转基因甘蔗BtG-2的T-DNA侧翼序列分析及其转化事件特异性检测     

冯翠莲  万玥  冯小艳  王俊刚  赵婷婷  王文治  沈林波  张树珍 《热带作物学报》2021,42(9):2468-2477

转基因甘蔗BtG-2是利用农杆菌介导法把Cry1Ac-2A-gna融合抗虫基因导入‘新台糖22号’的转基因甘蔗株系,具有良好的抗虫特性和农艺性状。为了明确转基因甘蔗BtG-2的分子特征及其检测方法,推进其生物安全性评价工作,以BtG-2的T2代为研究材料,利用Southern杂交检测外源基因在转基因甘蔗基因组内的拷贝数;利用染色体步移技术分离外源基因在甘蔗基因组中插入位点的侧翼序列,并建立了该转化体高效灵敏的特异性PCR检测方法。结果表明：Southern杂交检测证明外源T-DNA以单拷贝方式插入BtG-2株系;经过3次的热不对称巢式PCR扩增,获得外源基因T-DNA左边侧翼序列984 bp和右边侧翼序列705 bp;以这2个序列和相应的T-DNA的左右端序列分别设计3对检测引物对,建立了BtG-2株系的转化事件特异性PCR检测方法,扩增效率最高的引物对LS011/LA451和RS160/RA588分别扩增到440 bp和428 bp的特异片段。其中T-DNA左侧设计的LS011/LA451检测引物对扩增的灵敏度高、特异性强,能够在甘蔗BtG-2基因组DNA相对含量为0.1%的模板中检测出转基因目的成分,相当于9个单倍体基因组拷贝数。本研究完成了转基因株系BtG-2的分子特征及其转化事件特异性检测,为该转基因甘蔗及其衍生产品的检测和身份识别提供技术依据。  相似文献   

新桑树形养成法     

费斯文 《新农村》1996,(6)

新桑树形的养成就是要通过剪伐,人为控制树势,使枝条分布均匀,树冠整齐,操作方便;剪伐还能抑制生殖生长,促进营养生长,减少花果;通过剪伐,树干部分的比例大大减少,使养分集中,枝叶茂盛,叶片增大增厚,不仅可增加产叶量,而且可提高叶质。  相似文献   

鳜鱼早繁技术     

费忠智张国喜  缪晓燕 《科学养鱼》2005,(10):10-11

我们在1月中旬前将鳜鱼亲本移入温室逐步加温,进行强化培育,使鳜鱼在3月底至4月初达到性成熟,从而达到提早繁育苗种、当年养成商品鱼的目的。现将其主要技术要点总结如下:一、亲鱼的来源与选择用于人工繁殖的鳜鱼亲鱼,可直接从天然大水域中捕捞。捕捞的亲鱼应逐尾严格选择,要求  相似文献   

依靠科技进步发展蚕桑生产——新浦村亩桑产茧突破二百公斤的技术探讨     

张祖荣费斯文  周均铭陈福良 《蚕桑通报》1995,26(1):38-39,37

依靠科技进步　发展蚕桑生产──新浦村亩桑产茧突破二百公斤的技术探讨海盐县农林局张祖荣，费斯文，周均铭，陈福良海盐县通元镇新浦村原是嘉兴市和海盐县实施蚕桑“星火计划”的高产示范村，１９９３年依靠科技进步，实行科学培桑和养蚕已达到亩桑产茧２００公斤指标。...  相似文献   

蝎子草属植物的分类     

费永俊  周秀佳 《湖北农学院学报》1996,16(1):43-50

在对我国１３个省区的蝎子草属植物进行调查、采集、鉴定大量植物标本的基础上，比较分析了国内外有关资料和模式标本，研究了其系统发育的规律性，提出蝎子草属４种２亚种的新观点。  相似文献   

