轮状病毒VP4基因的克隆与核苷酸序列分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

王鹏雁  陈创夫  余兴龙  徐兴然  涂长春  张高轩 《猪业科学》2002,19(5):25-28

用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从轮状病毒感染的细胞中扩增了816bp的VP4片段中抗原表位区.通过T4 DNA连接酶将其直接连接于克隆载体质粒pGEM-T上,转化至受体菌DH5α中.提取质粒经PCR扩增、酶切鉴定,证明重组质粒pT-V4中含有轮状病毒的VP4基因片段.经核苷酸序列分析,表明克隆了轮状病毒主要保护性抗原VP4基因中抗原表位区.  相似文献   

仔猪实验性感染新疆猪瘟病毒野毒株的病理学观察     

孟庆玲  田晶华  柳建新  张高轩  陈创夫  高丰 《中国兽医杂志》2002,38(10):10-11

猪瘟 ( Hog cholera,HC)是由猪瘟病毒 ( HCV)引起猪的一种急性、热性、败血性、高度接触性传染病。猪是惟一在自然条件下对 HCV易感的动物 ,该病流行广泛、发病率和病死率高、危害极大 ,因而在国际兽疫局制定的《国际动物卫生法典》中 ,将它列为 A类 1 6种法定传染病之一 ,我国  相似文献   

山羊甲状腺球蛋白的分离,纯化及抗血清制备     

陈创夫 《塔里木大学学报》1989,(2):44-49

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转基因植物生产疫苗的研究现状及前景     

包慧芳  陈创夫  任雪艳  王彦芹 《畜牧兽医科技信息》2005,(1):9-10

随着转基因植物技术的日益成熟，植物体正成为具有重要经济价值的药用蛋白、抗体和疫苗的生物反应器，利用转基因植物生产，这种“分子药厂”的潜势在几年以前就已显露出来，并且已有几种用此系统生产的蛋白质正在进行临床试验。  相似文献   

绵羊肺炎支原体核糖体蛋白30S RPS11基因的克隆、表达及重组蛋白免疫原性研究          下载免费PDF全文

田路路  孟庆玲  乔军  才学鹏  陈创夫 《家畜生态学报》2017,38(5):64-69

本研究以绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,MO)新疆流行株基因组DNA为模板,通过PCR扩增30S RPS11基因,对其进行分子特征性分析,并将其抗原表位集中区进行原核表达,分析重组蛋白免疫原性。结果表明,30S RPS11基因全长405bp,编码134个氨基酸,该蛋白是一种受磷酸化调控的蛋白,含有一个核糖体蛋白S11信号。SDSPAGE结果显示,筛选的抗原表位集中区重组蛋白分子质量为29kDa;Western blot分析显示,该重组蛋白可被MO阳性血清特异性识别,说明其具有良好的反应原性;小鼠免疫试验表明,重组蛋白诱导机体产生的间接血凝抗体效价可达1∶32~1∶64,表明其具有较强的免疫原性。本试验首次证实MO核糖体蛋白(30SRPS11)具有良好的免疫原性和反应原性,为MO血清学诊断及亚单位疫苗研发提供了科学依据。  相似文献   

淋巴细胞活化基因-3蛋白表达与生物信息学分析     

吴鹏  尹欣悦  陈创夫 《黑龙江畜牧兽医》2019,(17)

为了研究淋巴细胞活化基因-3蛋白的生物学特性,试验采用PCR方法扩增淋巴细胞活化基因-3胞外区序列,构建重组质粒,将重组质粒转染至HEK293感受态细胞中表达目的蛋白,并对目的蛋白进行SDS-PAGE及Western-blot检测,通过ProtParam软件分析淋巴细胞活化基因-3蛋白性质,通过SWISS-MODEL软件预测蛋白质结构。结果表明:PCR法成功扩增出目的条带,大小约为1 430 bp,1. 0%琼脂糖凝胶电泳显示酶切成功;经10%SDS-PAGE凝胶电泳分析,在68 ku处出现目的条带,目的蛋白成功表达;纯化后的蛋白质经Western-blot检测证明具有特异性;目的蛋白具有22种可能的折叠形态,理论等电点pI值为9. 08,蛋白质结构不稳定,亲水性较差。说明试验成功表达了淋巴细胞活化基因-3蛋白。  相似文献   

