T7 RNA多聚酶基因的克隆、序列测定及其在E.coli中的表达     

余兴龙  涂长春  徐兴然  张茂林  张青婵  李作生 《中国兽医学报》2003,23(5):452-454

从BL21(DE3)E．coli菌株中以PCR的方法扩增得到了与T7RNA多聚酶(T7RNApolymerase，T7pol)基因大小一致的DNA片断。将PCR产物纯化后直接克隆到pGEM—T载体中，经酶切鉴定和DNA序列分析表明克隆得到了正确的T7pol基因。将T7pol基因亚克隆入pET-28b( )中，构建得到原核表达质粒pET28T7。该质粒的BL21(DE3)pLysS转化菌在IPTG的诱导下可表达约98800的蛋白，这与T7pol的相对分子质量一致。将该质粒转化DH5α、JMl09、HBl01、BL21(DE3)和BL21(DE3)pLysS等5种不同的宿主菌，仅有转化T7pol酶活性受到抑制的宿主菌BL21(DE3)pLysS才能得到转化子，而其余4种T7T7pol酶活性不受抑制的E．coli宿主菌不能得到转化子。pET28T7原核表达质粒这种仅能在T7pol酶活性受到抑制的宿主菌中才能存活的现象说明本试验所克隆的T7pol基因能正确表达出具有RNA转录酶活性的蛋白。  相似文献   

空气净化器为居室添“鲜”     

在寒冷的冬天  为了保暖  一般家庭都是门窗紧闭  室内空气很少循环对流  质量很糟。此时选购一台空气净化器  无疑是为自己和家人请了一位健康守护者。目前市场上主要有过滤式  电子集尘式  臭氧和负离子四种类型的空气净化器。各种净化器的工作原理和作用都有不同。因此  消费者选购时要先搞清楚家庭中的主要污染因素  然后根据不同产品的不同特点择优选购  对“症”购买。 《技术与市场》2001,(2):6-7

  相似文献   

轮状病毒VP4基因的克隆与核苷酸序列分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

王鹏雁  陈创夫  余兴龙  徐兴然  涂长春  张高轩 《猪业科学》2002,19(5):25-28

用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从轮状病毒感染的细胞中扩增了816bp的VP4片段中抗原表位区.通过T4 DNA连接酶将其直接连接于克隆载体质粒pGEM-T上,转化至受体菌DH5α中.提取质粒经PCR扩增、酶切鉴定,证明重组质粒pT-V4中含有轮状病毒的VP4基因片段.经核苷酸序列分析,表明克隆了轮状病毒主要保护性抗原VP4基因中抗原表位区.  相似文献   

农区发展养牛业的一项重大决策：兼谈陕西养牛业的发展     

黄广文  余兴全 《中国牛业科学》1992,18(4):45-49,43

根据国务委员陈俊生同志的指示,今年3月份农业部在北京召开了“全国农区发展畜牧业座谈会”。参加会议的有山东、安徽、河南、河北、黑龙江、吉林、辽宁、山西、陕西、四川10个省人民政府副省长、副秘书长、农业(畜牧)厅(局)长;安徽省阜阳、山东省菏泽、河南省周口地区的负责同志;国务院副秘书长李昌安、农业部部长刘中一、副部长洪绂曾、国家计委副主任刘江、财政部副部长项怀诚及国务院有关部门的工作人员共95人。国务委员陈俊生同志自始至终参加了会议,并做了重要讲话。会议确定“八五”期间全国上述10个省建设10个县作为示范区,国家重点投资,地方配套建设,以开展利用秸杆发展农区养牛业。  相似文献   

某猪场猪伪狂犬病免疫程序优化对比试验     

冯哲  余兴龙 《湖南畜牧兽医》2018,(2)

为了探究保育猪不同伪狂犬病免疫程序的免疫效果,笔者采取4种不同免疫程序进行试验,即4组猪群于35日龄首免和70日龄二免:A组分别免疫接种伪狂犬病弱毒疫苗和灭活疫苗;B组分别接种伪狂犬病灭活疫苗和弱毒疫苗;C组均接种伪狂犬病灭活疫苗;D组分别接种伪狂犬病弱毒疫苗,接种方式和剂量均按照说明书进行。于试验前(25日龄)和试验后(100日龄)应用ELISA法分别检测不同组别的猪群伪狂犬病毒g E和g B抗体水平水平,确定阳性率差异。结果显示:免疫程序A和B可以均能有效控制猪群伪狂犬病野毒的进一步流行,降低猪群的死亡率,但免疫程序B无法使猪群伪狂犬病得到净化,而免疫程序C和D均无法抑制伪狂犬病毒野毒的流行。因此,选择免疫程序A对于防控与净化伪狂犬病毒的发生与流行效果最好。  相似文献   

屠宰猪猪肺炎支原体P36、P46、P97 R1、P146氨基酸序列的差异分析     

李润成  方超  卿任科  葛猛  赵墩  胡玉立  余兴龙 《华北农学报》2019,34(2)

