鹿茸及鹿血中布鲁氏菌实时荧光定量PCR检测方法的建立     

郭子奕  任晓航  杜锐  李健明  时坤  刁乃超  宗颖 《吉林农业大学学报》2021,43(6):741-746

为建立可应用于快速检测鹿茸及鹿血中布鲁氏菌的方法,保证鹿产品的药用、食用安全,试验根据布鲁氏菌特异性基因IS711设计合成引物和探针,建立实时荧光定量PCR方法,对反应条件进行优化,并绘制标准动力学曲线,Y=-3.14X+37.62,R2=0.997.结果 表明:该方法具有良好的重复性、敏感性和特异性,组内、组间重复性试验Ct值标准差小于0.5,变异系数均小于2％,最小检测拷贝数为2.65× 101 Copies/μL.该方法对目的 基因检测灵敏度高,可用于鹿茸及鹿血相关样本的检测,也可用于布鲁氏菌的定性和定量检测,为相关鹿产品的质量安全评估提供重要技术保障.  相似文献   

利用SSR技术鉴定西瓜甜瓜种子纯度   总被引：1，自引：0，他引：1  

何玉  杨坤 《中国瓜菜》2020,(1):13-17

利用SSR分子标记技术对西瓜‘W1806’与甜瓜‘M1805’各3个批次及其亲本间的多态性进行引物筛选和种子的纯度鉴定。结果表明,在28对西瓜的SSR引物中,有5对引物在西瓜‘W1806’的F1代与亲本之间有很好的多态性。其中BVWS00839引物特异性好,条带清晰,父母本条带间隔明显,即作为3个批次的西瓜纯度鉴定的引物,其鉴定纯度分别为99.47%、98.96%和97.92%;在18对甜瓜的SSR引物中,只有1对CMBR052引物在F1代扩出的条带为典型的双亲互补型条带,故用该引物对甜瓜进行纯度鉴定,其纯度分别为97.90%、96.80%和97.40%。与田间鉴定结果的吻合率都在98%以上。这2个材料的吻合率说明SSR分子标记技术对西瓜和甜瓜纯度鉴定结果都是可靠的。  相似文献   

配料混合试验的设计和分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

莫惠栋 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》2004,25(1):1-4

系统地介绍了配料混合试验的基本概念．指出了混合试验与常规因子试验的区别。提出配料混合试验的3种设计，即顶点和边界点设计、矩心设计和极顶设计。以2个实例演示了混合试验资料的统计方法，包括回归和方差分析．驻点分析和等值线分析。  相似文献   

抗禽流感病毒H5和H9亚型血凝素特异性单克隆抗体的研制及应用   总被引：23，自引：0，他引：23  

秦爱建  邵红霞  钱琨  刘岳龙  金文杰 《中国预防兽医学报》2003,25(3):161-163

以禽流感题H5和H9亚型病毒分别免疫Balh／c小鼠，取其脾细胞与SP2／0的骨髓瘤细胞融合，用血凝抑制试验(HI）检测细胞培养上清，结果获得了6株特异性单克隆抗体，其中抗禽流感题亚型病毒血凝素特异性单克隆抗体细胞株3株，分别命名为4B6、4A3、3H1；抗H9亚型病毒血凝素单克隆抗体细胞株3株，命名为6E6、6B6和5B4。这些单克隆抗体小鼠腹水HI效价为2^13-15，细胞培养上清抗体HI效价为2^7-8。研究结果表明，所有这些单克隆抗体仅与试验的相应题或ID亚型病毒株发生特异性反应，而不能与鸡新城疫病毒、鹅新城疫病毒、鹅腺病毒和鸡产蛋下降综禽征病毒(EDS76)等反应。实验室检测结果证明，应用这些单克隆抗体能在24h内迅速检测出相应的禽流感病毒。所有这些单克隆抗体将在禽流感的预警预报工作中发挥重要作用。  相似文献   

鹿角炭角菌等三种真菌多糖对HIV-RT的作用   总被引：2，自引：0，他引：2  

刘庆洪  罗倩怡  冯昆  王贺祥 《中国食用菌》2004,23(4):29-30

热水抽提和酒精沉淀的方法提取鹿角炭角菌、香栓菌、茶树菇的多糖复合物 ,在反应浓度为 1mg/mL时 ,三种多糖对HIV逆转录酶活性的抑制率分别为 (80 4± 1 2 ) %、 (90 6± 1 7) %和 (84 5± 2 1) %。  相似文献   

