鸡大肠杆菌病中草药佐剂多价灭活苗的研制——Ⅰ、疫苗生产工艺   总被引：2，自引：1，他引：1  

王文成  卫广森  王卓  尹广东  宣华  李素 《中国兽药杂志》2001,35(6):18-21

采用鸡大肠杆菌多发病型菌株以及地方病型菌株作为制苗用菌种，保证了疫苗既具有一定的广谱性，又具有一定的特异性；采用液体通气培养方法，在一定程度上提高了菌数；采用中草药蜂胶作为佐剂不但可有效地提高机体的免疫功能，同时兼具有治疗，保健和促生长作用，另外蜂胶还可以增大抗原表面积，延长抗原在组织的贮存时间，可持久地释放抗原，保证了机体持续产生高效价抗体。  相似文献   

猪肺炎支原体膜蛋白的电泳分析及免疫印迹检测   总被引：1，自引：1，他引：0  

张映  王肇悦  聂向庭 《畜牧与兽医》2003,35(5):6-8

以猪肺炎支原体Z株为试验材料,采用SDS-PAGE和Western印迹对该菌膜蛋白进行了分析。研究表明:猪肺炎支原体经A_(26)液体培养基培养,15000 r/min离心收集菌体细胞,低渗超声法破膜获得膜制剂后,应用12.5％的凝胶对膜蛋白进行SDS-PAGE分离,在电泳图谱上呈现出36条蛋白带,相对分子质量范围为1.18×10~4～9.12×10~4。同时以膜制剂作为抗原,分4次免疫试验兔,心脏采血,提取抗血清,并分离纯化得到IgG,然后进行Western印迹法检测。其结果发现在SDS-PAGE分离得到的36种膜蛋白(或多肽)中,有6种蛋白具有免疫原性。  相似文献   

猪肺炎支原体黏附因子基因R1R2区的克隆及表达   总被引：4，自引：0，他引：4  

张映  贾广乐  邵国青  聂向庭 《中国兽医学报》2003,23(4):338-341

根据GenBank登录的猪肺炎支原体232株P97基因和J株黏附因子基因设计了1对引物，以我国猪肺炎支原体Z株(强毒株)基因组DNA为模板，通过PCR方法扩增了该株黏附因子基因的部分序列。经序列分析后，重新设计了1对带有EcoRI和HindⅢ酶切位点的引物，并经引物的定点突变，PCR扩增了Z株黏附因子的R1R2区。扩增产物经双酶切后克隆到表达载体pET-32(a) 中。该重组质粒经酶切鉴定后，将其具有正确阅读框架的重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞，37℃下经IPTG诱导表达，得到相对分子质量约29000的融合蛋白，表达量约为11％。  相似文献   

禽胰多肽对肉鸡肝脏和小肠组织中APPR mRNA表达量影响的研究     

李丽芳  贾球锋  张映  聂向庭 《动物营养学报》2009,21(1)

本试验旨在研究禽胰多肽(APP)对肉鸡肝脏和小肠组织中APPR mRNA表达量的影响.试验以APP粗提液及层析APP制品为材料,选取90只1周龄艾维菌肉鸡随机分为5组,每组3个重复,每个重复6只鸡.Ⅰ设为对照组,Ⅱ、Ⅲ设为饲饮组,Ⅳ、Ⅴ设为注射组.在第7周末,屠宰取其肝脏、小肠组织,运用SYBR Geen Ⅰ实时荧光定量PCR(RT-PCR)法对肝脏和小肠中APPR mRNA的表达进行相对定量分析.结果发现:注射组与饲饮组肝脏及小肠中APPR mRNA的表达水平与对照组相比均呈下降趋势,且注射组降低程度大于饲饮组降低程度;其中,注射组与饲饮组中均是层析APP制品比APP粗提液的下降较明显.提示在外加APP情况下可对APPR mRNA的表达呈现抑制作用.本研究结果为进一步探讨APP与其受体之间的关系,从而为阐明其生理功能和作用机制提供一定的理论依据.  相似文献   

堆型艾美耳球虫早熟株免疫雏鸡后血清抗体水平动态变化的研究     

邹丰才  聂奎  姜悦平  李明波  张桂英  万宝云 《中国兽医寄生虫病》2003,11(4):8-11

用堆型艾美耳球虫早熟株对雏鸡进行一次免疫和二次免疫试验 ,研究雏鸡血清抗体的动态变化。试验结果显示 ,在一次免疫试验中 ,各剂量组雏鸡均在免疫后 2天血清抗体出现较高的 OD值 ,之后呈下降趋势 ,11天后逐渐上升 ,到 12～ 13天时出现第 2个峰值 ,各组间的血清抗体 OD值比较 ,3 0 0 0个卵囊 /只剂量组极显著 (P<0 .0 1)高于 10 0 0个 /只、2 0 0 0个 /只和 5 0 0 0个 /只剂量组。在二次免疫试验中 ,8日龄首免、14日龄二免组雏鸡的抗体水平动态变化整体呈上升趋势 ,峰值 (0 .3 75 )出现在二免后第 10天 ,其后稳定地维持在较高水平 (平均 OD值为 0 .3 5 ) ,并且其抗体水平显著地高于 6日龄首免、12日龄二免组 (P<0 .0 5 )。抗体水平动态变化表明 ,堆型艾美耳球虫早熟株有较强的免疫保护力 ,其免疫方式可选用一次免疫 ,剂量为 3 0 0 0个卵囊 /只 ,也可采用二次免疫 ,即 8日龄首免 (15 0 0个 /只 ) ,14日龄二免 (15 0 0个 /只 ) ,从抗体动态变化的稳定性看 ,二次免疫更佳  相似文献   

