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为明确猪Myf5基因的蛋白结构及功能位点,从香猪、大白猪和大白×长白杂交猪背最长肌提取总RNA,采用RT-PCR技术克隆Myf5基因,其cDNA长893 bp,包括完整的开放阅读框768 bp,编码255个氨基酸。将所测序列与GenBank上已知猪种序列进行相似性比较,结果表明:香猪Myf5基因中有3个碱基变异,其中2个突变不改变编码的氨基酸为无义突变,1个突变使其编码的氨基酸由甲硫氨酸(M)变为亮氨酸(L)。大白猪没有碱基变化;大白×长白杂交猪Myf5基因中的1个突变,使其编码氨基酸由甘氨酸(E)变为谷氨酸(G)。将香猪与其他物种进行核苷酸和氨基酸编码区序列的相似性分析及生物信息学分析。相似性分析表明,香猪Myf5基因氨基酸编码区序列与绵羊、牛、马、兔、黑猩猩、非洲象和小鼠的相似性较高,均在88%以上,推测Myf5基因在哺乳动物具有一定的保守性;Myf5蛋白二级结构以无规则卷曲为主,其次为α螺旋,偶有β转角。预测Myf5蛋白不含信号肽序列,有29个磷酸化位点。 相似文献
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为了研究紫花苜蓿对猪生长及肉质性能的作用,选用16头长×大外二元育肥猪,在基础饲料中添加4%苜蓿,应用免疫组织化学、酶联免疫吸附试验、实时荧光定量PCR研究脂肪代谢相关因子在mRNA水平和蛋白质水平表达的差异。结果显示:饲料中添加苜蓿后,杂交猪骨骼肌细胞中瘦素(leptin)基因(P<0.05)和蛋白(P>0.05)的表达量下降,与日增重呈轻度负相关(r=-0.314);转录因子C/EBPβ(CCAAT/en-hancer binding proteins,CEBPβ)基因和蛋白的表达量变化不明显;过氧化氢酶体激活增殖受体(peroxisome proliterator actiated receptors,PPARr)基因和蛋白水平高于对照组(P>0.05),与日增重(r=-0.837)、瘦肉率(r=-1.000)、pH1(r=-1.000)呈高度负相关,与脂率(r=1.000)、熟肉率(r=1.000)高度正相关;脂联素(adiponectin)基因(P>0.05)和蛋白(P<0.05)表达量高于对照组,与脂率(r=-1.000)、熟肉率(r=-1.000)、胴体重(r=-0.500)、屠宰率(r=-0.500)、肉色评分(r=-0.500)、pH24(r=-0.500),肌内脂肪含量(r=-0.500)负相关,与日增重(r=0.837)、瘦肉率(r=1.000)、pH1(r=1.000)、眼肌面积(r=0.500)、失水率(r=0.500)正相关;脂肪分化相关蛋白(adiposedifferentiation-related protein,ADFP)基因(P>0.05)和蛋白(P<0.05)表达量上调,但与肉质、体增重等指标相关性不大;脂蛋白脂酶(lipo-protein lipase,LPL)基因和蛋白变化不明显,与各项屠宰指标不相关。这些结果表明一定量的紫花苜蓿下调Leptin、通过CEBPβ上调PPARr、ADFP和Adiponectin 3个基因和蛋白的表达,增加猪的日增重、肌内脂肪,影响肉质性状,对LPL的作用较小。这些研究为紫花苜蓿在养猪业中的开发利用奠定了理论基础。 相似文献
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紫花苜蓿对猪骨骼肌细胞肝X受体基因和蛋白表达的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
为了探讨紫花苜蓿对猪骨骼肌细胞中肝X受体(liver X receptors,LXRs)表达的影响及其与胴体肉质的关系,采用免疫组织化学方法检测LXRs蛋白的分布,通过酶联免疫方法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)研究LXRs蛋白总量的改变,以荧光定量PCR方法分析猪骨骼肌细胞中LXRs基因mRNA的表达变化。结果表明,LXRs定位于骨骼肌细胞的细胞质、细胞膜和细胞核内;与对照组相比,日粮中添加4%紫花苜蓿能使LXRs基因和蛋白表达量明显上升(P<0.05),并使猪的瘦肉率降低(P>0.05),肌内脂肪含量显著增高(P<0.05),同时大理石纹评分较好(P<0.05),滴水损失下降(P<0.05),细胞间隙变小(P<0.05);添加6%紫花苜蓿使LXRs基因和蛋白表达量上升(P<0.05),但低于4%紫花苜蓿组(P>0.05),同时大理石纹评分及失水率增高(P<0.05),板油重下降(P<0.05)。结果提示,紫花苜蓿添加量的不同对猪肉品质的作用效果不同,为紫花苜蓿在养猪业的科学应用奠定了理论基础。 相似文献
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