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旨在探究牛支原体（Mycoplasma bovis,Mb）NADH氧化酶NOX2的生物学功能,本研究参照GenBank中Mb湖北分离株（Mb Hubei-1 strain）nox2基因序列设计引物,应用PCR扩增获得Mb临洮分离株的nox2基因,在测序及序列优化的基础上,构建原核表达载体pET-nox2,并在大肠杆菌Rosetta（DE3）中诱导表达,进而对表达产物rMbNOX2的酶促活性、免疫原性,NOX2在Mb内的分布,rMbNOX2抗血清的补体介导体外杀菌活性和对Mb黏附宿主细胞的抑制活性进行了分析。结果表明,Mb临洮株nox2基因全长1 350 bp,与GenBank中已知序列的Mb nox2基因序列比较,除Mb JF4278株相似性为97.93%外,其余均为99.93%。SDS-PAGE结果显示,优化的nox2基因在大肠杆菌中成功表达,重组蛋白rMbNOX2相对分子质量约为67 ku,且具有良好的酶促活性;ELISA与Western blot结果显示,rMbNOX2具有良好的免疫原性,且Mb NOX2在细胞浆中的分布多于细胞膜;补体介导的体外杀菌试验及黏附抑制试验证实,rMbNOX2抗血清具有明显的补体介导杀支原体活性,并可有效抑制Mb对宿主细胞的黏附。本研究为深入探讨Mb NOX2生物学功能奠定了基础。 相似文献
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为研究产单核细胞李氏杆菌、伊氏李氏杆菌和韦氏李氏杆菌的致病性差异与Sigma B基因的关系,分别对其Sigma B基因进行克隆、测序。扩增出Sigma B基因780bp,编码260个氨基酸,核酸序列同源性在87.4%～91.2%之间,氨基酸序列的同源性为99.2%,碱基两两比对有48～49个碱基突变位点,且各有2个氨基酸发生变化。腹腔感染昆明系小鼠建立人工感染小鼠模型,对其精神状态、食欲及其皮毛的光泽度进行观察,死后小鼠的肝、脾、肺、肾等组织取样制作石蜡切片,在显微镜下进行观察。通过腹腔注射感染的小鼠,表现出典型症状的时间为感染后2d～5d,但7d后基本恢复正常。通过比较,产单核细胞李氏杆菌感染小鼠的肾、肝病变最为严重,伊氏李氏杆菌感染小鼠的肝和肺病变较为严重,韦氏李氏杆菌感染小鼠的脾和肺病变略为严重。3种李氏杆菌在基因和动物试验方面的研究,可以推测基因差异可能与细菌致病性或毒力有一定关系。 相似文献
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文化移情能力是一个民族文化魅力的体现，是在交际过程中国家、民族交际能力的重要标志和体现。在交际过程中，无论是以民族为单位，还是以国家为单位，都有着自己独特的文化。如何在交际过程中，将自己民族、国家的文化让人了解、接受、喜欢，利用文化移情来提高交际的质量。意识到文化移情能力的重要性，在交际过程中有所侧重，能达到事半功倍的交际效果。 相似文献
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为了筛选与单增李斯特菌(LM)生物被膜形成相关的非编码小RNA(sRNA),并初步探索sRNA及其靶基因生物学功能，本研究通过高通量测序和实时荧光定量PCR比较LM浮游菌和生物被膜形成不同时段sRNA的差异情况，筛选与LM生物被膜形成相关的sRNA;预测sRNA的靶基因及分析其可能参与生物被膜形成的调节通路。结果表明：与LM浮游菌相比，预测到38个新的sRNA,其中sRNA00085、sRNA00019、sRNA00058在LM生物被膜形成中显著上调，sRNA00054、sRNA00081、sRNA00111显著下调；3个上调sRNA和3个下调sRNA的靶基因可能参与碳代谢、不同环境中微生物代谢、核糖体、糖代谢、氨酰基-tRNA生物合成及脂肪酸代谢6条调控通路，是潜在的LM生物被膜调控因子。研究结果为深入研究LM生物被膜sRNA调控机制提供了理论依据。 相似文献
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