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猪繁殖与呼吸综合征病毒S1株单克隆抗体的制备及生物学特性研究 总被引:3,自引:0,他引:3
通过差速离心和蔗糖密度梯度了心法对猪繁殖与呼吸综合征病毒沪1(PRRSV-S1)株进行抗原纯化。免疫BAIB/c小鼠,取脾细胞与SP2/O融合,用间接ELISA和有限稀释法,获得2株稳定分泌抗PRRSV单抗的杂交瘤细胞株,分别命名为AG、BD3。ELISA交叉试验和阻断试验表明,2株单抗具有高度特异性。AG1可与PRRSV-S1,欧洲株LV,美洲株VR-2332反应,而BD3与美洲株VR-2332反尖较弱,2株单抗对猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)均不反应。阳性杂交瘤细胞的上清液效价是:1:256-1:5123,腹水效价分别在1:10^3-1:10^5之间。AG1和BD3各有100条染色体,琼脂双扩散试验结果表明AG1属于IgG2b,BD2属于IgM。Western blot试验表明AG1和BD3是针对N蛋白抗原表位的特异性单抗。 相似文献
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猪繁殖呼吸综合征(PRRS)是病毒引起的一种猪的新的传染病,该病以引起母猪发热、厌食、流产、产木乃伊胎及弱仔,仔猪和育成猪出现呼吸道症状,导致高致死率为特征。该病1987年首先发现于美国,并以极快的速度向世界各地传播和蔓延。 相似文献
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传染性支气管炎病毒中国地方分离株RFLP基因分型的研究 总被引:5,自引:1,他引:4
为初步确定我国不同地区流行的传染性支气管炎病毒(IBV)的基因分型,对分离自国内8个不同地域疫区的IBVQD、GZ、ZZ、TJ、DL、YC、JS1和JS2及参考株M41、H52和T的S1基因RT-PCR扩增cDNA进行HaeⅢ的RFLP分析。结果,QD与MD41、H52同属Massachussete基因型,GZ、ZZ、YC与T的基因型相同,DL、JS1和JS2则表现为各自独立的基因型,而TJ则为DL和T2种基因型毒株的混合感染,表明我国的广大地域内存在着Mass基因型、T基因型和可能的变异株IBV的流行。 相似文献
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我国鸡传染性支气管炎病毒地方性流行毒株S1基因的RT-PCR扩增及其克隆与鉴定 总被引:2,自引:0,他引:2
采用RT-PCR方法,以IBVS1全基因特异性引物分别从我国华东(HD)、华北(HB)、华中(HZ)、华南(HN)、西北(XB)及东北(DB)等地的IBV流行株基因组中扩增出预期的1.7kb左右的DNA片段。PCR产物的HaeII酶切分析及其与英国IBVS1全基因核酸探针的分子杂交证实所获6个IBV流行株的PCR产物为IBVS1基因。将此6个毒株的S1基因PCR产物分别进行5’和3’端的BamHI和HindII酶切识别位点的分子修饰之后插入到克隆质粒pUC18的BamHI/HindII位点,在大肠杆菌中实现了目的基因的分子克隆。S1基因的RFLP分析表明我国IBV已有分子水平的变异。 相似文献
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IBV地方分离株致病原性和血清学分型的比较 总被引:1,自引:1,他引:0
将6株分离自国内不同地方的IBV流行株分别感梁SPF鸡,对气管和肾桩进行系统病理观察,发现6株IBV在至于致病原性和组织嗜性上存在显著差异,其中QD可引起严重的呼吸道损伤,并伴有相对较轻的肾脏损伤,其余5株对肾脏损伤较为严重地呼吸道损伤相对温和。用气管环组织培养交叉中和实验(SN)和SAS软件对6株分离毒进行血清学分型研究,结果显示QD株属于M型,ZZ、GZ属于T型,而TJ、DL和YC株是不同于M 相似文献
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伪狂犬病病毒上海株gE基因克隆及其含GFP基因质粒载体的构建 总被引:3,自引:0,他引:3
根据已发表的伪狂犬病病毒(PRV)gE基因序列设计1对引物,用PCR法扩增了PRV上海株(PRV-SH)的gE基因,并克隆入pUC18中。利用gE基因中限制性酶切位点,把绿色荧光蛋白(GFP)的基因表达盒插入gE基因中,构建了含GFP的载体pUCgE-GFP。 相似文献
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猪繁殖呼吸综合征 (PRRS)是由PRRSV引起的传染病。 1 997年我们从上海郊县发病猪场的死胎和死仔中分离到PRRSVS1毒株 ,经鉴定属美洲型毒株〔1〕。PRRSV对母猪和仔猪易感 ,感染后在临床症状方面可分二大类 ,一类是母猪表现为繁殖障碍 ;另一类是仔猪和育成猪表现出呼吸道症状。本试验将PRRSV上海分离株接种易感仔猪 ,以复制出PRRS病症 ,从而进一步确证分离到的S1毒株属PRRSV。1 材料和方法1 .1 试验用仔猪 ,从上海远郊一个PRRS阴性猪场购买 ,隔离饲养 ,经检测抗体阴性 ,作为本试验用猪。1 .2 病毒 … 相似文献
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