鸡李氏杆菌的分离鉴定     

朱洪伟  崔莉  卢杰  孙秀军  曹倩倩  谭磊  刘宇  朱战波 《黑龙江畜牧兽医》2007,(9):69-70

2006年3月份,黑龙江省鸡西市某养鸡场蛋鸡突发传染性疾病并大量死亡。临床表现为不食,下痢,病程长的表现痉挛、斜颈等神经症状。病理变化以心肌、肝脏出现广泛性坏死灶居多,脾肿大且呈斑驳状,有的表现为全身性败血症。病死鸡经细菌分离鉴定确定为产单核细胞李氏杆菌感染,现报道  相似文献   

牛病毒性腹泻病毒鉴定及分型RT-PCR检测方法的建立     

李新培  朱洪伟  周伟光  关平原  程世鹏  温永俊 《动物医学进展》2018,(10)

旨在建立一种特异性检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的RT-PCR方法,并且可以实现在同一体系中对BVDV进行分型。根据GenBank中公布的BVDV基因组序列,针对高度保守的5′UTR区域分别设计鉴定及分型引物,建立牛病毒性腹泻病毒鉴定及分型RT-PCR检测方法。应用鉴定RT-PCR检测方法可从BVDV阳性毒株中扩增出288bp的特异性片段;而分型RT-PCR检测方法可在同一体系中从BVDV1型和2型毒株中扩增出大小分别为316bp和110bp的特异性片段,但对猪瘟病毒、牛副流感3型病毒及牛传染性鼻气管炎病毒等均为阴性,最低可检测出的病毒量分别为1TCID50/mL和10TCID50/mL。临床试验证明,建立的鉴定及分型RT-PCR检测方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,具有很高的实用价值,为进一步开展流行病学调查、病毒分离等提供可靠的技术手段。  相似文献   

溴氰虫酰胺原药的高效液相色谱法研究     

丛云波  石隆平  朱洪伟 《农药科学与管理》2016,(3):52-54

建立一种高效液相色谱测定溴氰虫酰胺含量的分析方法。采用高效液相色谱法,使用ZORBAX SB-C18色谱柱,以甲醇-0.1%磷酸水(体积比55∶45)为流动相,流速为1m L/min,在270nm波长下对溴氰虫酰胺进行定量分析。该方法的线性相关系数为1.000 0,标准偏差为0.062,变异关系数为0.07%,平均回收率为99.80%。方法准确、快速,适用于溴氰虫酰胺的定量分析。  相似文献   

蓝狐肺炎克雷伯氏菌感染病例     

李国军  王德毅  周玉龙  朱洪伟  侯喜林  朴范泽 《中国兽医杂志》2007,43(2):56-57

1发病情况 2005年2月，克山农场场部一养殖户的蓝狐陆续发病并死亡，该养殖户共饲养200多只蓝狐，从2005年2月发病至9月14日送检，共死亡100多只。发病前注射过犬瘟热、犬传染性肝炎和犬细小病毒三联苗；8月中旬注射过犬瘟热、犬传染性肝炎、犬细小病毒病、犬副流感、狂犬病和冠状病毒六联苗。曾用青霉素、庆大霉素等药物治疗，均无明显效果。  相似文献   

断奶仔猪圆环病毒2型与多杀性巴氏杆菌混合感染的诊断     

朱洪伟’张贵山’张艳秋  徐佳萍’章秀婷  邢秀梅’杨福合 《中国兽医杂志》2014,(4):34-36

<正>仔猪断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)主要是由猪圆环病毒2型(PCV2)感染6⁸周龄仔猪所引起的一种以渐进性消瘦、黄疽、间质性肺炎及淋巴系统退化为主要症状的传染病8周龄仔猪所引起的一种以渐进性消瘦、黄疽、间质性肺炎及淋巴系统退化为主要症状的传染病^([1-3])。该病毒主要感染猪的免疫器官,造成免疫系统功能降低,该病发病症状与猪呼吸与繁殖障碍综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)等病毒感染相似,且也易混合感染,此外,PMWS也常引起细菌继发混合  相似文献   