为了解猪肺炎支原体流行菌株遗传变异情况,选取2014-2017年不同时间、地点收集的17头猪肺炎支原体阳性屠宰猪肺脏灌洗液DNA为模板,进行猪肺炎支原体P36(编码具有强免疫原性的胞浆蛋白)、P46(编码具有强免疫原性的表面蛋白)、P97 R1区、P146高变区(猪肺炎支原体黏附气管纤毛细胞的重要功能区域)基因的PCR扩增、测序。结合GenBank登录的猪肺炎支原体相关序列进行氨基酸序列的比对分析。结果表明,比对的序列之间,P36、P46蛋白氨基酸序列同源性均在98.9%以上,但P97功能区R1区、P146多变区在菌株间存在较大差异。11个屠宰猪样本和5个GenBank登录菌株P97 R1区重复氨基酸序列数量达到14个以上,而GenBank登录的3个疫苗相关菌株(168株、168-L株、J株)及另外4个菌株、4个屠宰猪样本重复序列为9～11个不等;P146高变区氨基酸序列的差异主要集中在2个重复氨基酸序列区(R1、R2),GenBank登录的168株、168-L株、J株以及另外2个菌株,1个屠宰猪样本在R1区出现较多氨基酸缺失。168株、168-L株,6个屠宰猪样本及另外3个GenBank登录菌株在R2区出现了3～9个不等的氨基酸缺失。利用DNAStar进行抗原表位预测发现,菌株间P97 R1、P146 R1、P146 R2区氨基酸序列的差异,导致了抗原表位出现明显的变化。提示开展P97、P146等黏附因子的筛选和研究或许能进一步提升疫苗阻止猪肺炎支原体黏附气管纤毛细胞的作用,从而进一步改善疫苗的免疫效果。  相似文献   

母猪群猪瘟疫苗跟胎免疫与普免对猪瘟抗体水平的影响     

魏榕  岑静  彭旺  余兴龙  李润成 《猪业科学》2016,(5):96-98

母猪猪瘟疫苗的免疫方式分为跟胎和普免2种。为了比较2种免疫方式接种后母猪在一个生产繁殖周期内抗体水平的变化情况,本研究检测了6个饲养管理很好的猪场的猪瘟抗体水平。对其中跟胎免疫的4个母猪群在怀孕前期、怀孕中期、怀孕后期和哺乳期等4个阶段的抗体水平分别进行了检测,同时,对4个猪群的仔猪的母源抗体水平也进行了检测。对一个普免的猪群分别在其免疫后第1月、2月、3月和4月分别跟踪检测母猪猪瘟抗体。另外,分析了一个普免的猪群4年来的检测数据。结果发现不管是跟胎免疫还是普免,免疫水平好的猪群在一个生产周期内均可保持很高的抗体水平。而母猪群即使抗体水平很高且整齐度好,仔猪的母源抗体水平也难以保持较好的整齐度。  相似文献   

德阳市乡村机耕道将实现网络化     

贺去非  余兴  兰英  谢凯清 《四川农机》2001,(3):18

名列全省农机化工作前列的德阳市农机局，充分发挥职能作用，积极改善农村生产、生活条件，切实加强农田水利基本建设，努力进行乡村机耕道建设，乡村机耕道将实现网络化。 根据省人民政府精神，结合本市实际情况，市农田水利基本建设指挥部在下达全市“十五”期间“六六”目标任务时，涉及农机项目有乡村机耕道建设和新增提灌设备两项指标，德阳市农机局领导对此高度重视，成立了专门的领导班子，将两项目标任务细化分解下达到 6个县 (市、区 )农机局，要求他们与当地政府和相关部门认真衔接，切实抓好此项工作。截止 2001年 4月 24日，通…  相似文献   

提高手拖年检率的体会     

近年来  多功能拖拉机的较快发展  削弱了手拖的运输市场  随着手拖的迅速残旧老化  手拖的年检工作难度逐年增大  严重影响了我县农用拖拉机的年检率  成为农机监理工作的需待解决难题。这两年  象州县农机监理站在工作实践中不断的努力探索  取得了一定成效。年全县年检拖拉机台  超额完成上级下达任务  其中手拖 台  占.％  名列地区前茅。…… 《广西农业机械化》2001,(2):25-25

近年来，多功能拖拉机的较快发展，削弱了手拖的运输市场，随着手拖的迅速残旧老化，手拖的年检工作难度逐年增大，严重影响了我县农用拖拉机的年检率，成为农机监理工作的需待解决难题。这两年，象州县农机监理站在工作实践中不断的努力探索，取得了一定成效。２０００年全县年检拖拉机２ ９２１台，超额完成上级下达任务，其中手拖２ ２３５台，占７６．５％，名列地区前茅。１县乡相互配合，做到齐抓共管 由于农机及其驾驶员分布乡镇农村，农田作业场所遍布全县每个村寨角落，如果依靠县站的同志进行田检路查完成年检审工作，工作难度是…  相似文献   

小麦棉花套作机械化技术试验研究     

台沭云 《中国农机化》1994,(10):19-20,9

小麦棉花套作机械化技术试验研究台沭云棉花属经济作物，收益高，但要扩大棉花种植面积，则易造成粮棉争地的矛盾。山东诸城自然气候适宜种植棉花，在农作物栽培方面，处于一年一热有余，一年两熟不足的状况，棉花历年来为一年一作。存在问题一是土地在冬春季有５个月左右...  相似文献