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为研究锚定蛋白基因(Ankyrin,ANK)对山羊痘病毒的影响,试验采用融合PCR和Overlap PCR技术扩增山羊痘病毒SS株5个ANK基因(ANK010、ANK138、ANK140、ANK141.2和ANK145)两端侧翼序列和绿色荧光蛋白(GFP)基因,并将其产物连接Trans1-T 1载体构建ANK缺失的转移载体,经过菌液PCR以及质粒双酶切鉴定,阳性重组质粒用Lip 2000转染至已经感染羊痘病毒SS株的羊睾丸原代细胞,依报告基因GFP的表达情况在荧光显微镜下筛选目的基因缺失的重组病毒,同时设立不感染病毒的对照。结果表明:通过融合PCR方法成功扩增山羊痘病毒SS株ANK基因010和138的两端侧翼序列及GFP基因片段,大小约1200 bp;通过Overlap PCR方法成功得到ANK基因140、141.2和145基因的侧翼及GFP基因片段,大小约900 bp,与理论相符。研究成功构建了基因缺失转移载体,将其转染感染SS病毒的细胞中,5个ANK基因缺失的表达载体均可见绿色荧光斑点,说明得到各自基因缺失的重组羊痘病毒。 相似文献
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为了研究融合蛋白VP4-STI的免疫效果。将40只小鼠随机分为实验疫苗组(30μg VP4-STI+0.6μg LTB)、铝胶疫苗组[30μg VP4-STI+Al(OH)3胶]、纯化蛋白VP4-STI疫苗组(30μg VP4-STI)和PBS对照组,通过鼻腔滴入进行免疫,测定其抗体水平。用大肠杆菌强毒株C83902进行攻毒试验,观测各免疫组小鼠的保护效果。除PBS对照组外,其余各组均有抗VP4-STI抗体产生,第6周最高,铝胶疫苗组的抗体水平略高于实验疫苗组,纯化蛋白VP4-STI免疫组较低,与实验疫苗组差异极显著(P<0.001)。实验疫苗组和铝胶疫苗组小鼠对大肠杆菌强毒株C83902均有较好的免疫保护效果,与对照PBS组有明显差异。该研究为进一步提高STI的免疫原性提供了依据。 相似文献
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为了与机手交朋友,倾听他们的心声,及时了解广大农机手对农机管理工作所反映的热点、难点、重点问题,掌握最基层的第一手材料,为促进农机工作开展打下基础,2005年,藤县农机化管理中心推行“局长约谈机手日”活动,取得显著成效。局长约谈机手日活动主要做法:一是每月进行1-2次局 相似文献
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用绵羊睾丸细胞培养山羊痘病毒疫苗株G14-STV44-55,提取其基因组为模板,设计TK基因的特异性引物并进行PCR扩增,获得了2405bp的DNA片段,并将PCR产物克隆至pGEM-TEasy载体。酶切鉴定、PCR鉴定和测序结果表明,成功获得了TK基因,获得的TK基因内存在唯一的ACC65I酶切位点和3′末端早期转录终止信号TTTTTN(T)T。核苷酸和氨基酸同源性分析表明,弱毒疫苗株G14-STV44-55TK基因与基因Bank中发表的13个参考毒株的同源性在96%和95%以上,说明羊痘病毒TK基因具有高度的保守性。 相似文献
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今年6月28日,藤县发生建国以来最大一次洪涝灾害,最高水位29．23米,超出水位警戒线10．23米,造成全县经济损失8．8亿元。其中县农机系统损失129万元。灾情发生后,县农机局根据县委、县政府的指示,立即发动、组织农机投入抗洪救灾,一方面将受灾物资转移到安全地点;另一方面组织农机修复农田耕地和抽水、排水工作,发挥农机在抗洪中的作用。全县共组织投入抢险救灾农机有方拖、手拖1567台,机帆船150艘、抽水机585台,推土机（斗车）18台,救灾用油186．7吨,抢运物价4820吨,推土、石方1200方,抽水、排水2．26万亩。藤县农机奋力抗… 相似文献
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李有文 《上海畜牧兽医通讯》2005,(4):58-58
菜籽饼为菜籽榨油后的副产品。菜籽饼内蛋白质的含量约为32％～39％,其蛋白质含量等于高粱和玉米的4～5倍,且富含赖氨酸、蛋氨酸,硒含量是常用植物饲料中的最高者,磷利用率也较高,可作为蛋白质饲料的重要来源。菜籽饼粕在瘤胃中的降解速度低于豆粕,过瘤胃蛋白质较多,且由于瘤胃微生物可以分解部分芥子甙,对牛羊毒性较弱,因此菜籽饼更宜作为牛羊饲料, 相似文献
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为了研究羊痘病毒KLP1的特性及制备其抗体,研究通过PCR扩增了山羊痘病毒毒力因子KLP1的两个结构域KLP1-1、KLP1-2,并构建了重组表达载体pET42b-KLP1-1和pET42b-KLP1-2,将重组载体转化到大肠杆菌BL21中经IPTG诱导表达,表达产物应用SDS-PAGE和Western-blot检测,表达蛋白经镍柱纯化或KCl染色切胶纯化,经弗氏佐剂乳化后免疫家兔,制备的抗体用Western-blot和ELISA检测评价。结果表明:克隆得到的KLP1-1基因的大小为762 bp,表达约为30 ku的蛋白,主要在上清液中表达,镍柱纯化蛋白浓度为3 mg/mL;KLP1-2的基因大小为927 bp,表达约为35 ku的蛋白,以包涵体形式表达在沉淀中,切胶纯化的蛋白浓度在1~2 mg/mL之间。免疫家兔后收集血清,经Western-blot检测可见明显的特异条带,ELISA检测的抗体效价分别为1∶512和1∶256。 相似文献
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长途贩运仔猪暴发猪瘟李有文（新疆塔里木农垦大学动科系８４３３００）１９９７年３月，新疆阿克苏地区温宿县境内暴发了一场仔猪猪瘟，给当地养殖户造成很大经济损失。报告如下：１发病情况３月下旬，气温骤降，温宿县温宿镇某户３３头仔猪有１６头发病，死亡３头。病猪... 相似文献
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用绵羊睾丸细胞培养山羊痘病毒疫苗株G14-STV44-55,提取其基因组为模板,设计还原酶(RR)基因的特异引物进行PCR扩增,并克隆至pGEM-TEasy载体,蓝白斑筛选,酶切和测序签定,并对目的基因进行了序列分析。结果获得了RR基因的阳性克隆PGM-RR,DNA片段长度2 669 bp,内存在BglII等4个单一限制性内切酶酶切位点,编码区5′端含有早期转录终止信号TTTTTN(T)T。RR基因核苷酸和推测的氨基酸同源性与GENEBANK中发表的9个参考毒株的同源性分别在97%和99%以上,说明羊痘病毒RR基因具有高度的保守性。 相似文献