肉牛球虫病的临床诊疗研究     

刘俊伟  范国英  安志兴  陈俊杰  赵玉军 《黑龙江畜牧兽医》2011,(16)

牛球虫病主要感染2岁以内的犊牛,严重影响犊牛的生长发育,甚至致其死亡,成年牛多为带虫者。河南省新乡市某肉牛场2个月前从吉林引进杂交肉牛30头,5 d前有1头牛发生不食、粪便带血,按出血性肠炎进行治疗,效果不好,之后又发病4头。经临床检查和实验室检查,确诊为肉牛球虫病,治疗后病情得到控制。1材料与方法1.1材料河南省新乡市某肉牛场6～8月龄的杂交肉牛30头。BK1000光学显微镜,50%甘油水,饱和食盐水。磺胺脒片,甲硝唑注射液等。1.2检查与治疗方法  相似文献   

山羊乳腺上皮细胞的生长特性     

郑月茂  安志兴  彭新荣  张涌 《中国兽医学报》2007,27(3):403-407

用组织块培养法获得山羊乳腺细胞原代培养物。根据山羊乳腺成纤维细胞与上皮细胞对胰蛋白酶的敏感性不同将二者分离纯化，对细胞生长特性进行了光镜观察。结果如下：细胞可形成闭合型细胞群和开放型细胞群。乳腺上皮细胞与成纤维细胞混生时，细胞之间形成许多腔状结构。纯化的乳腺上皮细胞通过单细胞悬浮后传代，部分细胞形成岛屿状聚集，部分细胞以贴壁的自由单个细胞散在形式存在。上皮细胞增殖可形成圆顶型结构，呈乳头状，称之为乳球体；可产生乳腺上皮细胞并分泌乳汁。山羊乳腺上皮细胞含不同的细胞类型．大多数上皮细胞呈短梭形或多角形。细胞之间紧密相靠。互相衔接。连接成片，呈蜂窝状；细胞核呈圆形或椭圆形．核仁2～4枚；部分细胞呈圆饼状，体积较大；出现部分长形细胞；接触抑制的上皮细胞形态不均一。纯化的山羊乳腺上皮细胞传代至第15代时其生长仍正常，经透射电镜观察发现细胞表面微绒毛极为发达，细胞质中线粒体和粗面内质网丰富，细胞质内有大量脂滴及小泡，表明第15代山羊乳腺上皮细胞增殖活力旺盛。染色体数目分析表明．该细胞系稳定，在离体培养条件下细胞不发生转化。山羊乳腺上皮细胞系的细胞染色体数目为60．染色体组型为2n=60。  相似文献   

转EGFP基因山羊克隆胚的发育     

郑月茂  刘凤军  安志兴  李向臣  赵晓娥  权富生  张涌 《畜牧兽医学报》2007,38(5):458-463

利用脂质体包裹含EGFP基因的质粒,并将之导入山羊乳腺上皮细胞,经G418筛选获得阳性细胞,以阳性细胞作为核供体,利用核移植技术构建转基因克隆胚。结果表明：用转基因山羊乳腺上皮细胞作为核供体,电融合法更适合构建转基因克隆胚。转基因山羊克隆胚体外培养最佳方案是用SOFaa培养液,在培养72 h后加入10%的正常山羊血清（Normal goat serum,NGS）。荧光显微镜下观察到转基因克隆胚中EGFP的表达,大部分克隆胚发育到8-16细胞以后的时期,绿色荧光蛋白才开始逐渐表达,随着发育时间的延长,绿色荧光蛋白的表达也逐渐增强。说明外源基因在胚胎早期发育阶段可以表达,EGFP可以作为报告基因来实现对外源基因整合及表达的监测。  相似文献   

由体外受精囊胚获得ICR小鼠ES细胞   总被引：2，自引：0，他引：2  

时伟红  安志兴  董婉维  秦英  王碌增  王太一 《动物医学进展》2002,23(4):97-99

收集鼠卵母细胞和精子，采用体外受精技术，获得早期胚胎。体外培养胚胎至囊胚，分离内细胞团，获得ICR小鼠的ES细胞。结果不但获得了来自体外受精囊胚的ICR小鼠ES细胞，而且表明用体外受精方法获得的小鼠早期胚胎的数量明显大于常规方法，且比较稳定。ICR小鼠ES细胞的获得，为研究小鼠的ES细胞分化提供了条件。  相似文献   

