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从基因水平上检测精子中新基因QSA的表达规律及时空分布,并推测其可能的生物学作用.采用RT-PCR和原位杂交法检测QSA在人和小鼠多种组织中的表达.RT-PCR结果显示QSA在小鼠的睾丸、精子和受精卵中特异性表达,而在小鼠卵细胞、囊胚等组织中未检测到该基因的mRNA.原位杂交结果表明QSA在人的部分腺体组织(如:睾丸、... 相似文献
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随着生命科学的快速发展以及多学科交叉融合,高校在科研、教学中使用的动物种类、数量越来越多,在动物实验中出现微生物感染、过敏反应等安全问题也越来越突出,实验动物的安全管理受到各级政府的高度重视。为了解国内高校实验动物的安全管理状况,在查阅资料、与实验动物管理人员座谈的基础上设计调查问卷,对近50所高校的424名师生进行调查并统计分析。调查结果表明,国内高校实验室在实验动物的安全教育、安全管理制度建设、实验室规范化建造、实验动物尸体处置、实验室安全设施维护等方面存在明显不足。因此,高校应该严格落实安全管理责任体系,健全实验动物安全管理制度,加强生物安全教育,规范实验动物的安全管理。 相似文献
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为观察花椒中的提取物GX-50是否对UVB诱导的光老化皮肤细胞具保护作用,使用组织块法分离培养原代人皮肤成纤维细胞,通过观察不同剂量UVB照射后的细胞形态学改变确定后续实验的UVB单次照射剂量;MTT法检测不同浓度GX-50处理后的细胞活性;采用衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)细胞化学染色法确定皮肤细胞衰老程度;测定丙二醛(MDA)和ROS含量评估皮肤细胞氧化损伤的程度;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞TGF-β1表达量的变化;Western blot法检测细胞胶原蛋白表达量的变化。结果显示UVB辐射成纤维细胞后,细胞胞体增大、颗粒增多、部分细胞死亡,在不引起细胞明显死亡的UVB最大剂量50 mJ/cm2作用下,10-6mol/L的GX-50在孵育24h时可显著增加成纤维细胞存活率(125.7%,P0.01);经UVB照射后细胞SA-β-Gal染色阳性率增加,GX-50预处理后辐射组的阳性率明显降低(45.9%,P0.05);UVB组与对照组相比,MDA、ROS含量明显上升,GX-50预处理后辐射组MDA、ROS含量分别下降了22.6%(P0.01),22.8%(P0.05),基本与对照组持平;UVB辐射后TGF-β1分泌减少,GX-50预处理后辐射组则明显上升(14.7%,P0.05);Western blot结果显示,UVB可显著抑制胶原蛋白的表达,而GX-50预处理后表达量则基本恢复。推断GX-50对UVB引起的皮肤成纤维细胞损伤起到了保护作用,其机制可能是清除自由基和抗氧化,同时活化被UVB抑制的TGF-β信号通路,从而增加了胶原蛋白的表达。 相似文献
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为了研究香烟烟雾对雄性小鼠生育能力的影响,将40只C57BL/6J雄性小鼠随机分成烟雾处理组和正常对照组,将2组雄性小鼠分别与未经处理的母鼠一对一交配。统计观察亲本小鼠睾丸组织学改变、精子总数、活动精子比率,以及子代小鼠的平均产仔数、存活率等。结果发现,烟雾处理2周后,子代小鼠的平均产仔数比对照组的低26.03%,仔鼠存活率(吸烟组为87.96%,对照组为93.84%)低6%;精子总数(1.26×105个/mL)和活动精子比率(36%)均分别低于对照组(2.13×105个/mL)和(71%),二者间呈现显著性差异(P<0.001和0.05);组织切片HE染色结果显示:处理组小鼠睾丸组织的正常结构遭到破坏,变得松散,其中的精子数量减少,形态异常。结果表明,香烟烟雾可引起雄性小鼠睾丸组织生精功能障碍,出现精子减少、精子形态异常等病理变化,导致子代出生数和存活率下降。 相似文献
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抗小鼠H-Y抗原IgY抗体的纯化 总被引：1，自引：0，他引：1
用Ni—NTA柱纯化SMCY重组蛋白,将该蛋白作为配基偶联至CNBr活化的Sepharose 4B制成亲和层析柱,分离纯化抗H—Y抗原的特异性IgY抗体。结果表明：Ni—NTA柱纯化后,SMCY重组蛋白纯度可达到80％左右;亲和层析柱纯化可以使IgY抗体的纯度达到97％,经免疫组化检测,该抗体能够结合与雄性小鼠肝脏细胞表面,而不与雌性小鼠肝脏细胞发生结合。证实了经过纯化得到的高纯度IgY抗体具有很好的抗H—Y抗原特异性。通过该方法可纯化分离得到高纯度抗H—Y抗原IgY抗体。 相似文献
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目的:进一步验证成熟精子中是否存在H-Y抗原的mRNA,并探讨精子mRNA的保留机制。方法:采集健康男性志愿者的精液,通过上游法纯化精子,使用多克隆抗H-Y抗原的IgY抗体和FITC标记的兔抗鸡IgG对精子进行免疫组化和流式细胞仪检测,观察成熟Y精子膜表面是否带有H-Y抗原。提取成熟精子总RNA,用RT-PCR的方法观察精子mRNA中是否含有H-Y抗原的mRNA。结果:免疫组化实验显示可在许多精子的头部与尾部的交界处非常清晰地看到H-Y抗原的荧光;流式细胞仪检测显示49.86%精子为H-Y抗原阳性。RT-PCR结果显示,未扩增到H-Y抗原的mRNA特异性条带。结论:成熟精子表面存在有H-Y抗原,但未检测到H-Y抗原的mRNA。 相似文献
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作者前期对氰戊菊酯经Tn细胞代谢后结构变化的研究表明,氰戊菊酯的苯氧基被羟基所取代,α-氰基被氢基取代.为了验证氰戊菊酯经Tn代谢后毒性是否发生了改变,作者利用点滴法测定了氰戊菊酯及其经P450s修饰后的代谢产物对果蝇的毒性作用.结果显示氰戊菊酯对果蝇的半数致死量(LC50)为14.062 μg·mL-1,而最大浓度的代谢产物处理果蝇未见其毒性.研究表明氰戊菊酯在体内经P450s代谢后的产物失去了对昆虫细胞的毒害作用,这一作用也可能是昆虫抗性产生的机制之一. 相似文献
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