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1.
【目的】分析确定黄柏、石菖蒲合剂抗炎作用的药效物质基础,并确定可能的作用靶点。【方法】通过小鼠耳廓肿胀试验检测黄柏、石菖蒲合剂的抗炎作用,通过网络药理学方法分析其与炎症相关蛋白的互作网络图,采用Cytoscape 3.6.1软件绘制药物-活性成分-疾病-共同靶点网络图,并进行GO功能和KEGG通路富集分析,应用AutoDock软件将主要活性成分与核心靶点进行分子对接。【结果】黄柏、石菖蒲合剂对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的抑制率为56.96%,与模型组差异显著(P<0.05)。通过网络药理学分析共获得30个黄柏、石菖蒲合剂性化合物,包括槲皮素、小檗碱、山柰酚等;获得25个黄柏、石菖蒲合剂与炎症交集靶点,包括白细胞介素-6(IL6)、IL1β、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT1)等;GO功能富集结果显示,生物过程、细胞组分和分子功能分别获得334、13和27个条目,其中生物过程涉及正调控一氧化氮生物合成过程、正调控凋亡过程、正调控平滑肌细胞增殖、炎症反应等;细胞组分涉及细胞外间隙、胞外区、分泌颗粒等;分子功能涉及细胞因子活性、酶结合、RNA聚合酶Ⅱ转录因子活性、配体激活序列特异性DNA结合...  相似文献   
2.
本研究旨在对鸡IL-21基因进行克隆、密码子优化、表达分析及生物活性初步研究,为进一步研究其功能奠定基础。首先利用生物信息学软件对鸡IL-21基因进行序列分析,然后,通过RT-PCR扩增鸡的IL-21基因,构建真核表达质粒pcDNA3.1A-IL-21-wt/MH,根据人偏爱密码子对鸡IL-21基因进行密码子优化,构建真核表达质粒pcDNA3.1A-IL-21-opt/MH。测序正确后转染HEK293T细胞进行表达,经His标签纯化后,通过脾脏淋巴细胞增殖实验鉴定纯化后的IL-21蛋白生物活性。结果显示,扩增的鸡IL-21序列与Genbank中的IL-21序列相对比有2个碱基发生突变(141C→141T,312C→312T),但不影响氨基酸序列;生物信息学分析表明,鸡IL-21基因含有信号肽序列可介导其分泌表达,同时含有1个潜在的N-糖基化位点;Western blot在培养基和细胞内均检测到鸡IL-21蛋白的表达;密码子优化后IL-21表达水平与野生型相比显著升高(P<0.000 1);MTT法检测发现,纯化后的IL-21具有增强淋巴细胞增殖的功能。综上所述,本试验成功构建了鸡...  相似文献   
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