山羊乳腺上皮细胞的培养及EGFP基因转化   总被引：3，自引：0，他引：3  

郑月茂  安志兴  彭新荣  石玉强  张涌 《农业生物技术学报》2005,13(3):322-325,i0002

用组织块培养法获得山羊乳腺细胞原代培养物，并根据山羊乳腺成纤维细胞与上皮细胞对胰蛋白酶的敏感性不同将二者分离纯化。对细胞形态进行光镜观察发现：纯化的山羊乳腺上皮细胞传代至第15代时其生长仍正常。纯化的乳腺上皮细胞增殖可形成圆顶型结构，呈乳头状，称之为乳球体；乳腺上皮细胞可产生并分泌乳汁。山羊乳腺上皮细胞含不同的细胞类型，大多数上皮细胞呈短梭形或多角形，呈蜂窝状；部分细胞呈圆饼状，体积较大；部分细胞呈长形。采用电穿孔法将绿色荧光蛋白（EGFP）基因转化体外培养的山羊乳腺上皮细胞，荧光显微镜下观察到EGFP基因的表达。  相似文献   

羊乳腺上皮细胞的形态观察     

郑月茂  安志兴  刘凤军  张涌 《勤云标准版测试》2005,(7)

用组织块培养法获得山羊乳腺细胞原代培养物,并根据山羊乳腺成纤维细胞与上皮细胞对胰蛋白酶的敏感性不同将二者分离纯化。对细胞形态进行光镜观察发现:纯化的山羊乳腺上皮细胞传代至第15代时其生长仍正常。山羊乳腺上皮细胞含不同的细胞类型,大多数上皮细胞呈短梭形或多角形,呈蜂窝状;部分细胞呈圆饼状,体积较大;部分细胞呈长形。纯化的乳腺上皮细胞增殖可形成圆顶型结构,呈乳头状,称之为乳球体。  相似文献   

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权富生  赵晓娥  安志兴  刘风军  张志平  李裕强  张涌 《勤云标准版测试》2005,(4)

 以小尾寒羊、同羊、内蒙细毛羊作受体，根据季节设计不同的同期发情处理方法，繁殖季节设计三个组，(Ⅰ)栓+PG组，(Ⅱ)栓组，(Ⅲ)PG组。非繁殖季节设计四个组(Ⅰ)栓+PG组，(Ⅱ)栓+PMSG组，(Ⅲ)栓组，(Ⅳ)PG+PMSG组。结果表明：(1)在繁殖季节，同一处理品种间同期发情率及受体利用率之间差异不显著。但非繁殖季节，同羊和内蒙细毛羊同期发情率和受体利用率很低。选用小尾寒羊作受体比较理想。(2)单独使用阴道海绵栓或与其它激素配合诱导母羊发情效果优于用PG组或PG+PMSG组，在非繁殖季节使用孕激素诱导  相似文献   

二甲基苯蒽诱导山羊乳腺上皮细胞体外转化研究          下载免费PDF全文

王莉  安志兴  张涌 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2007,35(4):19-22

分别用5,10和15μg／mL二甲基苯蒽(DMBA)的完全培养液处理体外培养的山羊乳腺上皮细胞36, 24和12 h,再以25 ng／mL佛波酯(TPA)作用2周,研究DMBA和TPA对山羊乳腺上皮细胞的诱导转化作用,确定最佳诱导转化条件,探讨二甲基亚砜(DMSO)对细胞增殖的影响。结果表明,用含15μg／mL DMBA的完全培养液培养12 h,再用TPA连续作用4 d,几乎无山羊乳腺上皮细胞存活,10μg／mL DMBA培养24 h转化效果较差,5μg／mL DMBA培养36 h转化效果最佳;转化的山羊乳腺上皮细胞体积增大、核浓缩、生长排列紊乱、无规则并出现转化灶; DMSO对细胞生长有抑制作用．随培养时间延长抑制作用减弱。试验初步建立了乳腺上皮细胞的体外转化系统。  相似文献   

牛早期胚胎PCR法性别鉴定条件的优化     

赵雪  王保莉  安志兴 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2006,34(9):27-30

对牛早期胚胎性别鉴定PCR反应体系及反应程序进行了优化。结果显示,选用双套引物和连续复合PCR方法,先用雄性特异性引物进行10个循环,然后再加入牛特异性引物进行22个循环,共32个循环,可实现两种基因片段的同时扩增,保证了PCR的准确性。胚胎移植结果显示该方法准确可靠。  相似文献   

奶牛性控胚胎体外生产的影响因素及控制措施     

刘俊平  张志平  安志兴  张涌 《勤云标准版测试》2005,(10)

针对奶牛胚胎体外生产环节,对体外受精和培养等技术进行了研究,旨在建立奶牛性控胚胎体外生产技术体系。结果表明,卵母细胞外周卵丘细胞至少保持3层以上,在成熟基础液中添加10ng/ml的EGF,利于核质成熟;在精子获能液中添加咖啡因降低精子的存活时间;牛胚胎前3d用CR1aa BSA培养,再用SOFaa 5?S培养,获得高的囊胚发育率,并且添加50ng/mlIGF-I后胚胎的发育得到了很大的改善。利用性控精液进行体外受精,受精率有轻微下降,但对生产的胚胎发育质量无明显(P>0.05)影响,胚胎移植后受胎率为40%左右。  相似文献