲酸酯类农药的作用靶标。现研究拟采用发酵罐培养含pET-30a/ace的表达菌株E.coli BL21(DE3),大量表达纯化螨AChE,利用单因素试验和正交试验优化AChE活性的测定条件。结果表明:发酵培养的重组菌株大量表达约为68kD的朱砂叶螨AChE蛋白。底物浓度、温度、pH和酶浓度等各测定因素对朱砂叶螨乙酰胆碱酯酶活性存在显著影响。确定朱砂叶螨乙酰胆碱酯酶活性测定的最佳反应条件为:底物浓度1mmol/L,pH值7,温度35℃,酶浓度0.5mg/mL。通过体外发酵培养纯化获得了大量的朱砂叶螨AChE重组蛋白,确定了螨AChE活性测定的最佳条件,为进一步研究其酶学性质以及AChE抑制剂的体外筛选奠定基础。  相似文献   
4.
乙酰胆碱酯酶(AChE;EC 3.1.1.7)是神经传导中调节神经递质乙酰胆碱水平的一种关键酶,是有机磷和氨基甲酸酯类农药的主要作用靶标。目前关于朱砂叶螨乙酰胆碱酯酶的真核表达还未见报道。本研究拟构建朱砂叶螨AChE的真核表达载体,进行在293T细胞中表达条件摸索。将朱砂叶螨野生型ace完整读框和去掉3’疏水区的ace基因分别插入到真核表达载体pcDNA3.1/V5-His-TOPO中,经PCR和双酶切鉴定及测序验证后,成功构建了真核表达载体pcDNA3.1/ace。采用GFP报告基因确定在293T细胞中表达条件摸索,结果表明293T细胞的最适转染时间为48h和LipofectamineTM2000转染试剂的最适加样量为20μL。本试验成功构建了朱砂叶螨AChE的真核表达载体,确定了在293T细胞中的表达条件,为后续筛选新型选择性AChE抑制剂奠定了基础。  相似文献   
5.
腐植酸叶面肥在叶菜上的应用效果   总被引:2,自引:0,他引:2  
为了筛选新型高效的腐植酸叶面肥,以菠菜和小油菜为试验材料,对9种腐植酸叶面肥的应用效果进行研究。结果表明,腐植酸叶面肥能有效促进菠菜和小油菜的叶面积、地上部分的质量和总质量。A1、A9、A5、A3和A4等5种腐植酸叶面肥对菠菜生长促进作用明显,其中A1的400倍稀释液对促进菠菜的叶面积和地上部分质量效果最显著,分别比对照增加16.33%和34.51%。A9、A3、A8、A5等4种腐植酸叶面肥对小油菜的生长促进作用明显,其中A9的800倍稀释液对小油菜的叶面积、地上部质量和总质量的影响达显著水平,分别比对照增加63.4%、51.3%和52.0%。试验结果还表明腐植酸叶面肥对菠菜和小油菜根重的增加效果不明显。分别对菠菜和小油菜的单株总质量、地上部质量、叶面积和根重等性状进行了相关分析,发现这两种叶菜的单株总质量与叶面积和地上部质量显著相关,叶面积与地上部质量显著相关。试验数据说明腐植酸叶面肥主要促进叶子的生长,通过增加叶面积增加菠菜和小油菜的单株质量和地上部质量。  相似文献   
6.
 为探索瑞香狼毒(Stellera chamaejasme)提取物对草莓灰霉病菌(Botrytis cinerea)的抑菌活性,采用生物活性跟踪法对瑞香狼毒的抑菌活性成分进行初步研究,柱层析法对其甲醇萃取物高活性成分进行分离,经LC-MS和核磁共振仪对最终成分进行结构鉴定,结果表明瑞香狼毒最高活性流份3的主要抑菌活性成分为伞形花内酯,并且随着浓度的提高,该活性成分对草莓灰霉病菌的抑制作用也增强,其抑菌中浓度为1.52 mg·mL-1。通过扫描电镜观察流份3对草莓灰霉病菌超微结构的影响,结果发现伞形花内酯严重破坏了草莓灰霉病菌孢子和菌丝体的形态结构。  相似文献   
7.