肝特异性表达Cre重组酶转基因猪成纤维细胞的建立     

杨春  朱洪伟  刘宗岳  王桂武  杨福合  邢秀梅 《中国畜牧兽医》2012,39(10):145-149

试验旨在建立肝脏特异性表达Cre重组酶猪成纤维细胞系,为获得肝脏特异性表达Cre重组酶转基因猪奠定基础。通过PCR方法分别从血液和pcDNA3.1(+)载体上扩增肝脏特异性启动子α1-抗胰蛋白酶启动子(PhAAT)和BGHpolyA片段。通过双酶切(XhoⅠ、SalⅠ)从载体pGC-FRT2neo上获得FRT2neo交换盒,再利用重叠PCR方法获得猪源的Cre重组酶基因,最后通过三重融合PCR方法和酶切方法将4个片段连接。利用真核表达载体pC1-neo构建出Cre表达载体pC1-PhAATCreBGHpolyA-FRT2neo。Lipofectamine^TM2000介导转染猪成纤维细胞,通过G418筛选出阳性细胞系,最后通过PCR鉴定证明构建的Cre重组酶表达载体pC1-PhAATCreBGHpolyA-FRT2neo成功整合到细胞的基因组中,获得了肝脏特异性表达Cre重组酶猪成纤维细胞,为最终通过核移植方法获得肝脏特异性表达Cre重组酶转基因猪奠定基础。  相似文献   

3种猪细胞因子mRNA实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用     

王凤雪  黄双  刘莹  杨勇  孙娜  朱洪伟  张淑琴  程世鹏  温永俊 《中国畜牧兽医》2015,42(1):24-31

为建立猪细胞因子SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR检测方法,根据GenBank中3种重要的猪细胞因子即猪白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、α-干扰素(interferon α,IFN-α)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)的基因序列,设计特异引物扩增目的基因.将3种基因克隆至pMD18-T载体上,得到各自阳性克隆质粒,以3种阳性质粒为标准品建立标准曲线并进行熔解曲线分析以及灵敏性、特异性和重复性试验.结果表明,当标准品稀释度为1×10¹~1×10⁶ 拷贝/μL时,3种基因的Ct值与浓度间具有良好的线性关系,相关系数均≥0.992.熔解曲线分析表明,产物为特异性单峰且重复性较好.应用建立的方法对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)TJM-F92株免疫的30日龄猪外周血单核细胞(PBMC)中IL-12、IFN-α和TNF-α表达量进行检测,结果发现,免疫了PRRSV TJM-F92株的猪PBMC细胞内3种细胞因子表达量均极显著升高(P< 0.01).研究结果为IL-12、IFN-α和TNF-α的定量分析提供了技术平台.  相似文献   

环吡氟草酮原药高效液相色谱分析方法研究     

朱洪伟  石隆平  吴培  姜宜飞 《农药科学与管理》2016,(9):36-39

本文采用高效液相色谱法,以乙腈+0.1%磷酸水溶液为流动相,使用以ZORBAX SB-C_(18)为固定相的不锈钢柱和二极管阵列检测器,在263nm波长下对环吡氟草酮原药进行分离和定量分析。结果表明,该分析方法中环吡氟草酮线性相关系数为0.999 7,标准偏差为0.02,变异系数为0.02%,平均回收率为99.96%。  相似文献   

金黄色葡萄球菌GapC基因的克隆和表达   总被引：1，自引：0，他引：1  

张晶  朱洪伟  崔玉东 《黑龙江八一农垦大学学报》2008,20(3)

为研究金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)GapC蛋白,应用PCR方法扩增出S. aureus菌株BMSM855/23-1的gapC基因,随后将其克隆到pMD18-T载体上.重组克隆pMD-T/gapC经测序后,与GenBank上已发表的序列进行对比分析.然后,将gapC基因插入到pQE-30质粒,构建重组质粒pQE30/gapC.重组质粒转化大肠杆菌E.coli M15(pREP4),IPTG诱导后,SDS-PAGE鉴定GapC融合蛋白的表达.结果表明成功扩增并克隆了S.aureus gapC,该菌株的gapC基因与GenBank上S. aureus BM10株的核苷酸序列一致性为99.3%,推导氨基酸序列一致性为99.4%.SDS-PAGE结果表明,GapC蛋白在E. coli M15(pREP4)中获得表达.  相似文献   

狂犬病病毒糖蛋白生物学功能研究进展     

汪孟航  朱洪伟  何民辉  温永俊  程世鹏 《中国畜牧兽医》2016,43(12):3349-3355

狂犬病是由狂犬病病毒（rabies virus,RABV）感染中枢神经系统引起的致死性人畜共患传染病。RABV糖蛋白存在于病毒表面,它既是病毒的主要保护性抗原,诱导体液免疫产生中和抗体和刺激T细胞产生细胞免疫,又是病毒与细胞受体结合的结构,在病毒致病性和嗜神经性中发挥重要作用,与病毒毒力直接相关。作者归纳总结国内外RABV糖蛋白结构与功能研究进展,并对糖蛋白中和抗体的检测与评价进行阐述。将为进一步揭示RABV糖蛋白生物学功能奠定基础,为糖蛋白中和抗体的诊断提供理论参考,为控制和消灭狂犬病做出相应贡献。  相似文献