高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白Nsp4的表达及其抗血清的制备     

许傲天  周艳君  李国新  于海  闫丽萍  陈宗艳  张善瑞  王礞礞  姜一峰  王亚欣  田志军  童光志 《中国兽医寄生虫病》2009,17(3):21-26

根据GenBank中已发表的高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（Highly Pathogenic Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV）HuN4株全基因组序列,设计合成一对引物,对PRRSV HuN4株非结构蛋白Nsp4（Nonstructural protein 4基因进行RT-PCR扩增,克隆到原核表达载体pET30a（＋）中,构建重组表达载体pET30a-Nsp4,经酶切测序鉴定。将pET30a-Nsp4转化表达菌株BL21（DE3）,诱导可表达分子量约为27kDa重组蛋白。Westernblot显示其具有较好的反应原性,经镍离子亲和层析（Ni-NTA）纯化获得了高纯度的可溶性重组蛋白。将纯化的Nsp4蛋白免疫BALB／c小鼠,抗血清ELISA效价达1：16000,Western blot和IFA表明,所制备的抗血清能够特异性识别PRRSV自身表达的Nsp4蛋白。本研究获得了可溶性的PRRSV Nsp4蛋白,制备了Nsp4特异性多抗血清,为进一步研究Nsp4蛋白的亚细胞定位及功能奠定了基础。  相似文献   

狐、貉、貂阴道加德纳氏菌病和布鲁氏菌病流行病学调查     

闫喜军  肖家美  赵传芳  许傲天  王志刚  姜莉莉 《特种经济动植物》2004,7(12):35-35

阴道加德纳氏菌、布鲁氏菌是导致狐、貉、貂繁殖障碍的主要病原菌。为掌握狐、貉、貂阴道加德纳氏菌病、布鲁氏菌病流行状况 ,我们开展了这两种传染病的血清学调查 ,现将调查结果报告如下。1　样品来源被检样品取自山东、河北、辽宁、吉林、黑龙江、内蒙古、河南、天津等 8个省  相似文献