灵芝的人工栽培     

费显龙  刘占辉 《中国林副特产》1996,(3):32-33

灵芝Gnoderm lucidum Krst.多孔菌科.别名木灵芝、红芝、赤芝、万年蕈 。菌盖色彩有红、黄、紫、白、黑5种。表面革质有光泽,素有五灵芝之美称。美丽多彩的子实体具有很高的观赏价值。主要含有机锗,具有促进机体功能代谢、延缓衰老的功效。除用于医药(有滋补、强壮、消炎、利尿、健胃等功效),还用于高级化妆品的保健添加剂、用酒浸泡灵芝,长期饮用也能收到延缓衰老的功效。 随着经济的发展和人们生活水平的不断提高,开发灵芝资源前景广阔。1 生态及生长习性 灵芝子实体由菌丝形成,菌丝不透明,具有分隔及分枝,表面常分泌白色草酸钙结晶;子实体有菌柄,菌盖及菌伞下边的子实层三部分组成。成熟的子实体木质化,表面革质化有光泽,多为赤褐色和紫褐色。正常的菌盖多呈肾形,上有环状轮纹及辐射状皱纹。大小薄厚不一,一般5～12×10～20cm;厚2～3cm;菌盖下面有无数小孔,平均 4～5/mm2,管孔呈白色或淡褐色,内壁为子实层,孢子从子实层内产生,褐色,卵形.8～11×5～7μm,中央含个大油滴。菌柄侧生.长5～20cm,色与盖同。 灵芝是喜培养基质含水率高、偏酸和培养场所空气湿度大且清鲜的高温高湿型木腐真菌。菌丝生长温度4～40℃;要求基质的含水率达50×10~(-2)80×10~(-2);而子实体在18℃以上时才能分化和发育。菌  相似文献   

君子兰转化酶基因片段(CMCW1)的克隆和序列分析     

汪琼  王燕  程水源  费永俊  金卫斌 《园艺学报》2004,31(2):256-259

 分析植物酸性转化酶基因的保守区序列，设计一对PCR引物，以君子兰基因组DNA为模板，采用PCR方法扩增出长约500 bp的DNA片段，克隆入pGEM-TEasy载体，测序结果表明获得君子兰酸性转化酶基因家族的一个成员CMCW1，该基因片段长518 bp，不含内含子，编码172个氨基酸。其序列已在GenBank中登记(登记号为AY151269)。在GenBank中进行同源性检索的结果表明，该成员编码的氨基酸与其它植物细胞壁酸性转化酶编码的氨基酸同源性较高。  相似文献   

蟹池套养克氏原螯虾不同放养密度养殖对比试验     

张国喜  费忠智  冯亚民  殷秋所 《水产养殖》2011,32(11):18-20

为探索合理的虾蟹养殖配比结构，形成适合本地区的河蟹、克氏原螯虾高效养殖模式，我们结合《克氏原螯虾产业化关键技术研究与规模化示范推广》项目的实施，2010年在江苏红膏大闸蟹有限公司进行了蟹池套养克氏原螯虾不同放养密度养殖效果的对比试验，现将试验情况总结如下。  相似文献   

盐引发对油菜种子萌发及幼苗形态特征的影响     

王灵敏  程凯乐  梅泽宇  张悦薇  张文治  高山 《塔里木大学学报》2021,(3):55-60

为明确种子引发技术对油菜成苗的影响,本试验研究了不同浓度NaCl溶液引发剂(0 g/L、25 g/L、50 g/L、75 g/L、100 g/L)和不同引发时间(1h、2h、3h、4h、5h)对'华油杂62'品种油菜种子萌发、生长的影响.结果表明:高浓度长时间的引发对种子出苗存在抑制效果;对幼苗的子叶生长有促进作用,对...  相似文献   

10种海参16SrDNA 序列多样性及其亲缘关系分析   总被引：1，自引：1，他引：0  

费来华  李赟  陈家鑫 《中国水产科学》2008,15(5)

运用PCR扩增10种海参的16SrDNA部分序列,并测序.获得大小为566bp的序列,利用DNAsp4.0软件分析比较10种海参的碱基组成、各碱基变异位点数、插入或缺失位点数,并采用MEGA4.0软件分析彼此间的遗传距离.结果发现,10种海参富含AT碱基,A T的含量平均为57.0%,不同种海参间发生碱基转换、颠换及发生插入或缺失变异的位点数差异很大,10种海参彼此间的遗传距离在0.007～0.316之间.所得结果与GenBank中10种海参的相应序列进行比对分析,同时用MEGA4.0和PAUP4.0软件构建进化树,分析其亲缘关系.结果表明,利用16SrDNA序列的差异可以将分属于海参科(Holothuriidae)与刺参科(Stichopodidae)的海参完全分开,瓜参科(Cucumariidae)的2个种与刺参科的亲缘关系较近.对不同海参种间亲缘关系的分析结果还表明,同属于剌参科的仿刺参(Apostichopus japonicus)与加州拟刺参(Parastichopus californicus)和具疣拟刺参(Parastichopus parvimensis)亲缘关系最近,同属于海参科的格皮氏海参(Pearsonothuria graeffei)与白尼参属的蛇目白尼参(Bohadschia argus)和图纹白尼参(B.marmorata)亲缘关系最近,而同样为海参科的墨西哥海参(Holothuria mexicana)则与红腹海参(Hothuria edulis)关系最近.这些资料为海参的种质资源管理、新种引进和种质改良提供了基础的分子生物学依据.  相似文献