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鸭坦布苏病毒(DTMUV)为新出现的病毒,主要引起鸭的产蛋量急剧下降.为评价真核表达DTMUV的E蛋白的免疫原性,本研究利用杆状病毒表面展示技术,构建表面展示DTMUV JSXZ株E蛋白的重组杆状病毒(rBV-DTMUV-E),将其感染昆虫细胞,从而将E蛋白展示在杆状病毒的表面,并对表达的重组E蛋白(rE)的免疫原性和保护效果进行研究.经western blot和间接免疫荧光试验证明rE能够在Sf9细胞中有效表达;并且呈可溶性表达.重组蛋白经镍柱纯化,并采用氢氧化铝乳化(0.1 μg/mL),分别以0.2 mL、0.4 mL和0.6 mL的剂量免疫雏鸭,通过ELISA抗体检测结果证明,rE可以诱导产生高水平的IgG血清抗体;MTT试验结果表明,rE能够刺激T淋巴细胞增殖;攻毒保护试验结果显示,其0.2 mL组免疫保护率为80％,0.4 mL和0.6 mL组保护率均为100％,而对照组雏鸭均表现为典型的DTMUV感染症状,其中4只死亡.以上研究结果为DTMUV亚单位疫苗的研究奠定了基础. 相似文献
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