表达大肠杆菌K88ac-ST1-LTB融合蛋白工程菌株的免疫原性研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

许崇波  卫广森  王文成  王卓 《中国预防兽医学报》2003,25(1):9-12

已构建的能表达大肠杆菌K88ac-ST1-LTB融合蛋白的工程菌株BL21（DE3）（pXKST3LT5)及其表达产物经动物试验证实没有毒性反应。用从IPTG诱导的工程菌中提取的包涵体或经甲醛灭活的工程菌制成抗原，免疫小鼠，结果免疫小鼠至少能抵抗2MLD的大肠杆菌强毒株C83902（K88ac,ST^ ,L^ )的攻击，用提取的包涵体免疫家兔后，采集的血清能够中和天然ST1的毒性，这表明构建的工程菌株BL21（DE3）（pXKST3LT5)可以作为预防幼畜大肠杆菌性腹泻基因工程菌苗的候选株。  相似文献   

发菜形态特征及其与环境因子的关系   总被引：5，自引：0，他引：5  

唐进年  张盹明  聂文果  张锦春 《干旱区资源与环境》2003,17(1):123-128

通过野外调查和室内观察分析 ,天然发菜原植体的形态主要有柱状和带状两种 ;群体形态有单丝体、团块状、辫状、束状和网状。原植体的形态特征受环境湿度的影响较大 ,在降水量较大的地区 ,发菜原植体增粗 ,直径在 0 .0 5～ 0 .2 5 mm之间 ,带状发菜的比例较大 ,占 30～ 60 % ,吸水后藻体的颜色一般呈棕褐色 ;在降水量较小或极端干旱地区 ,发菜以细丝状为主 ,直径在 0 .0 2～ 0 .2 2 mm之间 ,带状发菜的比例不足 2 5 % ,吸水后藻体的颜色呈绿色或浅棕褐色。发菜群体形态的形成和发育与自身的生长特性有关外 ,主要与环境因子特别是降雨量、地形及自然外力 (地面径流和空气流动 )有关。  相似文献   

猪链球菌病二价灭活疫苗候选株培养条件的优化及其安全性试验     

王卓  舒秀伟  王文成 《中国兽药杂志》2004,38(7):34-36

筛选对猪致病力强、免疫原性良好的猪链球菌病兰氏C群LN01株和猪链球菌Ⅱ型LN05株,通过优化培养条件,LN01株和LN05株培养菌数最高分别为1.2×109和2.8×109CFU/mL;LN01株未见溶血素产生,LN05株溶血素效价为1∶64;脱毒剂A(甲醛)对其毒素的脱毒作用不明显,37℃脱毒30d,对仔猪的安全剂量为5mL;脱毒剂B的脱毒时间缩短为3d,安全剂量增加到10mL;试验还证实,37℃和60℃脱毒温度对本菌液脱毒效果无明显差异.  相似文献   

不同覆土深度对鸡腿菇子实体产量的影响   总被引：7，自引：1，他引：7  

杨宣华  张维民  关仕港  麦焯棉  聂呈荣 《中国食用菌》2004,23(2):27-28

本试验研究 11种覆土深度对鸡腿菇子实体产量影响。结果表明 ,不同覆土深度对子实体产量、有效子实体数和幼蕾数均存在显著的影响。覆土越厚 ,幼蕾数越少。当覆土深度在 0 5～ 3cm时 ,子实体产量和有效子实体数随着覆土层的加厚逐渐增加 ,在覆土深度为 3cm时达到最大值 ,覆土深度大于 3cm时 ,则随着覆土层的加厚而逐渐减少。从生产的角度看 ,覆土 3cm是比较适宜的覆土深度 ,此时的子实体产量最高。  相似文献   

Osmolarity,cell volume and proliferation in nasopharyngeal carcinoma cells     

WANG Li-wei  CHEN Li-xin  MAO Jian-wen  ZHU Lin-yan  NIE Si-huai  ZHONG Ping  SUN Xue-rong  CAI Bo  LI Pan 《园艺学报》2004,20(8):1349-1352

AIM: To investigate the relationship between osmolarity, cell volume and cell proliferation in nasopharyngeal carcinoma cells. METHODS: MTT method was applied to detect the proliferation ability of the poorly-differentiated nasopharyngeal carcinoma cell (CNE-2Z) under various osmolarity conditions. The flow cytometry was used to analyse cell cycle distribution. Cell volume was obtained by the image analysis of living cells and cell viability was determined by the trypan blue assay. RESULTS: Cultivation of cells under the hypertonic conditions of 370 and 440 mOsmol/L increased cell volume by 8.7% and 27.8% and facilitated cell proliferation by 22.2% and 33.9%, respectively. However, hypotonic incubation of cells with osmolarity of 160 and 230 mOsmol/L decreased cell volume by 12.8% and 4.1% and inhibited cell proliferation by 34.0% and 15.6%, respectively. Cell volume was positively correlated with cell proliferation rate. Long-term cultivation of cells under anisotonic conditions did not significantly alter cell cycle distribution, but hypotonic cultivation decreased cell viability. CONCLUSION: Proliferation of nasopharyngeal carcinoma cells was closely correlated with the osmolarity of culture medium and cell volume. Hypotonic cultivation may inhibit cell proliferation by decreasing cell volume to facilitate cell death mechanisms.  相似文献