为筛选和鉴定草莓根际土壤中对草莓根腐病菌(Colletotrichum gloeosporioides)有拮抗作用的细菌,采用平板对峙培养法,对从北京市昌平区小汤山草莓种植基地土样中分离到的306株菌株进行初筛,复筛后获得了1株拮抗效果好且具有较好稳定性的菌株GF-98,其抑菌带宽度为9.3 mm。此外,菌株GF-98的抑菌谱较广,对草莓根腐尖孢镰刀病菌、草莓灰霉病菌、草莓根腐石楠拟盘多毛孢病菌等9种植物病原真菌均有较好的抑菌效果。在显微镜下观察发现,菌株GF-98的代谢产物对草莓根腐病菌有致畸作用,包括菌丝缩短、粗细不均、分枝增多扭曲、细胞原生质浓缩等现象。16S rDNA基因分析以及生理生化鉴定等方法表明,菌株GF-98为多粘类芽孢杆菌(Peanibacillus ploymyxa)。  相似文献   
8.
烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)是一种对神经递质乙酰胆碱起快速反应的激动剂门控离子通道,也是新烟碱类杀虫剂的作用靶标。此研究利用同源克隆结合RACE技术,从朱砂叶螨敏感品系中克隆了一条nAChR基因,全长为2 023bp,开放阅读框长1 635bp,编码544个氨基酸。预测分子量(Mr)为62.20kDa,等电点(pI)为5.00。根据同源性及系统发育分析,将其命名为Tcα4,提交至NCBI数据库,获得GenBank登陆号为KP694228。Tcα4具有nAChRα亚基典型结构特征:N端胞外结构域和C端跨膜结构域。Tcα4与二斑叶螨nAChRα4亚基基因序列同源性高达98.71%,与二斑叶螨其他nAChR亚基基因同源性仅在20.07%~43.16%之间,与其他昆虫nAChRα4亚基基因同源性在45.96%~56.07%之间。系统发育分析结果表明朱砂叶螨与二斑叶螨和肩突硬蜱nAChRα4亚基基因在同一分支,与其他昆虫nAChRα4亚基基因则较远。朱砂叶螨nAChRα4亚基基因的克隆为朱砂叶螨其他nAChR亚基基因的研究及以nAChR为作用靶标的新型杀螨剂的研究提供了一种新途径,奠定了基础。  相似文献   
9.
[目的]探明朱砂叶螨几丁质脱乙酰基酶家族的功能.[方法]克隆基因TecCDA5a、TecCDA5b、Tec-CDA5c,并运用实时荧光定量PCR技术进行表达特征的分析.[结果]克隆几丁质脱乙酰基酶基因TecCDA5a、TecCDA5b、TecCDA5c (GenBank:MK813905、MN852245.1、MK813906);TecCDA5的最高表达水平是在成螨期,而最低的表达水平是在幼螨期,呈现先跌后升的趋势;同源性比较和发育树分析证实,TecCDA5属于几丁质脱乙酰基酶Group Ⅳ.[结论]获得朱砂叶螨TecCDA5s,明确了其在螨不同发育时期差异性表达特征,为以CDA为靶标设计新型dsRNA杀螨剂提供依据.  相似文献   
10.
草莓根腐病菌拮抗细菌GF-16的发酵条件研究   总被引:1,自引:1,他引:0       下载免费PDF全文
本试验为了确定草莓根腐病菌拮抗细菌GF-16的最有利的发酵液组成和发酵条件,分别采用了单因素试验和正交试验的方法。结果表明: 发酵液中的C、N 源组合,C、N 源及NaCl的含量都对拮抗细菌GF-16的抑菌活性有不同的影响,用1%的葡萄糖、1.5%的黄豆饼粉及0.5%的NaCl配制的发酵液对拮抗细菌GF-16的抑菌效果相对较好。在研究的几个发酵条件中,拮抗细菌GF-16的最适条件为发酵时间36h,pH7,接种量4%,500mL摇瓶装液量110mL,180r/min,28oC恒温培养。  相似文献   
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