春小麦新品种互麦14号栽培技术     

林有英  杨有来  席梅  莫玉芳 《青海农林科技》2006,(1):51-51,56

介绍了我省育成的春小麦新品种—互麦14号的丰产栽培技术。  相似文献   

不确定度评定方法在汽车事故再现中的应用     

邓海英莫耀祖  蒋淑霞韩志刚 《中南林学院学报》2006,26(4):96-100

介绍了不确定度理论及其评定方法，结合车辆碰撞事故的具体特点，给出了基于能量守恒的车速计算表达式．通过选择适当的输入参数作为不确定因子，分别计算各分量等效速度标准不确定度．考虑不确定度累积和传播，得到车速输出结果的合成标准不确定度和展伸不确定度，以此检验事故再现结果的准确程度．通过具体事故案例的分析计算和计算机检验，验证该方法的适用性．  相似文献   

RT-PCR技术诊断猪瘟的应用研究   总被引：22，自引：2，他引：20  

罗廷荣  莫扬  吴文德  黄玉华  黄伟坚  秦爱珍  刘芳  温荣辉  陆芹章  余克伦 《中国预防兽医学报》2003,25(3):219-222

应用反转录—聚合酶链反应(RT-PCR)对猪瘟进行诊断应用研究。应用RT-PCR况对来自广西不同地区的135份疑似猪瘟病料进行检测，以份诊断为阳性，阳性率62．2％。从百色、柳州地区等采集的健康猪扁桃体和淋巴结共276份，经RT-PCR检测，37份为阳性，阳性率为13．4％。其中健康猪扁桃体带毒较高，246份扁桃体中有35份阳性，占14．2％。采自柳州健康猪的26份淋巴结材料全为阴性，只有邕宁县的1份健猪淋巴结阳性。结果表明，RT-PCR技术可应用于猪瘟的临床诊断。  相似文献   

犬埃立克体实验模型初步研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

潘华  孙洋  马玉海  佟世德  莫卓寿  张雪颍  陈香蕊 《中国兽医学报》2001,21(3):271-273

将犬埃立克体标准毒株（Florida株）体外细胞纯培养物和我国犬埃立克体病病犬血白细胞分别接种于C3H小鼠，接毒后d，经PCR检测证实均感染成功。本试验为犬埃立克体病小动物模型的建立打下了基础。  相似文献   

RT-PCR及RFLP分析技术对鸡传染性支气管炎病毒的诊断和S1基因分型的研究   总被引：4，自引：0，他引：4  

磨美兰  李康然  韦平 《中国预防兽医学报》2001,23(4)

本研究使用分别扩增整个S1糖蛋白基因 (引物A)和S1糖蛋白基因N_端高变区Ⅰ (引物B)的 2对引物对 3个IBV标准株M41、Connecticut、Arkansas及 5个地方分离株 (C60 ,D41A ,D41B ,A112 1,A1171)进行RT_PCR扩增。用引物A时 ,有 5个IBV毒株扩增到目的片段 (172 0bp) ;用引物B时 ,所有 8个IBV毒株均得到与预计大小相符的目的产物 (2 2 8bp)。对 172 0bp的PCR产物用限制性内切酶HaeⅢ进行酶切 ,结果得出 3个不同的RFLP图谱 ,其中M41、Connecticut、D41B具有相同的HaeⅢ酶切图谱。Arkansas和D41A则分别具有互不相同的图谱 ;对 2 2 8bp的PCR产物进行DdeⅠ、RsaⅠ限制性内切酶消化 ,根据它们的RFLP图谱 ,8个IBV毒株可分为 5个基因型。综合 2对引物的PCR产物的RFLP分析结果 ,8个IBV毒株可分为 7个基因型 ,分型的结果与传统的血清学方法吻合。本研究建立的方法和技术具有快速、简单、特异、灵敏等优点 ,为现场流行毒株的定型(基因型 /血清型 )及其S1基因变异的跟踪研究以及更有效防制传染性支气管炎奠定了基础。  相似文献