古尔班通古特沙漠南缘蜱携带无形体的调查   总被引：1，自引：0，他引：1  

孟庆玲  乔军  盛金良  王俊伟  王为升  姚娜  陈创夫  张丽娟 《中国兽医学报》2012,32(8):1158-1163

为了解古尔班通古特沙漠南缘蜱携带无形体的状况,在该地域3个不同生境区域11个地点采集家畜寄生蜱标本,进行分类鉴定;运用套式PCR筛选无形体阳性蜱样本,并用半套式PCR扩增无形体科16SrRNA基因5′端高变区,进行克隆测序;将所获得的DNA序列与GenBank收录的序列作比对,并用Mega 5.0软件构建系统发育树,鉴定蜱携带无形体的种类。结果共采集708只蜱,鉴定为4个属8个种。在分类后的236份蜱样本中,检测出无形体阳性25份,阳性率为10.59%。序列比较发现,在亚洲璃眼蜱、血红扇头蜱、残缘璃眼蜱、长角血蜱中分别存在查菲埃立克体（Ehrlichia chaffeensis）、犬埃立克体（Ehrlichia canis）、边缘无形体（Anaplasma marginale）和绵羊无形体（Anaplasma ovis）的16SrRNA基因片段。研究结果证实在古尔班通古特沙漠南缘家畜寄生蜱中携带无形体,提示该地域可能是无形体病的自然疫源地。  相似文献   

患隐性乳房炎的奶牛乳汁pH变化与体细胞关系的研究   总被引：5，自引：1，他引：5  

刘文进  陈创夫  滕文军  王琦  詹勇华 《中国畜牧兽医》2005,32(3):19-22

采集新疆垦区奶牛乳样若干份(604份)，利用奶牛隐性乳房炎诊断液、光学显微镜，以及pH211酸度计测定乳汁的pH与体细胞的含量，确定奶牛隐性乳房炎与牛乳pH的变化关系。结果表明，牛乳pH的变化与体细胞和炎性细胞的含量呈正相关，即泌乳奶牛乳汁的正常pH在6．4～6．6之间；体细胞在20万～50万个／ml区间时，奶牛乳汁pH在6．6～6．8之间；体细胞在50万～150万个／ml区间时，奶牛乳汁pH在6．8～7．0之间；体细胞在150万～500万个／ml区间时，奶牛乳汁pH在7．0～7．2之间；体细胞大于500万个／ml时，奶牛乳汁pH在7．2以上。  相似文献   

犬瘟热的诊治     

陈创夫  徐国红 《畜牧与兽医》1998,(1)

犬瘟热的诊治陈创夫徐国红（塔里木农垦大学动物科学系新疆阿拉尔８４３３００）近几年阿拉尔地区犬的发病率较高，通过临床观察、病理剖检及免疫组织化学诊断为犬瘟热。经过治疗、预防免疫注射，控制了本病的流行。现报告如下。１临床症状病犬体温达４０～４１０℃，持...  相似文献   

布鲁氏菌DnaJ蛋白的表达及功能分析     

印双红  张俊波  李寅翠  张孟琴  毛宏  易萌  蔡春连  张红  李志强  陈创夫 《中国兽医杂志》2022,(1):10-15+26

本试验旨在运用分子生物学与生物信息学方法对布鲁氏菌DnaJ蛋白进行分析;将该蛋白进行原核表达,并检验纯化蛋白在体外或体内诱导Th1和Th2型免疫反应的能力。以布鲁氏菌M5-90为模板成功扩增目的基因DnaJ,构建重组表达载体pET-30a-DnaJ;利用SDS-PAGE检测DnaJ重组蛋白在大肠杆菌中的表达,并对其进行纯化;用DnaJ蛋白刺激RAW 264.7细胞和小鼠脾细胞,并用DnaJ蛋白免疫小鼠;利用ELISA试剂盒检测细胞因子IFN-γ、IL-4及小鼠血清中IgG1和IgG2a抗体水平的变化。结果显示,DnaJ蛋白二级结构以无规则卷曲结构为主,该蛋白有11个抗原决定簇;SDS-PAGE结果显示,重组菌在37.7 kDa大小的位置有特异表达条带,获得了DnaJ纯化蛋白;DnaJ蛋白可诱导宿主细胞和小鼠产生高水平IFN-γ、IL-4、IgG1和IgG2a抗体。鉴于DnaJ蛋白可在体外或体内诱导Th1和Th2型免疫反应,有望成为布鲁氏菌病的候选亚单位疫苗。  相似文献