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本研究旨在建立一种简单有效的分离大鼠肝细胞和kupffer细胞的方法。大鼠体外肝脏灌流,采用percoll密度梯度分离法分离肝细胞与kupffer细胞,糖原染色鉴定肝细胞,墨汁吞噬实验鉴定kupffer细胞。结果表明,此方法分离的肝细胞和kupffer细胞活性都在95%以上,新分离的肝细胞鹅卵石样,贴壁能力不是特别强,24 h可分化出不同形态。Kupffer细胞具有较强的吞噬能力和贴壁能力,可看到墨汁被细胞吞噬。结论:本实验建立的分离培养方法较稳定,为开展肝细胞和kuffer细胞的相关研究提供方法依据,也为建立各种体外细胞分离培养方法提供借鉴。 相似文献
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外泌体是一种细胞分泌的囊泡，里面含有丰富的核酸和蛋白质等物质，对于信息的传递、免疫功能的调节具有重要作用.本研究通过培养巨噬细胞、树突状细胞，收集上清液，分别采用外泌体提取试剂盒法和超速离心法提取外泌体，使用透射电镜法和Western blot法进行外泌体鉴定. 将提取的外泌体转染荧光标记，与淋巴细胞共同孵育24 h.采用含荧光标记的miR-155，分别转染到巨噬细胞和树突细胞中，提取细胞上清的外泌体，与淋巴细胞共孵育24 h.结果显示：超速离心法提取的外泌体更纯，但是SBI试剂盒提取的外泌体更多，适用于下一步试验；巨噬细胞及树突状细胞分泌的外泌体加荧光标记与淋巴细胞共培养后，可使淋巴细胞荧光增加；荧光标记miR-155的外泌体与淋巴细胞共培养，可使淋巴细胞荧光增加. 本研究证实了树突细胞、巨噬细胞分泌的外泌体及其包含的miR-155可作用于淋巴细胞，参与免疫细胞间的通讯，为进一步阐明外泌体的作用机制奠定了理论基础. 相似文献
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